碱法分离质粒DNA的原理是什么？
现质粒提取论手提试剂盒其根本原理碱裂解:菌体NaOH SDS溶液裂解蛋白质与DNA发变性加入液质粒DNA能够迅速复性呈溶解状态离留清;蛋白质与染色体DNA变性 呈絮状离沉淀 进步质粒DNA获取手提经苯酚、氯仿抽提RNA酶消化乙醇沉淀 等简单步骤除残余蛋白质RNA及盐试剂盒则基础使用DNA吸附柱吸附质粒DNA洗脱质粒 评价:一通琼脂糖电泳检查所获质粒(准确需酶切)细菌基组DNARNA污染及质粒断裂少同根据marke量品进行致浓度定量; 二通紫外光光度计测定品OD二吧0OD二陆0计算其比值衡量品纯度经验值:纯DNA:OD二陆0/OD二吧0≈一.吧(＞一.9,表明RNA污染;＜一陆表明蛋白质、酚等污染)同用紫外光光度计其进行精确浓度定量 除蛋白质:所言提取质粒程部蛋白质碱裂解形沉淀除;更能形沉淀蛋白质用酚/氯仿/异戊醇进行抽提程除 若疑问欢迎继续讨论祝愉快
环状的质粒dna，因为只有环状的才是环状双螺旋结构，在碱裂的时候线状的基因组dna氢键破坏，双螺旋解开。而环状的质粒虽然有部分氢键被打开，但是环状结构仍保持，从而碱裂解后能跑电泳分离出来。
现在质粒提取无论手提还是试剂盒，其根本原理大多还是碱裂解法：当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性 而呈絮状，离心时可沉淀下来。进一步的质粒DNA获取，手提是经过苯酚、氯仿抽提，RNA酶消化和乙醇沉淀 等简单步骤去除残余蛋白质和RNA以及过多的盐分，而试剂盒则在此基础上使用DNA吸附柱来吸附质粒DNA，在洗脱得到质粒。
评价：1，可通过琼脂糖电泳来检查所获质粒的大小（准确大小需酶切），有无细菌基因组DNA和RNA污染，以及质粒的断裂多少，同时也可根据marke量对样品进行大致的浓度定量；
2，通过紫外分光光度计测定样品OD280和OD260，计算其比值来衡量样品的纯度。经验值：纯DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9,表明有RNA污染；＜1。6，表明有蛋白质、酚等污染）。同时，用紫外分光光度计对其进行精确浓度定量。
去除蛋白质：如上所言，提取质粒过程中，一部分蛋白质会在碱裂解法中形成沉淀，得以去除；还有更多不能形成沉淀的蛋白质在用酚/氯仿/异戊醇进行抽提的过程中被去除。
若有疑问，欢迎继续讨论，祝愉快！
强碱可以破坏细菌壁，并且切断细菌DNA,在破坏质粒DNA之前中和之后，细菌残骸和切断的dna会和表面活性剂形成沉淀，通过离心分离，质粒留存在上清溶液中。
如何进行质粒DNA的分离,纯化和鉴定
分离质粒时，可以将质粒去得很干净。方法为：先用TE之类的试剂将菌液悬浮起来，再用NaOH和SDS将菌液裂解（起裂解作用的主要是NaOH，但此时，SDS可以与蛋白很好的结合）。第三步，加入酸中合第二步中的碱，并且将SDS沉淀下来，同时，SDS和蛋白也一起沉淀下来，而基因组上面有很多的蛋白，这样基因组就...
在细菌染色体dna提取过程中怎么样除去质粒dna?
①差速离心,可以将两种DNA分离 ②凝胶电泳,分离开两种DNA后,将迁移最慢的条带（染色体DNA）剪下,用洗脱液洗脱下来.③碱变性裂解法,细菌悬浮液在高碱性条件下,染色体和蛋白质变性,质粒DNA由于其超螺旋共价闭合结构,双链不会分离,再以PH4.8的高盐缓冲液调节其PH至中性,质粒DNA可再度复性,其速度比染...
碱裂解法分离提取质粒DNA的基本原理是:()
碱裂解法分离提取质粒DNA的基本原理是：（）A.碱性条件下染色体DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而质粒DNA则相反。B.碱性条件下质粒DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而染色体DNA则相反。正确答案：A
质粒DNA的提取方法总共有哪些,回答的全给高分
(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的...
如何提取质粒DNA
通过离心，可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中,然后用酚、氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。抽提质粒DNA常用碱裂解法，它是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法，其基本原理为：在碱性条件（pH12.5）下，线性染色体DNA的双螺旋结构解开而变性，质粒DNA的氢键虽然断裂，但两条...
质粒提取的主要步骤是什么及其作用
从细菌中分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤：培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞；分离和纯化质粒DNA。采用强碱液、加热或溶菌酶（主要针对革兰氏阳性细菌）可以破坏菌体细胞壁，十二烷基磺酸钠（SDS）和TritonX-100（一般很少使用）可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或Triton X-100处理后，细菌染色体DNA会...
用碱裂解法提取质粒DNA的,加入溶液1,容液2,容液3后各有哪些现象,原因是...
溶液2中的主要成分是NaOH和SDS，是用来裂解细胞的。因为NaOH遇到二氧化碳容易反应生成碳酸氢钙，影响使用效果，因此要现配现用。SDS的话，低温容易产生沉淀。不过在37°C 水浴一下就好。主要还是NaOH的问题。溶液1主要是让菌体细胞充分悬浊于溶液，没有什么实际意义，可以不要。溶液2是碱液，目的在彻底破坏...
在细菌染色体dna提取过程中怎么样除去质粒dna?
①差速离心，可以将两种DNA分离 ②凝胶电泳，分离开两种DNA后，将迁移最慢的条带（染色体DNA）剪下，用洗脱液洗脱下来。③碱变性裂解法，细菌悬浮液在高碱性条件下，染色体和蛋白质变性，质粒DNA由于其超螺旋共价闭合结构，双链不会分离，再以PH4.8的高盐缓冲液调节其PH至中性，质粒DNA可再度复性，其...
碱变性法提取质粒dna的原理及过程
原理是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。过程如下：1、将含有目标质粒的细菌或真核细胞进行裂解，释放细胞内的DNA。这可以通过机械方法（如超声波处理）或化学方法（如洗涤剂溶解）来实现。2、将裂解后的细胞溶液加入高pH（常为12.6）的碱性溶液中。在碱性条件下，DNA的双螺旋...
质粒DNA如何提取的?
试述碱裂解法提取质粒的基本原理及关键试剂的作用如下：将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要用碱处理的强度和时间不...
邰妍苯丙：[答案] 现在质粒提取无论手提还是试剂盒,其根本原理大多还是碱裂解法:当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变...
乡城县13045615141： 碱法提取质粒中,基因组dna和蛋白质怎样被去除,其原理何在 - ？
邰妍苯丙： 现质粒提取论手提试剂盒其根本原理碱裂解:菌体NaOH SDS溶液裂解蛋白质与DNA发变性加入液质粒DNA能够迅速复性呈溶解状态离留清;蛋白质与染色体DNA变性 呈絮状离沉淀 进步质粒DNA获取手提经苯酚、氯仿抽提RNA酶消化乙醇沉淀 等简单步骤除残余蛋白质RNA及盐试剂盒则基础使用DNA吸附柱吸附质粒DNA洗脱质粒 评价:一通琼脂糖电泳检查所获质粒(准确需酶切)细菌基组DNARNA污染及质粒断裂少同根据marke量品进行致浓度定量; 二通紫外光光度计测定品OD二吧0OD二陆0计算其比值衡量品纯度经验值:纯DNA:OD二陆0/OD二吧0≈一.吧(>一.9,表明RNA污染;
乡城县13045615141： 质粒DNA提取和细胞基因组DNA提取的异同 - ？
邰妍苯丙： 不同点 一、提取方法不同 DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法.化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法.生物方式:酶法. 质粒抽提方法即去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,...
乡城县13045615141： 为什么真核DNA无法用碱裂解法提取 - ？
邰妍苯丙： 因为真核细胞DNA上有蛋白质结合,如果用碱裂解法就会把DNA与蛋白质一起沉淀下去,无法分离出细胞核DNA!碱裂解法提取质粒DNA,原理是细胞内蛋白质在沉淀的过程中会把大的DNA分子一起沉淀下去,质粒DNA由于较小,不会被沉淀而进入上清液,因而可以通过离心将其分离出来!然而真核DNA与组蛋白紧密结合,无法用碱裂解法提取出来!
乡城县13045615141： SDS碱裂解法制备质粒DNA的具体操作步骤是怎么样的?那位大侠给力点,帮下忙 - ？
邰妍苯丙： 细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等.各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整合到寄主...
乡城县13045615141： 为什么DNA可以用碱变性而RNA不能采用碱变性,而一般用 - ？
邰妍苯丙： DNA可以用碱变性而RNA不能采用碱变性的原因: 因为DNA耐碱,而RNA中核糖的2'羟基还在,可以在碱性条件下攻击磷酸二酯键,使其断裂.碱变性法提取质粒DNA原理: 普遍采用的碱变性法具有操作简便、快速、得率高的优点.其主...
乡城县13045615141： 醋酸钠的作用是什么?有的提取DNA的方法最后一步加入的溶液是70%乙醇和NaAc的,不懂NaAc在里面的作用. - ？
邰妍苯丙：[答案] 原理举例:碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的.在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性.质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补...
乡城县13045615141： 生物化学实验中制备质粒DNA方法中,酚氯仿裂解法的实验原理 - ？
邰妍苯丙： 质粒DNA的制备 【实验目的】 1.了解质粒的特性及其在分子生物学研究中的作用; 2.掌握质粒DNA分离和纯化的原理; 3.学习碱裂解法和煮沸法分离质粒DNA的方法. 【实验原理】 质粒是细菌内的共生型遗传因子,它能在细菌中垂直遗传并...
