为什么色谱中流动相的紫外吸收大于样品的溶剂的紫外吸收就产生倒峰_百...
然而,当流动相的紫外吸收大于样品溶剂时,情况就有所不同了。这类似于在一群高个子的流动相成分中混入了一个矮个子样品成分。由于样品成分的吸收较低,它在紫外检测器上的信号表现为一个向下的峰,即倒峰。这种现象是由于样品成分在流动相中的相对浓度较低,导致其在检测器上的信号被流动相的强吸收所掩盖,从而产生了倒峰。
解释用反相柱测定咖啡因的原理
反相色谱法中流动相的极性大于固定相。反相色谱法中流动相的极性大于固定相,利用各组分的咖啡因在色谱柱中固定相和流动相之间分配系数或吸附系数的差异,将各组分咖啡因分离后进行检测,并根据各组分咖啡因的保留时间和响应值进行定性、定量分析。咖啡因,是一种黄嘌呤生物碱化合物,是一种中枢神经兴奋剂...
液相色谱法什么是固定相什么是流动相
来了解固定相跟流动相的定义:固定相:在色谱分离中固定不动、对样品产生保留的一相。用来分离被测组分的物质,目的是把样品里面的成分留下,固定住;流动相:载体,与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。是将物质带到固定相里并通过固定相的流体,在气相里就是载气,在液相里就是液体。液...
高效液相色谱法与气相色谱法的有哪些异同点
一、流动相不同 液相是液体的,液相多了一个泵用来运转。气相的流动相是载气,是气体。一般情况下,液相色谱中固定相多为固体,流动相多为液体;而气相色谱中载气多为惰性气体(N2、Ar等),从适用范围来看:液相色谱适用最广,可用于化学分析、食品分析、环境分析、药物分析、中草药图谱分析等等,根据...
高效液相色谱法的流动相是怎样的?
高效液相色谱仪的用处:使用高效液相色谱仪时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。高效液相色谱流动相的选择原则:1、色谱醇的...
什么是高效液相色谱法的流动相?
噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值的变化,从而导致分离或分析结果的误差。常用的除气方法有加热沸腾、抽真空、超声波、吹氦等。高效液相色谱(hplc)是色谱的一个重要分支。以液体为流动相,高压输液...
何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点?
正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点。溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团...
在色谱分离实验中为什么极性大的流动相使化合物在固定相中移动的更...
在色谱分离实验中,流动相的极性对化合物在固定相中的移动速度有着显著的影响。这主要是由于色谱分离过程中的吸附作用和溶解作用所导致的。首先,色谱分离是一种基于吸附和溶解差异的分离技术。固定相通常是具有吸附能力的固体颗粒或涂层,而流动相则是携带待分离化合物通过固定相的液体或气体。当流动相流...
采用相HPLL法分离混合时,一般选择的固定相和流动相是什么?组分的出峰顺...
因此,随着流动相中极性溶剂的比例逐渐增加,对固定相上吸附的组分的洗脱能力也逐渐增强,从而使得极性较大的组分先被洗脱下来。此外,离子交换色谱(Ion Exchange Chromatography)也是一种常见的分离方法,主要用于分离带电荷的离子型物质。在离子交换色谱中,固定相是离子交换剂,可以结合或离子化样品中的...
茨维特采用柱色谱法分离植物色谱时的固定相,流动相,样品分别是什么?
流动相(Mobile Phase):茨维特最初使用的流动相通常是石油醚、石油醚和醇的混合物,或甲醇和乙醚的混合物。这些流动相被用来在固定相上移动样品,通过与固定相相互作用来分离植物色素。样品:在茨维特的柱色谱实验中,他使用的样品是植物提取物,其中含有不同种类的色素。这些植物提取物在流动相的作用下...
反相高效液相色谱的固定相是什么,流动相有什么什么
转载:《分析测试百科网》什么叫反相色谱?试从固定相、流动相、流出次序、流动相极性的影响等几个方面比较正相和反相的区别。解:流动相的极性比固定相的极性强的色谱体系叫反相色谱。例如以十八烷基硅胶键合相(ODS)为固定相,以甲酵\/水作流动相,是典型的反相色谱。正相色谱和反相色谱这两种操作模式的...
奚钓痔血: 这么说吧,液相就是一堆的液体流动相,带着少量的液体样品从紫外氘灯前流过. 那么一般情况,流动相的紫外吸收小于样品的时候呢,可以想象,是一帮小矮子,簇拥着一个高个子走过氘灯.那么紫外就可以检出是一个色谱峰了.这些矮子的身高,就是基线.这个高个子和矮个子之间的身高差,就是你的峰高.可以理解吗?反之,如果流动相吸收大狱样品的话,那么就是一堆的高个子里面有个小矮子.紫外检测自然就是倒峰了,因为样品的吸收低,个子矮嘛!
永新县13035974966: 在高效液相色谱法中,请问出现负峰的原因是什么? - ?
奚钓痔血: 有可能是你们的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰 有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰 流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.
永新县13035974966: 高效液相色谱法测定食品中山梨酸,苯甲酸为什么会出现 - ?
奚钓痔血: 出现你说的倒峰就是负峰,有可能是你的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰 有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰 .流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.
永新县13035974966: 液相色谱测试中用示差折光检测器,测试结果为倒峰,请问这是为什么? - ?
奚钓痔血: 流动相的背景吸收高于待测物质造成的.
永新县13035974966: 气相色谱图与液相色谱图有什么区别? - ?
奚钓痔血: 区别两者,应该看看纵坐标的标志,液相的一般为紫外吸收,一般不大于10,而气相的则是电压,一般为几百 所以两者很容易分辨的
永新县13035974966: 液相色谱出现倒峰是怎么回事 - ?
奚钓痔血: 出现倒峰的原因很多,我告诉你从几个地方着手检查. 一:注意信号接收的正负极是否接反了,如果接反了,所有峰都会是倒峰. 二:不进样看看是否有倒峰,如果有可能就是系统问题,是什么检测器,有没有参比池,是不是漏液,是不是有气泡停留在检测池. 三:不进样没倒峰,进样就有倒峰,你还要注意是不是样品本身的特性.例如:紫外检测器是通过紫外吸收对样品进行检测的,如果进样里面的样品没有紫外吸收,而流动相有吸收,则样品出峰的时候,峰值会比基线低,所以出现的曲线是看起来就是负的. 四:色谱柱有没有坏,换一个好的色谱柱看看是不是还有倒峰,如果没有,那说明色谱柱可能损坏了,堵塞之类的,分离效果已经破坏了,这就需要换色谱柱了.
永新县13035974966: 如何根据紫外吸光度确定高效液相吸收波长? - ?
奚钓痔血: zhuiyu_(站内联系TA)先确定一下你的紫外扫描样品浓度是多少.会不会太低.如果浓度比较高还是这样,可以采用别的检测器.比较常用的有蒸发光检测器和示差折光检测器.这两种主要可以检测样品没有紫外吸收的.shelly8059(站内联系...
永新县13035974966: 液相色谱中为什么要确定紫外吸收波长 - ?
奚钓痔血: 因为液相的紫外灯只能检测百单一波长. 比如这张图,这个物质有一个末度端吸收,还有一个260nm的最大吸收.回如果你选择240nm,那么该波长下,此物质没有吸收.所以240nm检测不出该物质. 一般来说,检测有关物质选择末端吸收,200-220nm,检测含量选择最答大吸收.
永新县13035974966: 高效液相色谱中,检测器为紫外检测器, 进样量不同,为什么 峰面积也不同,不应该是和浓度有关么 - ?
奚钓痔血: 你所说的浓度和峰面积成正比的理论前提条件是同等条件下.同等条件就是实验的色谱条件,包括流动相、流速、波长和#进样量.也就是说在注入同等体积的时候,浓度和峰面积才呈正比.假如你有1g的白糖,你配制成100mg/ml的糖水然后喝了10ml,和你配制成1g/ml的糖水喝了1ml.两种情况你吃掉的糖不是一样的量吗?这个进入色谱柱的量算是检出量,可以用峰面积*进样量得出的质量进行计算.你还提到了紫外检测器,我想你可能是混淆了吸收度和峰面积的概念了.
永新县13035974966: 气液相色谱原理? - ?
奚钓痔血: 气相色谱定量分析原理气相色谱法是一种分离分析方法.操作时使用气相色谱仪,被分析样品(气体或液体汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性气体(成为载气或流动相)的带动下进入填充有固定相的色谱柱,在色谱柱中样品被分离成一个个...