枯草芽孢杆菌用什么液体培养基才能获得菌体?

作者&投稿:冉佳 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
枯草芽孢杆菌培养基的配制方法?~

枯草芽孢杆菌常用培养基配方:

1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂

枯草芽孢杆菌原生质体的制备

1 培养枯草芽孢杆菌
取亲本菌株T4412、TT2 新鲜斜面分别接一环到装有液体完全培养基(CM)的试管中,36℃振荡培养14 h,各取1 mL 菌液转接入装有20 mL 液体完全培养基的250 mL 锥形瓶中,36℃振荡培养 3 h,使细胞生长进入对数前期,各加入25 u/mL 青霉素,使其终浓度为0.3 u/mL,继续振荡培养2 h。

2. 收集细胞
各取菌液10 mL,4000 r/min 离心10 min,弃上清液,将菌体悬浮于磷酸缓冲液中,离心。如此洗涤两次,将菌体悬浮10 mL SMM 中,每mL 约含108~109 活菌为宜。

3. 总菌数测定
各取菌液0.5 mL,用生理盐水稀释,取10-5、10-6、10-7 各1mL(每稀释度作两个平板)、倾注完全培养基,36℃培养24 h 后计数。此为未经酶处理的总菌数。

4. 脱壁
二株亲本菌株各取5 mL 菌悬液,加入5 mL 溶菌酶溶液,溶菌酶浓度为100 ug/mL,混匀后于36℃水浴保温处理30 min,定时取样,镜检观察原生质体形成情况,当95%以上细胞变成球状原生质体时,用4000 r/min 离心10 min,弃上清液,用高渗缓冲液洗涤除酶,然后将原生质体悬浮于5 mL 高渗缓冲液中。立即进行剩余菌数的测定。

5. 剩余菌数测定
取0.5 mL 上述原生质体悬液,用无菌水稀释,使原生质体裂解死亡,取10-2、10-3、10-4 稀释液各0.1 mL,涂布于完全培养基平板上,36℃培养24~48 h,生长出的菌落应是未被酶裂解的剩余细胞。
计算酶处理后剩余细胞数,并分别计算二亲株的原生质体形成率。原生质体形成率=未经酶处理的总菌数一酶处理后剩余细胞数。

NY/T 2131-2012 饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 标准状态:现行有效 2013/05/21
GB/T 26428-2010 饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测 标准状态:现行有效 2012/02/08
SN/T 2728-2010 枯草芽孢杆菌检测鉴定方法 标准状态:现行有效 2011/11/19

枯草芽孢杆菌在进行液体培养的时候本来就应该得到浑浊的菌液啊,菌液离心一下取沉淀就可以得到菌体了。像一些丝状微生物在振荡培养的时候,因为菌丝缠绕在一起所以能看到明显的菌丝球,枯草芽孢杆菌是看不到的,只要不染菌,菌液浑浊是很正常的

枯草芽孢杆菌在进行液体培养的时候本来就应该得到浑浊的菌液啊,菌液离心一下取沉淀就可以得到菌体了.像一些丝状微生物在振荡培养的时候,因为菌丝缠绕在一起所以能看到明显的菌丝球,枯草芽孢杆菌是看不到的,只要不染菌,菌液浑浊是很正常的

正常


枯草芽孢杆菌的使用方法和用量
1、育苗:每平方米苗床使用2-5g的枯草芽孢杆菌制剂拌土,撒入苗床之中。2、灌溉:将菌种加入营养液之中进行滴灌,大田作物的亩用量为200g,经济作物的亩用量为200-400g,果树的株用量为2-5g。3、喷雾:病发初期时,将芽孢杆菌制剂兑水稀释200-500倍,喷洒植株的叶面和根茎部。一、枯草芽孢杆菌的使...

枯草芽孢杆菌用什么液体培养基才能获得菌体?
枯草芽孢杆菌在进行液体培养的时候本来就应该得到浑浊的菌液啊,菌液离心一下取沉淀就可以得到菌体了。像一些丝状微生物在振荡培养的时候,因为菌丝缠绕在一起所以能看到明显的菌丝球,枯草芽孢杆菌是看不到的,只要不染菌,菌液浑浊是很正常的

求助枯草芽孢杆菌感受态制备方法
1. 枯草芽孢杆菌感受态制备用贮存液 (1)10×Spizizen salts母液: 15% K2HPO4·3H2O,6% KH2PO4,2% (NH4 )2 SO4,0.2% MgSO4,1% 柠檬酸钠,溶于蒸馏水中,6.6 ×104 Pa高压灭菌,室温贮存。(2)10% 酵母粉、1% 水解酪蛋白和25 mmo l \/L MgCl2, 6.6 ×104 Pa高压灭菌, ...

枯草芽孢杆菌果树园用法
(1)防治果树园中的白粉病以及灰霉病时一般可在病害开始发生时喷药,一般每亩用枯草芽孢杆菌1000亿活芽孢\/克可湿性粉剂50-60g兑水30-60L喷雾防治。(2)也可使用枯草芽孢杆菌1000亿活芽孢\/克可湿性粉剂600-800倍液喷雾,一般每7-10天喷1次,需要连喷2-3次,需要喷均匀。2、使用注意事项 (1)使用...

寻采用不同比例的淀粉的发酵液培养枯草芽孢杆菌进行发酵最佳工艺_百度...
1. 实验菌种为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtillis) D53、D56,是从活性污泥中分离得到的。2. 培养基配制包括斜面培养基(营养琼脂)、液体营养肉汤培养基和淀粉酶试验培养基。斜面培养基的配比为蛋白胨1%,NaCl 0.5%,牛肉膏0.3%,琼脂2%。液体营养肉汤培养基的配比为蛋白胨1%,NaCl 0.5%,牛肉膏0.5%...

枯草芽孢杆菌活菌液、热处理液和滤液具体指什么,如何制备?
枯草芽胞杆菌活菌液包含营养体细胞、芽胞、噬菌体及代谢物,热处理液营养体细胞被杀死只有芽胞存活,滤液只有噬菌体能够通过,制备很容易,活菌液接种到液体培养基培养一段时间就可以了,热处理液热处理一下就可以了,滤液用无菌滤器过滤一下就可以了。

枯草芽孢杆菌发酵培养基
1. 准备1升蒸馏水,加入20克葡萄糖,15克蛋白胨,5克氯化钠,0.5克牛肉膏,以及20克琼脂。将这些成分混合均匀,加热溶解琼脂,然后补足1升蒸馏水至最终体积。2. 原生质体制备步骤如下:a. 培养枯草芽孢杆菌:从新鲜斜面培养的亲本菌株T4412和TT2中各取一环,接种到含有液体完全培养基(CM)的试管中...

怎样制备枯草芽孢杆菌的芽孢悬浊液啊?希望有详细步骤。
首先培养枯草,用摇屛37度,220R\/min,培养15h,就是菌悬液,

枯草哑炮杆菌的生存条件是什么?
枯草芽孢杆菌耐氧化;耐挤压;耐高温,能长期耐60°C高温,在120°C温度下能存活20分钟;耐酸碱,但是不耐低温,15℃以上的温度生长快,活性高、效果好。

枯草芽孢杆菌如何保存
枯草芽孢杆菌可以用低温保存。保存方法:1、简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1到2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3到4个月;2、液氮超低温保存...

措美县15236922955: 枯草芽孢杆菌用什么液体培养基才能获得菌体 -
梁阁普必: 枯草芽孢杆菌在进行液体培养的时候本来就应该得到浑浊的菌液啊,菌液离心一下取沉淀就可以得到菌体了.像一些丝状微生物在振荡培养的时候,因为菌丝缠绕在一起所以能看到明显的菌丝球,枯草芽孢杆菌是看不到的,只要不染菌,菌液浑浊是很正常的

措美县15236922955: 枯草芽孢杆菌复苏用什么组分的培养基比如在什么温度下,培养时间啊等等.急用,谢谢各位. -
梁阁普必:[答案] 枯草芽孢杆菌常用培养基配方: 1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂 枯草芽孢杆菌原生质体的制备 1 培养枯草芽孢杆菌 取亲本菌株T4412、TT2 新鲜斜面分别接一环到装有液体完全培养基(CM)的试管中,36℃振荡...

措美县15236922955: 枯草芽孢杆菌的菌落形态(培养基为牛肉膏蛋白胨培养基)? -
梁阁普必:[答案] 枯草芽孢杆菌种类不同,形态也会有一些差别.一般是白色,圆形边缘整齐,也有不整齐的,你上百度图片搜索就有图片

措美县15236922955: 怎样获得枯草芽孢杆菌的芽孢悬液 -
梁阁普必: 采用专门用于产孢的液体培养基ICPM,具体培养基配方网上搜的到,在摇床里培养至95%以上为芽孢时停止培养,此时需要镜检,将摇瓶里面的发酵液离心弃上清,离心的沉淀用PBS缓冲液洗涤3次并离心以洗去培养基等杂质,最后用PBS缓冲液使之悬浮即可.如果需杀灭营养体,可在80摄氏度水浴锅里面水浴15 min或60摄氏度水浴30 min即可.

措美县15236922955: 枯草哑炮杆菌的生存条件是什么? -
梁阁普必: 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的发酵条(PH、温度、时间、接种量)对枯草芽孢杆菌生长量的影响.枯草芽孢杆菌在BPG液体培养基上培养,最佳的发酵培时间20h;接种量为5%.在此培养条件下养条件为:初始pH 7.0;温度35所以条件不是很苛刻容易养活

措美县15236922955: 枯草芽孢杆菌要用什么培养基进行培养?细菌还是真菌培养基?
梁阁普必: 枯草芽孢杆菌是细菌,用细菌培养基,其实真菌培养基pH调到7以上也能培养.

措美县15236922955: 枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌的选择性培养基?谢谢!最好还有出处
梁阁普必: 植物乳杆菌最好用MRS培养基.这是我们老师研配的培养基,效果很好的.下面是1升的量:蔗糖10g,蛋白胨20g,酵母粉10g,nacl 5g,k2hpo4 5g,kh2po4 4g,吐温-80 1ml

措美县15236922955: 枯草芽孢杆菌的培育条件是什么?
梁阁普必: 培养基:1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂,或牛肉膏蛋白胨配方(1000ml)加10g的葡萄糖.ph为7即可,温度30度到37度皆可——条件不是很苛刻,比较容易培养.我个人觉得培养基的成分有所改变不会影响其性状,毕竟是广泛分布于自然界的菌种嘛.要想大量培养,如果从经济方面考虑还可以用些便宜点的原料.北海群林生物公司是国内首家固体发酵达到200亿/克的厂家,生产的枯草芽孢杆菌在技术先进、质量稳定、价格实惠、生产专业,在国内属于领先水平. http://www.qunlinshengwu.com/a/cp/2010/0204/247.html

措美县15236922955: 枯草芽孢杆菌复苏用什么组分的培养基 -
梁阁普必: 枯草芽孢杆菌常用培养基配方: 1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂 枯草芽孢杆菌原生质体的制备 1 培养枯草芽孢杆菌 取亲本菌株T4412、TT2 新鲜斜面分别接一环到装有液体完全培养基(CM)的试管中,36℃...

措美县15236922955: 我用LB培养基活化枯草芽孢杆菌,24小时候没长,有什么原因呢?还能用什么培养基?急用~ -
梁阁普必:[答案] 枯草芽胞杆菌其实是营养要求极低的,使用普通营养琼脂都可以使其培养出来. 所以最大可能是你的菌种问题,此外培养基是否污染了一些抑菌物(比如胆盐)等等也需要考虑. 另外枯草芽胞杆菌在自然界实在是多得要命,在包装食品中也非常常见,...

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