食品检验为什么要测定细菌菌落总数?实验操作如何使数据可靠?
1 目的
1 学习并掌握细菌的分离和活菌计数的基本方法和原理
2 了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义
2 原理
菌落总数是指食品经过处理,在一定条件下培养后,所得1g或1ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
3 材料
3.1 食品检样
3.2 培养基
营养琼脂培养基,无菌生理盐水
3.3 其它
无菌培养皿,无菌移液管,无菌不锈钢勺。
4 流程
5 步骤
5.1 取样、稀释和培养
5.1.1 以无菌操作取检样25g(或ml),放于225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀稀释液。
5.1.2 用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。
5.1.3 另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支10ml吸管。
5.1.4 根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制作10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。
5.1.5 稀释液移入平皿后,将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。
5.1.6 待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。
5.2 菌落计数方法
作平皿菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后,求出同稀释度的各平皿平均菌落数。到达规定培养时间,应立即计数。如果不能立即计数,应将平板放置于0-4℃,但不要超过24h。
5.3 菌落计数报告方法
5.3.1 平皿菌落数的选择
选取菌落数在30~300之间的平皿作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿平均数,其中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,则可以计算半个平皿后乘以2以代表全皿菌落数。
5.3.2 稀释度的选择
5.3.2.1 应选取平均菌落数在30~300之间的稀释度报告(表1中例1)。
表1 稀释度选择及菌落数报告方式
例 稀释液及菌落数 两稀释 菌落总数 报告方式
次 10-1 10-2 10 3 液之比 (个/g或ml) (个/g或ml)
1
2
3
4
5
6
7 1365
2760
2890
多不可计
27
0
多不可计 164
295
271
4560
11
0
305 20
46
60
513
5
0
12 -
1.6
2.2
-
-
-
- 16400
37750
27100
513000
270
<1×10
30500 16000或1.6×104
38000或3.8×104
27000或2.7×104
510000或5.1×105
270或27
<10
31000或3.1×104
5.3.2.2 若有二个稀释度均在30~300之间时,应以二者比值决定,比值≤2取平均数,比值>2则其较小数字(表1中例2和3)。
5.3.2.3 若所有稀释度均>300,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(表1中例4)。
5.3.2.4若所有稀释度均<30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之(表1中例5)。
5.3.2.5若所有稀释度均无菌落生长,则应按<1乘以最低稀释倍数报告之(表1中例6)。
5.3.2.6若所有稀释度均不在30~300之间,有的>300,有的又<30,则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(表1中例7)。
5.3.4 菌落计数报告方法
菌落数在1~100时,按实有数字报告,如大于100时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入计算,为了缩短数字后面的零数,也可以10的指数表示。
6 结果
1 将实验测出的样品数据以报表方式报告结果。
2 对样品菌落总数作出是否符合卫生要求的结论。
7 思考
7.1 食品检验为什么要测定细菌菌落总数?
7.2 实验操作如何使数据可靠?
7.3 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数?为什么?
7.4 为什么营养琼脂培养基在使用前要保持在46±1℃的温度?
微生物导致食品腐败变质、微生物毒素(致病菌、寄生虫)及传染病流行(肝炎病毒)引起的食源性疾病是我国食品安全的头号问题。
在我国的食品卫生管理中,微生物指标分为菌落总数(细菌总数)、大肠菌群、霉菌、酵母菌与致病菌。它们造成食源性疾病,可表现为轻度不适应慢性疾病甚至有生命危险。致病菌是食品安全的杀手,在我国的食品卫生标准中规定为“不得检出”。
菌落总数的测定是食品卫生检验的一个重要指标。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
菌落主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌对食品被污染程序的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 菌落总数严重超标,说明其产品的卫生状况达不到基本的卫生要求,将会破坏食品的营养成分,加速食品的腐败变质,使食品失去食用价值。消费者食用微生物超标严重的食品,很容易患痢疾等肠道疾病,可能引起呕吐、腹泻等症状,危害人体健康安全。
1、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。
2、预测食品存用的期限长短。
3、了解细菌在食品中的繁殖动态。
4、是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
检验注意事项
1、向平皿倾注液体时,平皿仅微微开启即可;
2、吸管进出瓶子或试管时,吸管口不得触及瓶口、管口的外围部分;
3、吸管插入试样液内的深度不得小于2.5cm,调整时要使管尖与容器内壁紧贴;
4、进行稀释时,吸管口不得与稀释液接触;
5、检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min.
6、培养液和检液在培养皿内要摇匀;
7、培养液倾注培养皿时温度要在45摄氏度,以免烫死菌落。
测量产品目的是什么?
(3)测试的本质是测量,最终要拿出数据。 (4)测试的范围十分广泛,包括定量测定、定性分析、试验等,可以是单项测试或综合测试。 黑箱测试原理是什么?测试目的是什么 黑盒测试 黑盒测试也称功能测试或数据驱动测试,它是在已知产品所应具有的功能,通过测试来检测每个功能是否 都能正常使用,在测试时,把程序看作一个不...
化妆品原料为什么要检验密度
为了确保产品质量和安全性。化妆品测量密度可以帮助生产商确保产品的质量和安全性。密度测量对于化妆品原料的配方优化是非常重要的,通过测量密度,可以更好地了解原料的性质和行为,从而更好地调整配方。如果化妆品原料密度不符合标准,会导致化妆品在使用过程中出现沉淀、分层等现象,影响使用效果和美观度。
在食品卫生检验中,为什么要以菌落总数为指标
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。菌落主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌对食品被污染程序的标志,也可以应用这一方法观...
为什么要检测食品中的水分活度
含有水分的食物等由于其水分活度之不同,其储藏期的稳定性也不同。利用水分活度的测试,控制微生物的生长,计算食品和药品的保质期,已逐渐成为食品,医药,生物制品,粮食,饲料,肉制品等行业中检验的重要指标。测试方法:水分活度的测定方法有传统的扩散法和ERH水分活度测试法等。传统的扩散法至少需要24...
产品为什么要检验
为保证质量,不然次品就很多了
所有商品入库前都需要进行抽样检查为什么
保证质量合格。根据规定,在入仓库前取样,包括对原材料的取样和对生产成品的取样,公司内部对所有的入库材料都要进行检验,质量合格后才能用于生产,防止质量不合格。
什么时候要检验,为什么要检验
2.产品质量是国家经济建设的基础,是国家实力的体现.3.产品质量是企业科学技术,管理和文化水平的综合反映.4.产品质量是企业生存,发展的关键.5.产品质量是进入国内外市场的通行证.6.产品质量是顾客和消费者的重要保障.二 检验的工作内容:熟悉和掌握规定要求,测量,比较,判定,处置.三 质量检验的分类:1....
1.为什么化妆品在灌装前要进行化妆品的稳定性检验?
化妆品在灌装前要进行化妆品的稳定性检验其目的主要是确保在适当条件下处理、运输和储存期间不会发生其预期的物理、化学和微生物性质以及其他安全。化妆品稳定性研究通常包括不同加速储存条件,样品在1-3个月时间内保持在高温情况下,对产品进行加速测试。设计用于化妆品稳定性研究的方案包括测试在储存期间...
制剂的含量为什么要进行均匀度检查?
从药品使用角度讲,最根本的意义就是使产品质量具有均一性,防止药物使用过程中出现的非处方原因的药物过量或剂量不足的事件发生。原料药的含量均匀度一般来说需要在工艺验证过程中进行验证,但在成品检验中一般无需测定含量均匀度。在原料药的工艺验证中,可以在成品出料位置设置不同取样点进行含量测定,...
品质检验标准检验流程
品质检验标准检验流程就是根据产品技术标准明确检验项目和各个项目质量要求,规定适当的方法和手段,借助一般量具或使用机械、电子仪器设备等测定产品。品质检验是根据合同和有关检验标准规定或申请人的要求,对商品的使用价值所变现出来的各种特性,运用人的感官或化学、物理等各种手段进行测试、鉴别。其目的就...
衷范益心:[答案] 1、将已灭菌的营养琼脂培养基分别倒入已灭菌过的培养皿内,每皿约15ml培养基,启开皿盖暴露于无菌室内的不同地方,10min后,盖好皿盖. 2、将培养皿倒置于37℃培养24h后,观察菌落情况,统计菌落数. 3、如果没个皿内菌落不超过4个,则可...
黄山市17276349589: 食品检验为什么要测定细菌菌落总数 - ?
衷范益心: 菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价.菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣.
黄山市17276349589: 食品微生物检测实验的目的是什么? - ?
衷范益心: 食品中含有大量的微生物,其中对人体有害的微生物很少,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌等.食品微生物检测也就是检查上述这些微生物是否存在.不同食品对上述微生物存在的种类和数量均不同,所以就要检测,判断符合国家标准不.
黄山市17276349589: 为什么以菌落总数为指标 - ?
衷范益心: 一、菌落总数介绍: 菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成.当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形...
黄山市17276349589: 食品检样中细菌总数及大肠菌群数各有何意义? - ?
衷范益心: 菌落总数是指食品经过处理并在一定条件下培养后,所得1ml(g)检样中所含细菌菌落的总数,菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态,以便为被检样品进行卫生学评价时提供依据. 从食品卫生观点来看,食品中菌落总数越多,说明食品质量越差,病原菌污染的可能性越大,当菌落总数仅少量存在时,病原菌污染的可能性就会降低,或者几乎不存在,但是有少数情况并不完全如此,所以说也不是绝对的!这时就必须配合大肠菌群和病原菌项目的检验,才能对食品做出比较全面准确的评价
黄山市17276349589: 细菌总数的测定的原理 - ?
衷范益心:[答案] 菌落总数是指食品经过处理并在一定条件下培养后,所得1g或1mL检验中所含细菌菌落的总数.菌落总数主要作为判别食品污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态过程,以便在对杯件样品进行卫生学评价时提供依据.
黄山市17276349589: 测定水中细菌总数的意义如何?营养琼脂固体培养基上的菌落数目是否能代表水样中实际存在的细菌数目? - ?
衷范益心: “菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价.菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣.” NA上的菌落数可以代表当时情况下1mL水中所含活菌数.
黄山市17276349589: 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数?为什么? - ?
衷范益心: 菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数.按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长.因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等.
黄山市17276349589: 菌落记数 分析 - ?
衷范益心: 一、菌落总数的测定菌落总数:食品和药品经过处理,所得 1mL(或 1g)检样在一定条件下培养,检测到的细菌菌落的总数.菌落总数可以用为判断食品及药品被污染程度的标志,同时为被检样品提供卫生学标准.细菌菌落一般都采用平板记...