食品检验为什么要测定细菌菌落总数?实验操作如何使数据可靠?
1 目的
1 学习并掌握细菌的分离和活菌计数的基本方法和原理
2 了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义
2 原理
菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
3 材料
3.1 食品检样
3.2 培养基
营养琼脂培养基，无菌生理盐水
3.3 其它
无菌培养皿，无菌移液管，无菌不锈钢勺。
4 流程
5 步骤
5.1 取样、稀释和培养
5.1.1 以无菌操作取检样25g（或ml），放于225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000～10000r/min的速度处理1min，制成1:10的均匀稀释液。
5.1.2 用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内，振摇试管混合均匀，制成1:100的稀释液。
5.1.3 另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支10ml吸管。
5.1.4 根据标准要求或对污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
5.1.5 稀释液移入平皿后，将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。
5.1.6 待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。
5.2 菌落计数方法
作平皿菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平皿平均菌落数。到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0－4℃，但不要超过24h。
5.3 菌落计数报告方法
5.3.1 平皿菌落数的选择
选取菌落数在30～300之间的平皿作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿平均数，其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可以计算半个平皿后乘以2以代表全皿菌落数。
5.3.2 稀释度的选择
5.3.2.1 应选取平均菌落数在30～300之间的稀释度报告（表1中例1）。
表1 稀释度选择及菌落数报告方式
例 稀释液及菌落数 两稀释 菌落总数 报告方式
次 10-1 10-2 10 3 液之比 (个/g或ml) (个/g或ml)
1
2
3
4
5
6
7 1365
2760
2890
多不可计
27
0
多不可计 164
295
271
4560
11
0
305 20
46
60
513
5
0
12 －
1.6
2.2
－
－
－
－ 16400
37750
27100
513000
270
<1×10
30500 16000或1.6×104
38000或3.8×104
27000或2.7×104
510000或5.1×105
270或27
<10
31000或3.1×104
5.3.2.2 若有二个稀释度均在30～300之间时，应以二者比值决定，比值≤2取平均数，比值>2则其较小数字（表1中例2和3）。
5.3.2.3 若所有稀释度均>300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（表1中例4）。
5.3.2.4若所有稀释度均<30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之（表1中例5）。
5.3.2.5若所有稀释度均无菌落生长，则应按<1乘以最低稀释倍数报告之（表1中例6）。
5.3.2.6若所有稀释度均不在30～300之间，有的>300，有的又<30，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（表1中例7）。
5.3.4 菌落计数报告方法
菌落数在1～100时，按实有数字报告，如大于100时，则报告前面两位有效数字，第三位数按四舍五入计算，为了缩短数字后面的零数，也可以10的指数表示。
6 结果
1 将实验测出的样品数据以报表方式报告结果。
2 对样品菌落总数作出是否符合卫生要求的结论。
7 思考
7.1 食品检验为什么要测定细菌菌落总数？
7.2 实验操作如何使数据可靠？
7.3 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数？为什么？
7.4 为什么营养琼脂培养基在使用前要保持在46±1℃的温度？
微生物导致食品腐败变质、微生物毒素(致病菌、寄生虫)及传染病流行(肝炎病毒)引起的食源性疾病是我国食品安全的头号问题。
在我国的食品卫生管理中，微生物指标分为菌落总数(细菌总数)、大肠菌群、霉菌、酵母菌与致病菌。它们造成食源性疾病，可表现为轻度不适应慢性疾病甚至有生命危险。致病菌是食品安全的杀手，在我国的食品卫生标准中规定为“不得检出”。
菌落总数的测定是食品卫生检验的一个重要指标。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
菌落主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌对食品被污染程序的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 菌落总数严重超标，说明其产品的卫生状况达不到基本的卫生要求，将会破坏食品的营养成分，加速食品的腐败变质，使食品失去食用价值。消费者食用微生物超标严重的食品，很容易患痢疾等肠道疾病，可能引起呕吐、腹泻等症状，危害人体健康安全。
1、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。
2、预测食品存用的期限长短。
3、了解细菌在食品中的繁殖动态。
4、是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
检验注意事项
1、向平皿倾注液体时，平皿仅微微开启即可；
2、吸管进出瓶子或试管时，吸管口不得触及瓶口、管口的外围部分；
3、吸管插入试样液内的深度不得小于2.5cm,调整时要使管尖与容器内壁紧贴;
4、进行稀释时,吸管口不得与稀释液接触;
5、检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min.
6、培养液和检液在培养皿内要摇匀；
7、培养液倾注培养皿时温度要在45摄氏度，以免烫死菌落。
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在食品卫生检验中,为什么要以菌落总数为指标
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。菌落主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌对食品被污染程序的标志，也可以应用这一方法观...
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黄山市17276349589： 食品检验为什么要测定细菌菌落总数 - ？
衷范益心： 菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价.菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣.
黄山市17276349589： 食品微生物检测实验的目的是什么? - ？
衷范益心： 食品中含有大量的微生物,其中对人体有害的微生物很少,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌等.食品微生物检测也就是检查上述这些微生物是否存在.不同食品对上述微生物存在的种类和数量均不同,所以就要检测,判断符合国家标准不.
黄山市17276349589： 为什么以菌落总数为指标 - ？
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黄山市17276349589： 食品检样中细菌总数及大肠菌群数各有何意义? - ？
衷范益心： 菌落总数是指食品经过处理并在一定条件下培养后,所得1ml(g)检样中所含细菌菌落的总数,菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态,以便为被检样品进行卫生学评价时提供依据. 从食品卫生观点来看,食品中菌落总数越多,说明食品质量越差,病原菌污染的可能性越大,当菌落总数仅少量存在时,病原菌污染的可能性就会降低,或者几乎不存在,但是有少数情况并不完全如此,所以说也不是绝对的!这时就必须配合大肠菌群和病原菌项目的检验,才能对食品做出比较全面准确的评价
黄山市17276349589： 细菌总数的测定的原理 - ？
衷范益心：[答案] 菌落总数是指食品经过处理并在一定条件下培养后,所得1g或1mL检验中所含细菌菌落的总数.菌落总数主要作为判别食品污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态过程,以便在对杯件样品进行卫生学评价时提供依据.
黄山市17276349589： 测定水中细菌总数的意义如何?营养琼脂固体培养基上的菌落数目是否能代表水样中实际存在的细菌数目? - ？
衷范益心： “菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价.菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣.” NA上的菌落数可以代表当时情况下1mL水中所含活菌数.
黄山市17276349589： 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数?为什么? - ？
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黄山市17276349589： 菌落记数 分析 - ？
衷范益心： 一、菌落总数的测定菌落总数:食品和药品经过处理,所得 1mL(或 1g)检样在一定条件下培养,检测到的细菌菌落的总数.菌落总数可以用为判断食品及药品被污染程度的标志,同时为被检样品提供卫生学标准.细菌菌落一般都采用平板记...
