高效液相色谱中同一个标准品两天跑出来的峰面积相差四百左右(6500左右的峰面积),主要是什么问题???

作者&投稿:校徐 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
高效液相色谱中添加回收实验中的峰面积与按标准工作曲线中计算出来的峰面积相差许多,是什么原因?~

根据你描叙的情况,极有可能是基质带来的影响,你可以用基质匹配的方法来配制标准曲线(即用空白的土壤制备液来稀释标准);还一个就是用内标,但根据你目前的情况选择一个合适的内标估计要花不少时间。所以建议你最好还是基质匹配法来配制标准曲线。

不会,只和总量有关

第一,要保证一个稳定的实验条件,两天的液相、色谱柱没变。保留时间也没有太大变化。如果色谱柱不同,可能变化会很大。保留时间有变化,峰面积会有一定影响。
第二,就是你这个物质的问题。这涉及到一个溶液稳定性的问题。有些物质,连续放置一至两个星期都不会有太大的变化。但是有些物质配制24小时之内就已经超出范围了,甚至有需要现配现用的样品。这由你测定的物质和溶剂决定。所以要有溶液稳定性的考察。

你的这种情况峰面积变化了将近1%,如果不是进样误差导致,那就先排除一下实验条件的影响,然后在一天之内的几个时间点考察一下稳定性就可以了。

变大还是变小 了,若变大了说明溶剂挥发了,液相室的温度太高了,很少变低的,除非你的对照品很不稳定的。

是新配置的标准溶液吗?有的不适合放太长时间,还有仪器,一天之间会有一点变化,我的是32到30,曲线变化


hplc的图谱,同一个样品,不同保留时间不同,峰面积不同,如何计算
4、对进样器清洗一下,清洗干净后先进一针空白,再进样,看看结果如何,如果有明显减少,那可能是进样器污染,有样品残留在进样阀体内,在切换的过程中被流动相带入色谱柱。5、考虑样品溶液是否均匀。建议同一个浓度连续进样5次,看一下结果如何变化,有没有规律;如果是样品溶液不均匀,可以再搅拌一...

高效液相色谱中老是在同一个时间出一个杂峰,(打任何样品都出在这个时间...
1、不进任何样品,只进流动相。2、进纯的色谱乙腈或甲醇。3、进么也不用进,只空搬一下进样阀。分别采集以上三个谱谱,再来说明情况(如果能上传图上来就最好了)

高效液相色谱法中,同一样品相同的进样量,流速改变会影响峰面积吗?_百 ...
不会,只和总量有关

高效液相色谱的出峰时间为什么会推迟?测的是同一个样品,白天测比晚上...
压力不会使出峰时间延后,出峰时间延后说明保留时间增长,与流动相的极性、柱温有关系。柱温不变,正相条件下,可能是流动相极性变弱了;反相条件下,可能是流动相极性变强了。流动相不变的前提下,看柱温是不是偏低。应该是流动相或者柱子的问题.流动相比例的变化可以排除,因为比例变化,A,B两峰都...

高效液相色谱仪中,色谱柱相同,一个用示差折光器一个用紫外吸收检测
肯定是不相同的。紫外检测器检出的是紫外吸收图谱。而示差检测器的原理是物质之间的折光率。最简单的说法,示差检测器是万能检测器。很多样品没有紫外吸收,在紫外图谱上没有色谱峰。但是示差检测器就可以检出色谱峰。

高效液相色谱法中,怎样才能确定一个峰的纯度,即确定一个峰一种物质
则可认为是单个组分,若出现肩峰,则表明有杂峰。如果是DAD检测器,可以通过光谱图来识别,一般的HPLC-DAD就自带峰纯度检测功能,绿区越大表明峰越纯。当然你自己也可以看,因为峰是短时间内多次扫描的再拟合成的峰形,在每一条的光谱图代表一次扫描,光谱图越杂,峰纯度越差。

在高效液相色谱中,是否可用保留值定性
在高效液相色谱(HPLC)中,保留值通常用于物质的定性分析。保留值是指物质在色谱柱中的停留时间,它对于定性分析至关重要。在稳定的色谱操作条件下,不同物质的色谱峰会在色谱图上呈现出特定的位置,这一位置的变化反映了它们的保留值。保留值包括死时间、保留时间、校正保留时间、保留体积等参数。在液相...

高效液相色谱法分离某物质得到的色谱图两个峰值相同,是什么原因?应该采 ...
2:换柱子,更换性能更好的色谱柱以改善分离度【旧柱子换成新柱子,短柱子换成长柱子,用高效分离柱(粒径更小,孔径更细的柱子)或者根据两个化合物的性质换特殊柱子(例如换含碳量更高或更低的柱子或者换经过特殊处理的柱子)】3:将等度洗脱改成梯度洗脱 4:改变柱温(这个需要自己摸索一下)5:...

高效液相色谱法中采用什么定量时,样品溶液和标准溶液的进样量相同_百度...
色谱定量方法主要有三种:内标法,外标法,归一化法。使用内标法及归一化法定量时进样量不需要严格控制,但外标法样品与标样进样量必须相同。

高效液相色谱与经典液相色谱有何异同?
高效液相色谱与经典液相色谱异同如下:一、类型不同:1、高效液相色谱法:吸附色谱法(AdsorptionChromatography)、分配色谱法(PartitionChromatography)、离子色谱法(IonChromatography)、分子排阻色谱法\/凝胶色谱法(SizeExclusionChromatography)、键合相色谱法(bonded-phasechromatography)、亲和色谱法(Affinity...

宁安市15666169236: 用高效液相色谱仪检测同一样品两遍结果应该一样吗? -
贺琬馨迪: 你所说的结果如果是峰面积的话,那要看系统有没有变化,如果系统关闭过再重新开启并再次测试,峰面积可能会变化,如果连续进样两次,那么结果应该是一样的,不然的话要考虑仪器系统故障或者样品极不稳定.如果你说的是含量计算结果,那么如果不考虑操作误差和方法误差的话,结果应该是一致的,至少标准偏差应该不超过1%.这个偏差的评估比较复杂,要视很多因素而定,但超过5%甚至10%的话就不太正常了.

宁安市15666169236: 高效液相色谱法分析一个样品为什么只出溶剂峰不出样品峰?是不是浓度太低?应该分析多大浓度的样品合适? -
贺琬馨迪: 浓度太低只是其中的一种可能性,可以提高样品浓度或加大进样量解决.还有其它的原因 1.样品在色谱柱上无保留或是保留时间太长,较大的可能是流动相不适用,改变流动相种类或比例.无保留的原因也较多,除以上原因外,也有可能是柱子选择不对,或是柱损坏. 2.紫外检测器的话,可能是波长选择的原因,可能此波长下样品的紫外吸收非常小.

宁安市15666169236: 在做高效液相色谱中,为什么同样的样品,物质的出峰时间差这么多呢,第一次是16min,第二次是26min -
贺琬馨迪: 要看你液相的条件前后是否一致.最主要的是流动相是否前后相同,流动相的不同最容易导致保留时间变化;另外要看一下流动相流速,柱温等···

宁安市15666169236: 高效液相色谱中同样的一批样出峰时间不一样是什么原因 -
贺琬馨迪: 先改变下流动相看看能不能分开.(设置梯度,有机相由低到高试试) 二者的吸收波长是否一样,如果不一样的话可以设双波长采集数据.分别用各自的波长计算含量.

宁安市15666169236: 高效液相色谱的出峰时间为什么会推迟?测的是同一个样品,白天测比晚上测出峰时间推迟了. -
贺琬馨迪: 压力不会使出峰时间延后,出峰时间延后说明保留时间增长,与流动相的极性、柱温有关系.柱温不变,正相条件下,可能是流动相极性变弱了;反相条件下,可能是流动相极性变强了.流动相不变的前提下,看柱温是不是偏低.应该是流动相或者柱子的问题.流动相比例的变化可以排除,因为比例变化,A,B两峰都会变化.B峰不变化,A峰变化.应该是体系中有A物质敏感的微小变化.例如PH,极性等.我觉得是流动相比例变了,最好的验证方法是流动相配制在一个瓶子朋友可以到行业内专业的网站进行交流学习!分析测试百科网这块做得不错,气相、液相、质谱、光谱、药物分析、化学分析、食品分析.这方面的专家比较多,基本上问题都能得到解答,有问题可去那提问,网址百度搜下就有.

宁安市15666169236: 高效液相色谱 制备只有一个峰 但检测收到的样品纯度时 有两个出峰时间 MS都对怎么回事? -
贺琬馨迪: 有可能是溶剂峰,具体情况得看谱图

宁安市15666169236: 高效液相色谱中老是在同一个时间出一个杂峰,(打任何样品都出在这个时间)是什么原因? -
贺琬馨迪: 先将进样阀,用10%乙腈水冲(除去水溶性物质),再用纯乙腈冲.1、不进任何样品,只进流动相.2、进纯的色谱乙腈或甲醇.3、进么...

宁安市15666169236: 高效液相色谱 - 若高效液相色谱实验中的色谱峰无法分离,应如何改善实验条件?
贺琬馨迪: 要改善的条件很多,介绍几种供参考 1、色谱柱,色谱柱使用时间长了,柱效会降低,会影响到分离度的,改善方法是更换新的色谱柱.如果已经是新的色谱柱了,分离度还不好,那可以采用更长一些的色谱柱,也会增加分离度. 2、流动相的调节,通过调节流动相中各组分的比例,使流动相的极性发生变化,分离效率会不一样,这要针对要检测的成分具体情况进行分析确定. 3、改变柱温,相同条件下升高柱温,会增大色谱柱的分离能力而提高分离度.

宁安市15666169236: waters 2695 - 2489高效液相色谱的日常操作方法及故障维修处理 -
贺琬馨迪: 8 仪器设备的维护和保养 8.1 色谱柱日常维护 8.1.1 长期不使用HPLCا应该将色谱柱从系统拆除ا拆除前应该充分平衡色谱柱ا一般为用甲醇或乙腈冲洗色谱柱40分钟以上. 8.1.2 每次开机时ا流速和柱压要逐渐加强ا突增压会使柱庆受到冲击引起...

宁安市15666169236: 高效液相色谱内标法先出内标物吗 -
贺琬馨迪: 内标和样品哪个先出峰是由成分的极性决定的,以反相色谱法来看,如果内标物的极性大于主成分的极性时,那么内标物先出峰,反之内标物后出峰.

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