如何检测空气中细菌总数

空气细菌培养数是如何计算出来的~

1 空气细菌培养的采样方法
检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。
基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好营养琼脂平板，采样高度距地面0.8～1.5m，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。
2 细菌数的计算方法细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）
式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）　　
这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。　　
3 空气消毒效果和污染状况的评价空气消毒效果的比较
应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。　　
Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间，采用紫外线消毒，化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。

室内空气中细菌总数检测实施细则
一、范围
适用于室内空气细菌总数测定。
二、引用标准
GB/T18883-2002 室内空气中细菌总数检验方法
三、原理
撞击法：采用撞击式空气微生物采样器采样通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经37℃、48h培养后，计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。
四、仪器和设备
1．高压蒸汽灭菌器。
2．干热灭菌器。
3．恒温培养箱。
4．冰箱。
5．平皿。（直径9㎝）
6．制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。
7．撞击式空气微生物采样器（FSC-IV便携式浮游生物采样器）。
五、培养基
1．营养琼脂培养基
1．成分：蛋白胨 20g
牛肉浸膏 3g
氯化钠 5g
琼脂 15g～20g
蒸馏水 1000ml
2．制法：将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃20min高压灭菌。营养琼脂平板的制备参照采样器使用说明。
六、选点要求
1．采样点的数量根据监测室内面积大小和现场情况而确定，以期能正确反映室内空气污染物的水平。原则上小于50㎡的房间应设（1～3）个点；50㎡～100㎡设（3～5）个点；100㎡以上至少设5个点。在对角线上或梅花式均匀分布。
2．采样点应避开通风口，离墙壁距离应大于0.5m。
3．采样点的高度：原则上与人的呼吸带高度相一致。相对高度0.5m～1.5m之间。
七、采样
将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。一般情况下采样量为30L～150L，应根据所使用仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。
八、样品培养
样品采完后，将带菌营养琼脂平板置36℃±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数。以每立方米菌落数（cfu/m3）报告结果…………

检测空气中细菌总数的方法：撞击法
　　原理：采用撞击式空气微生物采样器采样通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上,经37℃、48h培养后，计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

检测空气菌落总数：作为判定空气被细菌污染程度的标志，也可以应用这一方法观察食品中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据。

<壹> 菌落总数知识
1、食品中测定的菌落总数就是食品的细菌总数吗？
不是的，菌落总数是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、PH等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，36±1℃培养48±2h，能在平板计数琼脂平板上生长的细菌菌落总数，因此，厌氧或微需氧菌等，由于现有条件不能满足其需求，故难以繁殖生长。
2、菌落总数的单位CFU和“个”有区别吗？
菌落形成单位叫作CFU。CFU是形成菌落的个数，不等于细菌个数。比如两个相同的细菌靠得很近或粘在一起，那么经过培养这两个细菌将会形成一个菌落，此时就是2个细菌，1CFU。
3、菌落总数超标会导致食物中毒吗？
不一定，菌落总数测定是用来判断食品被细菌污染的程度及卫生质量，反应食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便被检样品做出适当的卫生学评价。
4、菌落总数超标如何追溯？
在日常抽检中发现产品菌落总数超标，可以从以下三个环节进行追溯：
（1）生产环节
如果在不合格食品同批次库存产品多次抽样检验，均出现菌落总数超标的情况，那极有可能是生产环节原辅料、人员、设备环境等受污染所影响；
（2）储存运输
对同批次其他产品进行多次抽样检验，均未检出菌落总数超标的现象，那么有可是出现在产品装卸搬运过程中；
（3）储存摆放环节
若在流通环节检出多种食品存在菌落总数超标的情况，则问题极有可能是未按照规定要求存储、摆放食品，致使微生物滋生。
<贰>实验过程中的问题
1、为什么平板计数琼脂需要调节pH？
培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。平板计数琼脂是用来检测样品中的菌落总数的，而大部分细菌都是嗜中性的，所以需要调节培养基pH至7.0±0.2，保证细菌生长环境的适宜，从而确保检测结果的准确性。
2、为什么菌落总数培养条件为36±1℃培养48±2h，而水产品要求30±1℃培养72±3h？
对于未经过任何加工的水产品，其菌落总数培养条件为30±1℃培养72±3h；
因为水中本身温度较低，未加工的水产品中微生物主要来源于水体，30℃、72h是水中微生物最适培养温度和时间。而加工水产品和其他产品培养条件都是36±1℃培养48±2h，其实就是产品本身的菌和加工过程中带入的菌的最适培养温度和时间不同的问题。
3、如何保证检测结果的有效性？
检验过程中需要做空白对照，用来判断培养基、稀释液、平皿或吸管是否存在污染。并做好定期检测空气洁净度，判断实验环境是否符合标准要求。

有2个方法，一个是采用沉降法，这个比较简单，直接把平板放在离地面80CM左右的地方半个小时就可以了，另一种是浮游菌采样，不过这个要用仪器，操作比较麻烦

自然沉降法

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寿县19244842825： 细菌总数怎么检测? - ？
戎梦迈格： 一般有两种方法,一种是比较泛泛而谈的,就是测一下菌液的OD600,大致获得细菌的生长数量,比如OD600=1.0时,标准菌株的细菌数是10^9个/mL.第二种就是比较精确的,也就是平板计数,这是最基本的,把菌液稀释以后,涂布于平板培养基上,培养18-24小时以后,菌落计数,再乘以你的稀释倍数,就能得到原菌液的细菌数

寿县19244842825： 空气细菌总数测定方法哪个简单方便《GB/T 18204.1 - 2000公共场所空气微生物检测方法 细菌总数的测定》里介绍了两种检测空气细菌总数的检测方法:1.撞... - ？
戎梦迈格：[答案] 我们实验室用的是,沉降法的,这是最简便的.可参考GB/T 18204.1-2000的规定.GB-T 16294-1996 医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法中有图示,可以很直观的知道空气落下菌的测定.

寿县19244842825： 有谁知道空气中细菌总数的检测方法? - ？
戎梦迈格： 平板菌落法.至于标准,不同的地方有不同的标准,比如我们无菌室和公共场所就不一样. 连无菌室不同级别的也不一样.

寿县19244842825： 如何测收集空气中的菌数 - ？
戎梦迈格： 测定空气中微生物的方法很多,有滤过法、沉降法等,这里主要介绍沉降法.沉降法是利用带微生物的尘粒或液滴因重力自然落在培养基表面来测定的.实验证明,在空气中暴露 10min 后,每 100cm2 培养基表面生长的菌落数相当于 20L 空气...

寿县19244842825： 怎么测定空气中的菌体数? - ？
戎梦迈格： 环境微生物检测悬浮在空气中的微生物落在适宜它们生长的固体培养基表面,在适宜温度下培养一段时间后,每个分散的菌体或孢子就会形成一个个肉眼可见的细胞群体即菌落,通过观察菌落的特征和计数,就可大致鉴别空气中微生物的种类和...

寿县19244842825： 空气细菌培养数是如何计算出来的 - ？
戎梦迈格： 1 空气细菌培养的采样方法 检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法.此法简便,目前大部分医疗单位采用.在消毒处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积>30m2设4角及中央5点...

寿县19244842825： 空气中细菌污染的监测时如何计算细菌数? - ？
戎梦迈格： 你是检测的浮游菌还是沉降菌,如果是浮游菌使用的专用设备,根据说明书操作就获得最终数据;如果是沉降菌检测,累积平皿上细菌总数/平皿数,所的平均值就是此环境的细菌数.再与沉降菌标准要求进行对比看是否超标即可.

寿县19244842825： 空气中微生物限度检查方法? - ？
戎梦迈格：[答案] 涉及空气微生物限度的最常见的有两个,一是普通的诸如旅馆、影院这样的公共场所,另一种是诸如手术室、无菌室这样的涉及医疗场所.如果是公共场所的,那么按照GB/T18204.1-2000公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定方...

寿县19244842825： 不经过培养怎样快速检测发酵生产中细菌总数 - ？
戎梦迈格： 检测空气中细菌总数的方法:撞击法原理:采用撞击式空气微生物采样器采样通过抽气动力作用,使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流,从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上,经37℃、48h培养后,计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法.

寿县19244842825： 怎么测定空气中的菌体数?？
戎梦迈格： 选取一定单位的面积,测定菌落个数!