怎么检测酱油生产中的大肠杆菌？

食品中的大肠杆菌的检测方法~

一、细菌的分离鉴定
1、标本：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。
2、分离培养与鉴定：粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液需先经肉汤增菌，再转种血琼脂平板。其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。
37℃孵育18～24小时后，观察菌落并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。必要时检定肠霉毒素。
泌尿系统除确定大肠杆菌外，还应计数，每毫升尿含菌量≥100，000时，才有诊断价值。
二、卫生细菌学检查
大肠杆菌不断随粪便排出体外，污染周围环境和水源、食品等。取样检查时，样品中大肠杆菌越多，表示样品被粪便污染越严重，也表明样品中存在肠道致病菌的可能性越大。故应对饮水、食品、饮料进行卫生细菌学检查。
1、细菌总数：检测每毫升或每克样品中所含细菌数，采用倾注培养计算。中国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。
2、大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。
三、全自动微生物定量分析仪（TEMPO）检测
全自动微生物定量分析（TEMPO）仪的大肠杆菌群计数检测有TC和CC两种方法。TEMPOTC的开发是为了获得NFISO4832标准相当性能水平。
TEMPOCC法是TEMPO仪器上根据BAM方法专门用于24h计数食品中大肠杆菌群的方法。该法是为了获得和AOAC官方方法966.24及美国公共健康联合会检测乳制品检测方发（SMEDP）一致的效果。TEMPO系统根据阳性空的大小和数目来推算出原始样本中大肠杆菌群数目。
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扩展资料：
多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法，这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h，而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶，从而释放出荧光产物，进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。
此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。
一般涉及以下试验：首先是发酵，在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵；然后是分离培养试验，利用伊红美蓝培养皿分离；接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵，最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。
多管发酵法对试验条件要求不高，成本低，但是检测时间较长，容易受其他条件干扰，进而影响到测定结果的精确度。
参考资料来源：/baike.baidu.com/item/%E5%A4%A7%E8%82%A0%E6%9D%86%E8%8F%8C/556836?fr=aladdin#3"target="_blank"title="百度百科-大肠杆菌">百度百科-大肠杆菌

化验种类
大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌

中华人民共和国国家标准 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 GB 4789.22-94 调味品检验 代替GB 4789.22-84 Microbiological examination of food hygiene Examination of flavourings ———————————————————————————————————————- 1 主题内容与适用范围本标准规定了调味品的检验方法。本标准适用于调味品（包括酱油、酱类和醋等以豆类为原料发酵而制成的食品）的检验。 2 引用标准 GB 4789.1～4789.31 食品卫生检验方法 微生物学部分 3 设备和材料 3.1 温箱36±1℃。 3.2 天平。 3.3 灭菌平皿。 3.4 灭菌吸管。 3.5 灭菌磨口瓶。 3.6 灭菌乳钵。 3.7 试管架。 3.8 灭菌勺。 3.9 开瓶器。 3.10 镊子。 3.11 接种环。 3.12 酒精灯。 3.13 载玻片。 3.14 消毒液纱布。 3.15 均质器。 4 培养基和试剂 4.1 乳糖胆盐发酵管：GB 4789.28中3.9。 4.2 营养琼脂：GB 4789.28中3.7。 4.3 乳糖发酵管：GB 4789.28中3.10。 4.4 伊红美蓝琼脂：GB 4789.28中3.25。 4.5 灭菌生理盐水。 4.6 灭菌蒸馏水。 4.7 革兰氏色染色液：GB 4789.28中1.2。 4.8 20％灭菌碳酸钠溶液。 5 操作步骤 5.1 样品的采取和送检 5.1.1 酱油和食醋：装瓶者采取原包装；散装样品可用灭菌吸管采取。 5.1.2 酱类：用灭菌勺子采取，放入灭菌磨口瓶内送检。 5.2 样品采取数量原包装酱油、食醋和酱类采取一瓶，散装者采取500mL(g)。 5.3 检样的处理 5.3.1 瓶装者：用点燃的酒精棉球烧灼瓶口灭菌，用石碳酸纱布盖好，再用灭菌开瓶器启开后进行检验。 5.3.2 酱类：用无菌手续称取25g，放入灭菌容器内，加入225mL蒸馏水，吸取酱油25mL，加入灭菌225mL蒸馏水，制成混悬液。 5.3.3 食醋：用20％～30％灭菌碳酸钠溶液调pH到中性。 5.4 检验方法见GB 4789.2～4789.16各有关致病菌检验。 ———————— 附加说明：本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由北京市卫生防疫站负责起草。本标准主要起草人刘以贤。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。 ——————————————————————————————————————— 中华人民共和国卫生部1994-03-18批准 1994-09-01实施

大肠菌群测定的操作细则
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。 食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
1 设备和材料
1.1 温箱：36±1℃。
1.2 冰箱:0～4℃。
1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。
1.4 天平。
1.5 显微镜。
1.6 均质器或乳钵。
1.7 平皿:直径为90mm。
1.8 试管。
1.9 吸管。
1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。
1.11 玻璃珠:直径约5mm。
1.12 载玻片。
1.13 酒精灯。
1.14 试管架。
2 培养基和试剂
2.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。
2.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。
2.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。
2.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。
2.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。
2.6 生理盐水。
2.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。
3 操作步骤
3.1 检样稀释
3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。
3.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
3.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。
3.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管。
3.2 乳糖发酵试验 将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃ 温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。
3.3 分离培养 将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。
3.4 证实试验 在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
3.5 报告 根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。
4 粪大肠菌群(faecal coliform)
4.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见3.2条)转种于EC肉汤管内,置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置 培养18-24h,凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性。
4.2 结果报告 根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值。

我觉得您说的应该是大肠菌群吧，和大肠杆菌有关系但不等同。
按照国家标准GB4789上的规定检测就可以了，具体国家标准上有说明的。

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石龙区18658605478： 大肠杆菌检测方法 - ？
务独引阳： 运用伊红-美蓝鉴别培养基.在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别是否存在大肠杆菌:如果有大肠杆菌,其代谢产物(有机酸)就会与伊红和美蓝结合,使菌落出现深紫色,并带有金属光泽.

石龙区18658605478： 有谁会标准化检测食品中的大肠杆菌数量啊,用什么方法啊 - ？
务独引阳： 是标准化得食品检测一般是到专业的第三方检测机构可检测,会有前处理,以及专业的分析设备,微生物分析设备的话100多万一台,你去送检的话也就几百块钱搞定.但如果是厂里自行检测的话,可直接用大肠杆菌检测仪.

石龙区18658605478： 如何检验生活用品上的大肠杆菌? - ？
务独引阳： 操作步骤 3.1 检样稀释 3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液.固体检样最好用均质器,以8 000-...