如何利用大鼠A基因定点突变构建阿尔兹海默症模型鼠

作者&投稿:余家 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
大鼠阿尔茨海默病的模型如何复制?~

我之前实验做过AD模型,种类很多,有自然老化模型,海马A-beta注射模型,转基因模型,物理损伤模型,不知你要做的是哪种?我做的是海马注射模型,但脑内病理及行为学表现最明显的是转基因模型,但是价钱很贵,且周期较长。最主要还是要看你需要观察的是哪些指标,实验目的是什么。

阿尔兹海默症,俗称“老年痴呆”,是每一个儿女都不希望发生在父母身上的慢性“绝症”。患病后,TA会慢慢忘了家、忘记你…即便事后再给老人加倍的爱,也不如提前帮你爱的TA预防。

建立阿尔茨海默病(AD)双转基因鼠,为进一步研究AD发病机制提供较为理想的实验动物。方法将人载脂蛋白E4转基因鼠和突变APP转基因鼠杂交。结果经PCR初筛,对阳性小鼠基因组DNA作进一步的Southern杂交鉴定,获得2只双转基因小鼠,之后传代建系。结论为进一步研究多个基因对AD的致病作用提供较为理想的实验动物。
阿尔茨海默病(AD)是一种进行性神经退变性疾病,伴有认知功能障碍和进行性痴呆,其典型病理表现是在脑内沉积的3淀粉样斑块(AB)和神经元内出现的神经原纤维缠结(NET)。该病发病原因众多,致病机制迄今仍不十分清楚。很多研究AD的动物模型都表现出部分特征性病理改变,但不足的是不能模拟人类疾病渐进性的退行性改变。
目前利用转基因动物,在动物活体水平上研究致病基因的作用,已成为研究 AD致病机理的主要方向。分子遗传学研究发现APPAPP的 C末端片段、tau、PSI、ApoE等基因(1~5)都与AD病理改变有关。因而建立ApoF4/APP双转基因鼠,可为研究多个相关基因共同作用对AD的影响提供较为理想的实验动物。


如何利用大鼠A基因定点突变构建阿尔兹海默症模型鼠
建立阿尔茨海默病(AD)双转基因鼠,为进一步研究AD发病机制提供较为理想的实验动物。方法将人载脂蛋白E4转基因鼠和突变APP转基因鼠杂交。结果经PCR初筛,对阳性小鼠基因组DNA作进一步的Southern杂交鉴定,获得2只双转基因小鼠,之后传代建系。结论为进一步研究多个基因对AD的致病作用提供较为理想的实验动物。

如何利用基因工程手段构建转基因快速生长大鼠?
1. 目标基因选择:确定要引入或修改的特定基因,该基因可能与生长调控有关。2. 基因克隆:将目标基因从其他物种中克隆出来,或通过化学合成的方式获得目标基因的DNA序列。3. 基因导入:将目标基因导入大鼠胚胎干细胞中,可以使用电穿孔、病毒介导、CRISPR-Cas9等技术。4. 转基因动物的产生:将经过基因导入...

转基因技术的运用
其后,Costantini将兔-珠蛋白基因注入小鼠的受精卵,使受精卵发育成小鼠,表达出了兔卜珠蛋白;Palmiter等把大鼠的生长激素基因导人小鼠受精卵内,获得“超级”小鼠;Church获得了首例转基因牛。到目前为止,人们已经成功地获得了转基因鼠、鸡、山羊、猪、绵羊、牛、蛙以及多种转基因鱼。1.转基因动物技术...

为大量得到大鼠白细胞中蛋白,从获取的基因开始,作较为详细的实验报告...
(1)目的基因A的获取,方法有:①化学合成法:用于已知序列,或可推导出序列的基因②从基因组DNA中获取③从cDNA文库中获取④聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因 (2)选择合适的克隆载体 (3)将外源基因与载体的连接 (4)重组DNA导入受体菌 (5)对重组体的筛选 重组DNA导入受体菌后,经过培养使其...

DNA鉴定常采用的技术是?
DNA杂交技术,将待测DNA与已知来源的DNA单链杂交,通过杂交配对来看二者的亲缘关系。

CRISPR\/Cas9在研究基因功能中的应用是怎样的?
此外,还证明了利用 CRISPR-Cas 技术构建的基因敲除大鼠模型与传统方法构建的同一基因(肥胖相关 G 蛋白偶联受体 Mc4R)突变大鼠相比具有一致的表型。该方法构建的基因突变动物具有显著高于传统方法的生殖系转移能力,是一种可靠、高效、快速的构建敲除动物模型的新方法。[3]...

巴尔的摩事件的实验
1981年,科学家们发现,小鼠的生殖细胞在导入外源的大鼠照鼠要大上2倍,被称为“超级鼠”。转基因鼠的出现为基因表达研究开拓了一个新的空间。正在从事抗体基因研究的巴尔的摩立即抓住了这一时机。他敏锐地想到:如果将含恒定元件a的外源基因导入小鼠的生殖细胞,小鼠内源基因的重排是否会效仿外源基因,也...

科学家将大鼠生长素基因注入小鼠的什么细胞中得到了“巨型小鼠...
1982年,美国科学家培育出“巨型小鼠”这项技术,是利用改变鼠基因的方法,用显微注射技术将大鼠生长激素基因注入到小鼠的受精卵里,由这样的受精卵发育成的鼠生长快,体积大,让鼠的性状发生变异.这种技术称为转基因技术.故选D

大鼠医学研究
首先,大鼠的神经-内分泌系统发达,其应激反应敏感,常被用于复制应激性胃溃疡模型。研究者常用切除内分泌腺的方法,如肾上腺、垂体和卵巢等,来进行内分泌相关的实验研究。在营养与代谢性疾病研究中,大鼠是理想的实验对象。它被广泛用于维生素A、B、C和蛋白质缺乏等营养缺乏的研究,以及氨基酸(苯丙氨酸等...

大鼠的毛色由独立遗传的两对等位基因控制.用黄色大鼠与黑色大鼠进行杂交...
A、设控制大鼠毛色的基因是A、a和B、b两对对基因,根据F2中灰色:黄色:黑色:米色=9:3:3:1,F1灰色基因型是AaBb,亲本大鼠基因型是AAbb×aaBB,A正确;B、F1中的灰色大鼠一定是杂合体,F2中灰色大鼠A_B_,可以是纯合体,也可以是杂合体,B错误;C、F1与黄色亲本杂交,F1灰色基因型是AaBb...

利川市19378537592: 如何利用pcr技术进行基因定向突变 -
那广吲达: 将要进行定点突变的序列设计在引物上面 通过PCR扩增目的基因,连接T载体测序,确定成功突变后 在进行相关表达载体的构建

利川市19378537592: 已知一个小鼠基因A,如何利用EST分析得到人类基因组中与A基因同源的基因?分步骤回
那广吲达: 首先关于同源的定义就比较多,如果以序列相似性作为唯一依据话,可以采用NCBI上的blast软件进行序列比对.用basic blast 中的nucleotide blast软件,将基因A提交给服务器,在参数设置的database中选EST(expressed sequence tags),进行blast,返回的结果中,排列越前的就是同源性越高的. 这个方法是以序列相似一定就是同源基因为基本假设的,一般而言这样做是可行的.但就同源基因本身这个概念来讲我们可以认为同源基因基本都是序列相似的,但这并不能代表序列相似就一定是同源的.

利川市19378537592: 什么是基因的定位诱变? -
那广吲达: 定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等.定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的...

利川市19378537592: 蛋白质工程研究进展 -
那广吲达: 蛋白质工程的研究进展及前景展望1 蛋白质工程的由来和目标 蛋白质工程是在基因工程冲击下应运而生的.基因工程的研究与开发是以遗传基因,即脱氧核糖核酸为内容的.这种生物大分子的研究与开发诱发了另一个生物大分子蛋白质的研究...

利川市19378537592: crispr/cas9的应用 -
那广吲达: 基因敲除动物模型一直以来是在活体动物上开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶标的重要工具.但是传统的基因敲除方法需要通过复杂的打靶载体构建、ES细胞筛选、嵌合体小鼠选育等一系列步骤,不仅流程繁琐、对技术的要求很高,而...

利川市19378537592: 微生物代谢工程中常用的基因操作技术有哪些 -
那广吲达: 微生物的基因操作技术有:核酸的凝胶电泳、核酸的分子杂交技术、DNA 序列分析、基 因的定点诱变、细菌的转化、利用 DNA 与蛋白质的相互作用进行核酸研究、PCR 技术等. 基因定点突变(site-directed mutagenesis):通过改变基因特...

利川市19378537592: 小鼠体色由位于两对常染色体上的两对等位基因控制.其中,A基因控制黄色,R基因控制黑色,A、R同时存在则 -
那广吲达: (1)根据题意,亲代灰鼠的基因型为A-R-,亲代黄鼠的基因型为A-rr,由于F1出现了白色(aarr),故亲代灰色鼠的基因型为AaRr,黄色鼠的基因型为Aarr.体色的遗传符合孟德尔的自由组合定律和分离定律,主要体现了自由组合定律. (2)亲本基...

利川市19378537592: 如何通过构建突变载体的方法使细胞内基因低表达 -
那广吲达: 构建突变载体的方法主要是采用高GC多位点定点PCR扩增发,引起扩增时载体序列重叠,从而获得和构建突变载体.当然,突变载体要和目标低表达基因有同源性或相近性,在复制和表达时,可以实现替代.然后将突变载体导入宿主细胞中进行突变载体与宿主细胞基因之间进行同源重组,或进行变性复制等,可以将目的基因进行定点敲除,进而实现细胞内基因的低表达.

利川市19378537592: 如图为利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因大鼠的流程,下列说法正确的是()A.1为卵母细胞,一般从 -
那广吲达: A、从活体输卵管中采集到的卵母细胞已经成熟,可直接与获能的精子在体外受精,A错误; B、由图可知,该过程所涉及的胚胎工程技术主要是体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植,B正确; C、受精卵3通过有丝分裂和分化形成胚胎4,C错误; D、5是代孕母体,不会出现高血压,因此目的基因成功表达的标志是6表现为高血压,D错误. 故选:B.

利川市19378537592: 基因定位诱变是啥呀 -
那广吲达: 在DNA水平上产生多肽编码顺序的特异性改变称为基因的定向诱变.利用这项技术一方面可对某些天然蛋白质进行定位改造,另一方面还可以确定多肽链中某个氨基酸残基在蛋白质结构及功能上的作用,以收集有关氨基酸残基线性序列与其空间...

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