流式测凋亡

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流式Annexin-FITC \/PI 双染法测凋亡,各个象限代表什么状态的细胞_百 ...
理论上无染色的细胞室健康细胞,annexin单染的是早期凋亡,双染是中期,PI单染是坏死细胞。其实这个检测的结果是很不准确的,已经逐渐被弃用,而换用其他更加特异敏感的方法,比如活化的caspase等等。这个方法人为的假阳性太多,不宜作为结论性的方法,任何导致细胞膜破损的处理方法都可能诱发annexin的附着和...

流式细胞仪检测细胞凋亡需要多少体积的细胞
1.收集细胞{数目约(1~5)×10 6个\/mL},500 1000 r\/min离心5min ,弃去培养液.2.3ml PBS洗涤1次.3.离心去PBS,加入冰预冷的70 的乙醇固定,4℃,1—2小时.4.离心弃去固定液,3mlPBS重悬5 min.5.400目的筛网过滤1次,500—10 00r\/min离心5min,弃去PBS.6.用1ml PI染液染色,4℃避光30...

实验干货|如何用线粒体膜电位(JC-1)法做好细胞凋亡检测
最后, JC-1染色的结果分析需要精确的激发和发射光设置,而流式细胞仪的FL-1和FL-2通道则能清晰区分正常和凋亡细胞。记住,时间就是生命,JC-1染色后必须尽快进行检测,因为细胞的活性是实验精度的保障。通过深入了解JC-1法,我们不仅能在实验台上揭示细胞凋亡的微小变化,更能借此深入理解生命的秩序与...

检测细胞凋亡的方法有哪些?
四、流式细胞仪分析 (一)检测原理 细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。(二)应用价值 流式细胞仪检测具有以下特点:1)、检测的...

如何用流式检测小鼠外周血中T细胞的凋亡
2 中性粒细胞培养过程中CD16的标记率随时间的延长逐渐降低,而凋亡率逐渐增加,中性粒细胞的功能则呈明显的下降趋势,结果见表1。表1 体外培养不同时间的正常外周血中性粒细胞的几项指标比较 培养时间 (小时) CD16标率 (%) 流式仪检测 凋亡率(%) 发光频率 (次\/分)0 99.5 1.2 124.32 12...

做流式细胞周期和凋亡检测多少钱?
试剂盒不贵,流式细胞周期用PI单染,假如自己实验室有流式细胞仪的话,试剂不贵,不过如果别的实验室的话,大概要100-200块一个样品,凋亡检测价格也差不多就这个价钱

怎样鉴定细胞凋亡
将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin-V与PI匹配使用,就可以...

请教ANNEXIN V-PI法检测凋亡的原理和相关试剂盒使用步骤
将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用...

Annexin V - PI 流式检测细胞凋亡时,需要双阴性和单阳性对照码?_百度...
第一次试验建议做阴性和单阳对照,以调整荧光补偿,如果细胞和荧光染料不变,以后可以不做

bd的流式细胞仪器测凋亡怎么操作
流式检测细胞凋亡

国贵13571522397问: 应用流式细胞仪检测细胞凋亡的方法有哪些?
普定县小儿回答: 3Y啶橙染色法(AcridineOrange,AO)AO可将细胞或细胞核中的双链DNA和变性DNA染成不同颜色的荧光

国贵13571522397问: 流式细胞仪在细胞凋亡检测中的应用是什么?
普定县小儿回答: FCM用荧光标记的各种调控蛋白单抗染色,收集不同波长的荧光信号,检测细胞膜表面或细胞内荧光分子数量,可以了解每个细胞的变化,而且所需样品少,方法简便、快捷、准确

国贵13571522397问: 流式细胞测凋亡率.数据中哪个代表凋亡率?本人菜鸟一枚,完全不懂,这个图是啥意思啊?P1 P2 P3 分别代表什么? -
普定县小儿回答:[答案] 你做的是annexin V 和PI双染吧. FITC代表的是annexin V 染色, 代表早期凋亡,PI 单染,代表死亡的细胞,双染阳性的是正在凋亡的细胞. 所以,Q2+ Q4就是所有凋亡的细胞

国贵13571522397问: 请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么? -
普定县小儿回答: 一、原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧.Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高...

国贵13571522397问: 流式细胞仪检测细胞凋亡的几种方法的比较 -
普定县小儿回答: 目的:探索运用流式细胞仪来检测细胞凋亡的方法.方法:采用流式细胞仪对DNA含量、磷脂酰丝氨酸、线粒体膜电位、钙离子浓度的检测,分析细胞凋亡情况.结果:DNA含量测定存在一定误差;磷脂酰丝氨酸测定能准确反映细胞早晚期凋亡情况;线粒体膜电位、钙离子浓度测定能准确反映凋亡细胞的生理指标,如果结合形态学分析将更为客观.结论:通过比较实验方法,为将来采用流式细胞仪检测细胞凋亡提供更准确的实验方法.

国贵13571522397问: 流式细胞仪能不能测胚胎细胞凋亡率?最少需要多少个小鼠发育到囊胚阶段的细胞? -
普定县小儿回答:[答案] 用流式测细胞凋亡最少需要准备500000 细胞,实测100000个细胞,中间处理过程会有损失.建议你用hochest染色法在荧光显微镜下观察凋亡情况.

国贵13571522397问: 求流式细胞术做凋亡的操作步骤和注意事项 -
普定县小儿回答: 博凌科为解答:仅供参考一下:流式样品的准备:DNA含量的测定:用本法可以测定细胞周期、细胞倍体和凋亡,在样品的制备中存在的问题主要是细胞的聚集和碎片,建议在固定细胞...

国贵13571522397问: 【求助】流式细胞仪检测细胞凋亡结果该怎样分析 -
普定县小儿回答: 已经做完流式,看到结果却不知该怎样分析了.我用的是AnnexinV-FITC 凋亡试剂盒 ,AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡.请教各位,凋亡散点图中第1,2,4象限到底分别代表什么细胞?手里的资料说法都不相同.试剂盒说明书:1代表细胞收集过...

国贵13571522397问: 流式细胞测凋亡率.数据中哪个代表凋亡率 -
普定县小儿回答: FITC代表的是annexin V 染色, 代表早期凋亡,PI 单染,代表死亡的细胞,双染阳性的是正在凋亡的细胞. 所以,Q2+ Q4就是所有凋亡的细胞

国贵13571522397问: 流式细胞仪检测细胞凋亡,单染可以检测出细胞凋亡率吗? -
普定县小儿回答: 用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内.准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例.建议用AnexinV和PI双染,PI阴性和AnexinV阳性区是真正凋亡的细胞.细胞早期凋亡时,内膜外翻,位于胞浆的磷脂酰丝氨酸转位至细胞表面,FITC标记的Anexin V能与其结合,而坏死细胞不具有该特点.


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