提取血液的RNA怎么提取
方法一：先用裂解液将血液中的细胞进行裂解，让细胞中的RNA释放出来，然后用磁珠吸附，洗脱(目的是将吸附在磁珠上的蛋白质或其他大分子杂质洗去)，最后用缓冲液将RNA洗脱下来即可；方法二：用裂解液将血液中的细胞进行裂解，让细胞中的RNA释放出来，用酒精进行沉淀，RNA沉淀在管底，离心，弃去上清，将沉淀洗脱，(目的也是将吸附在磁珠上的蛋白质或其他大分子杂质洗去)，最后用缓冲液将RNA洗脱下来即可。
血液（全血，也就医学上说的外周血）中RNA的含量很低，1ml一般在3ug左右（1-7ug）。一般是处理抗凝血液。
像以上全血的RNA提取有两种思路：
1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点：处理的体积血液体积有限，一般1ml Trizol处理100ul血液，最多不超过200ul.
2) 先去除血液中的红细胞分离出其中的白细胞（即淋巴细胞），然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点：只能提取得到淋巴细胞的RNA，血液中游离的如病毒RNA无法提得。
取新鲜的血液（紫管），加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10,000 rpm离心1分钟。
彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。
每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol。室温放置5min，使样品充分裂解。
4℃12,000 rpm 离心10分钟，取上清（）。
每1ml TRIzol加入200μl氯仿，剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min，自然分相。
4℃ 12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA主要在水相中，把水相转移到新管中（小心吸取水相）
在上清中加入等体积冰冷的异丙醇（），室温放置10-20min。
4℃ 12,000 rpm离心10min，弃上清，RNA沉淀于管底。
RNA沉淀中加入1ml 75%乙醇（用RNase-free水配制，），温和振荡离心管，悬浮沉淀。
4℃5,000-8,000 rpm离心1-2min，弃上清。
室温放置1-2分钟晾干沉淀。
沉淀中加入50-100μl RNase-free水，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存。
检测纯度和浓度（OD260/OD280在2.0左右）
1.10.5ml biog析出液加入59.5mL无水乙醇；18mL biog洗涤液加入42mL无水乙醇
2.取无RNA酶的15mL离心管，加入7.5mLbiog结合液，再加入2.5ml的血液，震荡混匀 15秒，室温放置5分钟，5,000 rpm 离心 3分钟。
3.彻底移去上清，加入625μLPBS，悬浮沉淀；加入2500 μLbiog裂解液，250μLbiog消化液，充分振荡混匀，56℃水浴10 分钟至细胞完全裂解。
4.加入6250ul配置好的析出液，轻轻颠倒混匀。
5.将吸附柱放入收集管内，将4813μL上述溶液转入吸附柱内，静置2分钟，5,000 rpm 离心2分钟，弃收集管内废液；
6.将吸附柱放回收集管内，将剩余4813μL溶液转移至吸附柱内，重复上一步骤。
7.将吸附柱放回收集管内，加5000 μL洗涤液至吸附柱内，5,000 rpm 离心1分钟，弃收集管内废液。
8.将吸附柱放回收集管内，5,000 rpm 离心2分钟，离去残留的洗涤液。
9.取出吸附柱，放入新的无RNA酶的15 mL 离心管内，加入250-400μL biog洗脱液，静置3 分钟，5,000 rpm离心2分钟，收集RNA溶液。提的RNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
做PCR看大鼠PPARγ的表达 抽提RNA的时候是该用血清还是血浆呢?_百度...
应该是血细胞啊，血清是免疫球蛋白，血浆是水啊，盐啊，脂肪，蛋白质的混合物，你要提取总RNA应该从血细胞中提取，就用没有凝固的全血就行，血液要用肝素抗凝，这样就行了，具体的量肝素说明书上有。
如何从血液中提取mirna
血清血浆就推荐QIAgen的试剂盒217004，小量提取试剂盒，每个纯化柱只能提200ul，最终出来的量一般是150ng~300ng（正常人的都很少，有炎症或癌变人的血清血浆miRNA会更多）。另外，这样出来的都是total RNA，只不过是其中保留下了小分子的miRNA，如果要分离miRNA，还需要别的手段，例如PEG分离法，专门试剂...
如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白
血液是唯一与所有器官都有接触的组织，携带着有关机体的大量宝贵信息。在理论上，检测血液携带的 DNA、RNA、囊泡和细胞残骸可以帮助人们诊断和监控各种疾病。
提取rna 过程中,乙醇没有除干净,对后续试验有没有影响,有没有什么补...
如果提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的，因为小RNA没有结合EB的结构，所以电泳看不到什么东西。其次，如果提取细胞总RNA的话，但不排除EB有问题，仪器是可以分辨RNA降解的。在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有...
血液检验标本采集方法有哪些
4 、标本保存:检测靶核酸为 DNA 的标本,可在 2～8℃下保存 3 天;检测靶核酸为 RNA 的标本,应保存在-20℃下。 十二、骨髓检查的要求和注意事项 1、涂片要求:二张血片,六张骨髓片,怀疑白血病则需八张骨髓片。骨髓血片注明“B”,骨髓片注明“M”,以示区别。 2、申请单注意事项: 1)病例摘要:应填写全...
病毒RNA的提取方法主要有哪几种
9.加入20ul DEPE水(加入depc的纯水高压后的水即为DEPE水),轻轻混匀溶解RNA。2000rpm离心5sec,冰上保存备用(最好2小时内使用,以免RNA降解)二、用TRIzol LS提取应用TRIzol LS提取病毒RNA所提取物为血清、血液、细胞培养液、鸡胚尿囊液等液体中的病毒。提取时尽量在人少时进行,防止空气中RNA酶的污染。所用一切...
RNA提取后OD值及浓度都好为什么电泳未见条带啊
首先，看你提取什么RNA，如果你提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的，因为小RNA没有结合EB的结构，所以电泳你看不到什么东西。其次，如果你提取细胞总RNA的话，就可能如一楼的朋友回答的那样，但不排除你的EB有问题，而且有点和一楼的朋友意见不一样，仪器是可以分辨RNA降解的，对于Trizol法提取的...
提取rna时,加入裂解液,离心后,得到的沉淀是?
你提取的是什么样本，血液吗，加入裂解液是什么裂解液，如果是血液的话，加入红细胞裂解液那沉淀的是白细胞
Trizol法提取流感病毒 RNA
10、加入20ulDEPE水(加入depc的纯水高压后的水即为DEPE水)，轻轻混匀溶解RNA。2000rpm离心5sec，冰上保存备用（最好2小时内使用，以免RNA降解）。二、TRIzol LS提取法 所提取物为血清、血液、细胞培养液、鸡胚尿囊液等液体中的病毒。提取时尽量在人少时进行，防止空气中RNA酶的污染。所用一切物品也...
你知道血清,血浆的这些知识点吗?
血清分离：在专用管中，让全血自然凝固后离心，保留上清（步骤4-6<\/，多一步室温放置让血液充分凝固）。分离注意事项与危害分离过程中，务必避免溶血（红细胞破裂<\/）和细胞混入，关键在于速度（快<\/），离心温和（慢<\/），并保持低温（冷<\/）储存运输。RNA含量评估与选择血清、血浆中的RNA含量测定需...
镡樊当归：[答案] 方法与细胞组织提RNA基本相同.具体有以下几种方法.A:分离淋巴细胞群再提取1.新鲜血液2ml,肝素钠抗凝,D-HANK'S对倍稀释.2.将稀释液轻置于4ml淋巴细胞分离液上层.3000rpm x 20min,4度.3.取淋巴细胞层,PBS对倍稀释,300...
烈山区13258717872： 怎样提全血RNA - ？
镡樊当归： 方法与细胞组织提RNA基本相同.具体有以下几种方法. A:分离淋巴细胞群再提取 1. 新鲜血液2ml,肝素钠抗凝,D-HANK'S对倍稀释.2. 将稀释液轻置于4ml淋巴细胞分离液上层.3000rpm x 20min, 4度.3. 取淋巴细胞层,PBS对倍稀释,3000...
烈山区13258717872： 如何提取血RNA - ？
镡樊当归： 都应该是可以的.不过提取RNA一般都用kit(试剂盒),RNA和DNA不一样,杂质多,易降解,所以基本上不用自己配的溶液提. 虽然我个人没有做过,但是全血和血清中提取RNA都是可以的,只是用的trizol和提取组织细胞中的不一样. 你尝试搜索一下Trizol LS,看看是不是你需要的.
烈山区13258717872： 如何选择最佳的全血DNA,RNA提取方法 - ？
镡樊当归： 如何选择最佳的全血DNA、RNA提取方法?从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了,提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析,可供选择的方法非常多,乱花渐欲迷人眼,如何选择最适合的方法,成了很多人实验...
烈山区13258717872： 怎样用TRIzol 法提取动物血清总RNA - ？
镡樊当归： 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管...
烈山区13258717872： trizol法提取血中的RNA,怎样做量会更多 - ？
镡樊当归： 或再适当延长一点时间.迅速离心,少加些血.混匀之后放置10分钟左右,混匀再去离心. 可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷1 血要新鲜,之后加75%乙醇.只洗一遍. 3 每个步骤操作要快,用的时间药短些,防止降解 4 异丙醇沉淀的时候,放-20°C的冰箱半个小时.一般我都加的30.如果需要浓度高点可以少加水. 6 提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存,洗2遍易损失部分RNA.如果是冻存的,在解冻时要完全,之后再加Trizol. 2 可以稍多加一些Trizol,直接加三氯甲烷.干燥一会就迅速加DEPC水少量. 5 不要过分干燥,管内稍有点残余的乙醇也没关系
烈山区13258717872： 抽全血做二代测序抽rna用什么方法 - ？
镡樊当归： 提取RNA是吧,可以用酚氯仿提取,也可以用凯杰生物的RNA提取试剂盒的
烈山区13258717872： 从全血里提取RNA的方法? - ？
镡樊当归： 10月13日 13:35 RNAgents总RNA提取系统 1)Promega有哪些系统用于提取总RNA及poly(A)+RNA? 2)RNAgents®总RNA提取系统的工作原理怎样? 3)RNAgents®总RNA提取系统的一般得率是多少? 4)RNAgents®总RNA提取系统的各组分的...
烈山区13258717872： 如何从血液中提取mirna？
镡樊当归： 全血提取我用过百泰克的,提取的效果比较好,最终纯度也还不错.大概1ml全血最多能提出来8ug吧,已经比一般传统方法3~7ug要好的多. 血清血浆就推荐QIAgen的试剂盒217004,小量提取试剂盒,每个纯化柱只能提200ul,最终出来的量一般是150ng~300ng(正常人的都很少,有炎症或癌变人的血清血浆miRNA会更多). 另外,这样出来的都是total RNA,只不过是其中保留下了小分子的miRNA,如果要分离miRNA,还需要别的手段,例如PEG分离法,专门试剂盒分离.实际实验中,很多都只需要total RNA起始即可.
烈山区13258717872： 我想提取奶牛全血中的单核细胞mRNA,由于采集血液的地方离实验室较远,为了使mRNA不降解,怎么保存血呢? - ？
镡樊当归： 您好,细胞不被破坏的话RNA并不容易发生降解,请您放心.根据以前去手术室取血的经验,使用紫头管(柠檬酸钠抗凝管)取血,保存在冰盒里运送到实验室需1-2小时,RNA能被正常提取,离心时注意4°C离心就好.另外,关于从血液中的...
