βtubulin内参
内参配制方法
可以先检测内参,观测样品间内参显色条带是否一致,根据差异大小调整各样品的上样量重新进行Western Blotting实验,至内参量一致为止;若内参一致,即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。常用的蛋白质内参有GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。
abcam是哪个国家的
Abcam的概念萌芽于英国剑桥的一个实验室里,创始人Tony更将antibody(ab) 和Cambridge(Cam) 两个英文字合拼, 将公司取名为Abcam,所以是英国的。线粒体内参抗体,常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。对于一些植物的样本,则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中...
western blot的内参总是做不好。。。老是条带不一致
2,可以第一次做的时候多准备些煮好的样品,上样用一部分,其它冻-20,出来结果后根据结果再调整下一次上样的多少,这样不用重新冻融原来的样品,因为没煮过的样品冻融再测浓度会因为一些蛋白降解和沉淀的问题导致和上次成分不一样,3,实在不行你就换个内参吧,actin,tubulin,GAPDH,不同的细胞系...
β-Actin的β-Actin用途
内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。常用的蛋白质内参有细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin和GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)等。因此β-...
ELISA 实验中需要设置内参对照吗
WB中会设置内参,Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照。 在用作Western的参照时,Actin抗体和Tubulin抗体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时...
GAPDH和GAPDHS的区别是什么?
在像Western blotting这样精细的实验中,内参检测不仅是确保实验准确性的必要步骤,它还包括蛋白抽提、定量、电泳、转膜和抗体孵育等环节,以抵消潜在的误差影响。其他常用的内参蛋白伙伴 尽管GAPDH是常见的选择,但科学家们也会利用其他内参蛋白如细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。它们同样因为其稳定的...
如何选择并调整内参基因
只是反转录的试剂消耗要加倍的,同一个样品你必须单独反转录内参基因和目的基因。如果你要检测其他目的基因,相应消耗。至于内参基因,一般动物细胞的那几个内参基因,Acin,Tubulin,RPL32之类的,最好你能预先检测一下,挑一个最稳定的出来。不要随便用,没有全部通用的内参基因的。………详细资料请参考...
求助水稻的actin 内参基因引物
Forward GAAGATCACTGCCTTGCTCC Reverse CGATAACAGCTCCTCTTGGC 其他较好的水稻内参基因为:18S rRNA Forward ATGATAACTCGACGGATCGC Reverse CTTGGATGTGGTAGCCGTTT Glyceraldehyde-3-hosphate dehydrogenase Forward GGGCTGCTAGCTTCAACATC Reverse TTGATTGCAGCCTTGATCTG Tubulin Forward TACCGTGCCCTTACTGTTCC Reve...
osactin内参的作用
此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、整个 Western Blot 显色或者发光体系是否正常。常用的蛋白质内参有 GAPDH 和细胞骨架蛋白 beta-actin 或 beta-tubulin。 一般要选择一个在处理因素作用的条件下蛋白含量不会发生改变的蛋白作内参。——厚百 Western Blot试剂以下是常见的内参:内参...
在WB中心肌细胞蛋白应该用什么做内参
常用的蛋白质内参有GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。因此你要知道你检测的蛋白的分子量来选择合适的内参!actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织...
新乐市还原回答: 因 为WB实验部分用β-Tubulin做内参,老师说为保持一致性,RT-PCR最好也用β-Tubulin做内参
尔溥19179709781问: western blot 的内参不一致,急求助 - ?
新乐市还原回答: 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
尔溥19179709781问: 以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 - ?
新乐市还原回答: 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
尔溥19179709781问: 一抗内参tubulin是a还是b - ?
新乐市还原回答: 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子,有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin),这两种微管蛋白具有相似的三维结构,能够紧密地结合成二聚体,作为微管组装的亚基.α亚基由450个氨基酸组成,...
尔溥19179709781问: Abbkine抗体质量如何? - ?
新乐市还原回答: 内参抗体(Internal Control Antibody)是对内参蛋白进行检测,以校正蛋白定量过程中的实验误差以及验证转膜、显色等步骤是否正常!常用的内参包含 GAPDH、β-actin和 β-tubulin;及线粒体内参 COX IV和核内参 Histone H3和 PCNA等 内参...
尔溥19179709781问: 求助选择什么作为内参 - ?
新乐市还原回答: 搞不太清楚你想说什么.内参抗体一般选择 β-actin,GAPDH.hsp90也OK.一般内参抗体都是鼠源的埃既然一抗是鼠源,二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解埃
尔溥19179709781问: 什么时候选择线粒体内参抗体? ?
新乐市还原回答: 我们知道,在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参蛋白,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组...
尔溥19179709781问: tubulin是什么蛋白 - ?
新乐市还原回答: 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子, 有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和改侍伏β微管蛋白(β-tubulin), 这两种微管蛋白具有相似的三维结构, 能够紧密地结合成二聚体, 作为微管组装的亚基.α亚基由450个...
尔溥19179709781问: western 抗体是根据物种选的么 - ?
新乐市还原回答: 内参抗体种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lamin B等,那么针对自己的实验,我们该如何选择呢?下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则:一.样本种属来源:首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种.1、哺乳动物的组织或...
尔溥19179709781问: 哪家抗体公司内参抗体稀释度比较好呢? - ?
新乐市还原回答: 之前有用过ABclonal的一款内参抗体最大稀释度是1:2560000,逆天了.