β-actin分子量
β-Actinβ-Actin用途
它由375个氨基酸构成,分子量大约在42-43千道尔顿(kDa)。β-Actin的蛋白水平在正常情况下保持稳定,这使得它成为检查Western实验中样本上样量一致性的重要参照物。此外,它也被用于通过免疫染色观察细胞内的微丝结构。
western 内参用的GAPDH 和B-actin蛋白的分子量是多少
western 内参用的GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,B-actin分子量为42KD。严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系,这对实验结果分析是非常有用。要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础。特别表达量不高...
b-actin 的分子量是多少
β-actin由375个氨基酸组成,分子量大小为42-43kDa左右.β-Actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分。具有收缩功能,分布广泛。
β-Actin的β-Actin用途
Beta-actin由375个氨基酸组成,分子量大小为42-43kDa左右。β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照,也常被用于免疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时,Actin抗体和Tubulin抗体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照...
蛋白内参b-acten和gpdh有区别吗?
常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD。一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上 另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参 ...
肌动蛋白纤维的亚基是什么
所谓肌动蛋白纤维,应当是纤维状肌动蛋白(fibros actin, F-actin),空间结构呈双股螺旋状,是多聚体。所谓亚基应当是指单体吧,纤维状肌动蛋白的单体是球状肌动蛋白(globular actin, G-actin),一个肌动蛋白分子由375个氨基酸组成,该单体空间结构呈哑铃型。
内参GAPDH,B-ACTIN有什么区别吗
B-ACTIN:β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数。4、结构不同:GAPDH结构:B-ACTIN结构:5、应用不同:GAPDH:蛋白印迹法和内参。B-ACTIN:生物化学与分子生物学;氨基酸、多肽与蛋白质;细胞生物学。参考资料:百度百科:GAPDH 百度百科:β-Actin ...
osactin内参的作用
——厚百 Western Blot试剂以下是常见的内参:内参名称 分子量大小 适用范围Beta-actin 43 kDa 胞浆和全细胞GAPDH 30-40 kDa 胞浆和全细胞Tubulin 55 kDa 胞浆和全细胞VCDA1\/Porin 31 kDa 线粒体COXIV 16 kDa 线粒体Lamin B1 66 kDa 细胞核TBP 38 kDa 细胞核 ...
GAPDH,Tubulin,Actin选哪个做WB内参更好?
1. 表达特异性:不同组织中,管家基因的表达差异很大,如肌肉和脂肪组织中Actin的差异明显(图二)。2. 分子量差异:确保目的蛋白与内参分子量至少相差5kD,便于分析。3. 实验处理影响:GAPDH等可能受诱导处理影响,需谨慎选择。4. 定位和细胞成分:做蛋白定位时,选择对应细胞组分的内参,如膜蛋白和核...
α-平滑肌肌动蛋白是多少KD ;做WB时选的内参可以用β-action 吗
α-平滑肌肌动蛋白是23kD。1、如果是提取的总蛋白,然后做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公认的东西。2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了...
海兴县博清回答: β-actin由375个氨基酸组成,分子量大小为42-43kDa左右. β-Actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分.具有收缩功能,分布广泛.
竹王13464862496问: 线虫的actin有多少个氨基酸 - ?
海兴县博清回答: 线虫的actin有多少个氨基酸 β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数.内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白.它们在各组织和细胞中的表达相对恒...
竹王13464862496问: 36kd的蛋白算是大蛋白还是小蛋白 - ?
海兴县博清回答: 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
竹王13464862496问: western blot结果中的actin怎么了 - ?
海兴县博清回答: 需要加beta-actin的一抗,beta-actin分子量42,如果您的蛋白也是差不多大小,那么需要上两次样品,分别做您的目的蛋白和beta-actin,当然您如果做熟练了也可以上一次样,先做目的抗体,压片后strip膜再做beta-actin.如果您的目的蛋白在其他位置,那更方便,上一次样,封闭后把膜裁开,分别加您的目的蛋白一抗和beta-actin的一抗.
竹王13464862496问: 做western blot时怎么做beta actin - ?
海兴县博清回答: 是的,β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白,表达量在细胞内相对稳定,很少受到其他因素的影响,因此常被选作实验内参
竹王13464862496问: 以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 - ?
海兴县博清回答: 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
竹王13464862496问: 做wb的bax和bcl - 2的目的蛋白时会出现时间长的细胞凋亡而导致内参出不来吗 - ?
海兴县博清回答: α-平滑肌肌动蛋白是23kD.1、如果是提取的总蛋白,然后做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公认的东西.2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的.WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了.然而,如果我们试验目的是用药物处理细胞,比较处理前后某种膜蛋白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来.如果没有胞质蛋白混进去的话,β-actin就是检测不到的.
竹王13464862496问: elisa需要actin对照吗 - ?
海兴县博清回答: WB中会设置内参,Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白.β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照.
竹王13464862496问: western blot内参抗体actin为什么出了好几条带 - ?
海兴县博清回答: 首先要确定你的样品没有降解,基本上看带型可以确定,条带要干净,没有拖尾,其次是你的一抗,这个需要跟别个同学做的对比,这两个问题排除后主要就是你的抗体稀释度了,浓度过高,显影底物过强都会出现杂带,而杂带跟你每次操作包括洗脱的时间 孵育的时间的不同,都可能出现在不同的位置
竹王13464862496问: Western Blot都可以用beta - actin做内参吗? - ?
海兴县博清回答: 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不...