革兰氏染色为什么要进行复染?

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革兰氏染色中初染液和复染液能颠倒使用吗~

革兰氏染色中初染液和复染液不能颠倒使用。
碘液要与结晶紫形成络合物,才能卡在革兰氏阳性细胞壁内。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
(1)载玻片固定。在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。

(2)草酸铵结晶紫染1分钟。
(3)自来水冲洗,去掉浮色。
(4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液。
(5)用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。
(6)用蕃红染液或者沙黄复染30秒,革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。

自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的,故不影响。好比拿年轻的死人做实验,你就不能拿自然老死的做,身体已经不是年轻人那样的身体了。这个例子不好,将就吧。

通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。如果不经过复染,革兰氏阴性菌就是无色,不利于结果观察。

楼上的已经回答清楚了,简单的说,就是复染主要是给革兰氏阴性菌上色的,整个过程可以省略的也就是这一步。
革兰染色的是根据革兰氏阳性菌和阴性菌的细胞壁结构的不同来区分的,用个形象一点的话就是:
革兰氏阳性菌的细胞壁就好比一张筛面粉的筛网,孔径较小,初染的结晶紫和媒染的碘液会结合成大分子的复合物,经过酒精脱色也不会跑出来,就算是颜色浅的番红复染也不会影响到紫色的观察,所以到最后也还是紫色的。
而革兰氏阴性菌的细胞壁就像是一张渔网,孔径较大,结晶紫和碘液的复合物就算结合了也可以经过酒精处理脱出来,到了酒精脱色这一步就是无色的,再复染上蕃红或者沙黄染液,到最后就会显出红色。


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革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态,细胞壁孔径大,不能阻止溶剂透入,因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色.虽然如此,革...

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永城市17040863414: 革兰氏染色为什么要进行复染? -
兆苇精制: 当用结晶紫初染后,像简单染色法一样,所有细菌都被染成初染剂的紫色.碘作为媒染剂,它能与结晶紫结合成一种结晶紫-碘的复合物,这种复合物增强了染料与细菌的结合能力.当用脱色剂脱色时,不至于很轻易就把紫色脱去,因此当用革兰氏染色法对某些菌染色时,如果这种菌本身能够与结晶紫结合的足够紧密,我们就可以省去复染这一步.

永城市17040863414: 革兰氏染色为什么要进行复染? -
兆苇精制:[答案] 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会...

永城市17040863414: 革兰氏染色方法中初染,媒染,脱色,复染的目的是什么
兆苇精制: 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色.

永城市17040863414: 革兰氏染色法中最重要的是哪个步骤?为什么? -
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永城市17040863414: 革兰氏染色步骤中那个步骤是可以省略的?是媒染还是复染?为什么? -
兆苇精制: 觉得可以省略复染.因为媒染的目的是增强染料与细胞的结合(如常用的碘液,它可以与结晶紫形成复合物,该复合物与细胞结合的更牢),如果省略媒染,使误判的概率增大;而复染只是为了让结果更明显,使人一目了然,没有它革兰氏阳性菌与阴性菌的实验结果仍然不同,不影响判断.

永城市17040863414: 革兰氏染色法的重要意义是什么? -
兆苇精制: 革兰氏染色法 是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系. 阳性紫色阴性...

永城市17040863414: 革兰氏染色法的重要性是什么? -
兆苇精制: 取经火焰固定的标本片,加结晶紫液于涂片上,染色1分钟,轻轻用水冲去染液;片上加革兰氏碘溶液,作用1分钟,用水冲洗;倾尽玻片上的积水后,滴加适量95%乙醇于涂片上,作用0.5~1分钟,进行脱色;水洗后,以复红染液复染1分钟,水洗净用滤纸吸干后镜检.脱色是该染色法的关键,注意涂片不再有颜色褪下即停止,脱色时一般不要把染料倾去,应用水把染料浮起再冲去,以免染料颗粒附着在玻片上.本染色法可用于鉴别革兰氏阳性及阴性菌.

永城市17040863414: 革兰氏染色法的机制与重要性 -
兆苇精制:[答案] 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: 1)涂片固定. 2)草酸铵结晶紫染1分钟. 3)自来水冲洗. 4)加碘液覆盖涂面染1分钟. 5)水洗,用吸水纸吸去水分. 6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后...

永城市17040863414: 革兰氏染色法的重要性是什么?问题说明越详细,回答也会越准确!
兆苇精制: 为了研究细菌的形态,微生物学家发明了对细菌的染色,有用一种染色剂的称单染,仅能对细菌形态观察.用两种以上的称复染,革兰氏发明了复染色法;先后用两种染色剂和媒染剂、脱色剂组合,由此而命名为革兰染色. 革兰染色不仅可以观察细菌的形态,同时将细菌分为两大类.一类是染色阳性菌是紫色,另一类染色阴性的是红色. 由于细菌的结构上的差异,形成了不同的染色效果.了解染色性能有助于临床用药和细菌的鉴定; 如青霉素对革兰染色阳性菌有效,当化脓性细菌感染可首选药物.而氟哌酸对革兰染色阴性杆菌有效,如肠道病、腹泻为常用药. 当从尿道培养出革兰阴性双球菌,可以作为淋病感染的重要指症.如出现革兰染色阳性的葡萄球菌,又可作为金黄色葡萄球菌感染依据.

永城市17040863414: 革兰氏染色法及其机理? -
兆苇精制: 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家 Christain Gram创立.操作流程 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: (1)载玻片固定.在无菌操作条件下,用...

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