何为正相色谱及反相色谱？在应用上有何特点？

何为正相色谱及反相色谱？在应用上有何特点？~

在液-固吸附色谱,，液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱。液-固吸附色谱（固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强，K值越大，保留时间越长）液-液分配色谱（是将固定液涂在担体上作为固定相的，它的分离原理与液液萃取的原理相同，从而服从分配定律。在固定液中溶解度大，K值大，保留时间长）。
正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性；反正色谱是指流动相的极性大于固定相的极性。
对于反相色谱，极性越小的物质，流动相的极性越大，保留时间越长。极性越小的物质，流动相的极性越小，保留时间越短。对于极性大的物质来说，流动相的极性对其保留时间影响较小。而正相色谱正好相反。
因此在应用上正相色谱用于分离极性较大的物质，如蛋白质、生物碱等。反相色谱多用于分离极性较小的物质，在流动相的选择上，反相色谱的优势更大，在实际工作中反相色谱的应用更为广泛

1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。
应用特点：正相色谱一般用来分离中性化合物和离子(或可电离的)化合物，而且以中性样品为主。适于分离样品如下：
①对于反相色谱法很难分离的异构体，可以采用以硅胶为固定相的正相色谱分离分析；
②根据被分离样品极性差别进行族类分离；
③易于水解样品的分离分析；
④分离分析高脂溶性样品，其在极性有机溶剂中溶解度很小；
⑤正相色谱也可以用于异构体分离(包括几何异构体和光学异构体)。
2、流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。
应用特点：反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。

扩展资料
原理：

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。
与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。
溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。
RPC主要应用于相对分子质量低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。
由于反相介质表面为强烈疏水性，并且流动相为低极性的有机溶剂，生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。
参考资料来源：百度百科-正相色谱
参考资料来源：百度百科-反相色谱

正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为吸附剂，表面有活性吸附点。溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。

反相色谱的应用特点：反相介质性能稳定。分离效率高，它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团的物质。

正相色谱法的应用特点：全多孔型的微球型或无定型硅胶，然而，球形硅胶更适合于有效分离。用球形硅胶填充的正相柱具有较好的渗透性、较低的操作压力和较好的稳定性。

扩展资料：

反相色谱中最常用的有机溶剂有甲醇和乙腈。此外，乙醇、四氢呋喃、异丙醇和二氧六环等常用作改性剂。有机溶剂的梯度也会影响分辨率。梯度越小，分辨率越大。

正相色谱的保留机理类似于吸附过程。极性样品分子和溶剂分子吸附在柱填料表面的极性基团（吸附剂）上。对于常用于正相的氰基、氨基或二醇基固定相柱，吸附中心通常为键合配体或硅烷。在使用硅胶时，吸附位点为硅烷醇(一SiOH)。

参考资料来源：百度百科-反相色谱

参考资料来源：百度百科-正相色谱

正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。

反相还是正相，是根据流动相相对于固定相的极性而言的。 流动相极性强于固定相的，称作反相色谱；流动相极性弱于固定相的，称作正相色谱。

反相色谱流动相的极性强，容易带着极性分子走，而留下非极性分子。这主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱都是这种，也有人喜欢说反相液相色谱，其实是一个意思，就是显得博学一点。

正相色谱固定相极性强，容易把极性分子留下，故主要用于极性样品的分离。如离子色谱。

实际应用好像没有太注意正相还是反相，倒是都很注意柱子能承受什么样极性的物质。反相液相色谱柱不可以用强极性的纯水，都是要加入至少5%的有机溶剂来弱化水的极性。 正相的离子色谱柱则坚决不可以进入有机物质。但是气相色谱实际也是一种正相色谱，却往往要求不可以有水进入。

扩展资料

在正相色谱中，样品分子与载体基质的硅醇基团发生特异的极性相互作用，与固定相产生强极性相互作用的极性样品分子比较难被洗脱，在柱内停留比较长的时间，反之，极性较弱或非极性分子与硅胶之间产生相对较弱的相互作用，比较容易被洗脱，因而在柱内停留的时间较短。

正相色谱的保留机理类似于吸附过程。极性样品分子和溶剂分子吸附在柱填料表面的极性基团上。对于正相中经常选用的氰基、氨基或二醇基固定相柱，吸附位点通常为键合相配体或硅烷醇。

参考资料来源：百度百科——正相色谱

参考资料来源：百度百科——反相色谱

正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。

根据流动相和固定相相对极性不同，液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。

扩展资料：

一、正相色谱原理

正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。

这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术，因为正相色谱以吸附效应作为分离的基础，所以也称为吸附色谱。

在正相色谱中，样品分子与载体基质的硅醇基团发生特异的极性相互作用，与固定相产生强极性相互作用的极性样品分子比较难被洗脱，在柱内停留比较长的时间。

反之，极性较弱或非极性分子与硅胶之间产生相对较弱的相互作用，比较容易被洗脱，因而在柱内停留的时间较短。因此，正相色谱可以根据溶剂极性差别而达到分离的目的。

二、反相色谱原理

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。

与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。

溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。

RPC主要应用于相对分子质量低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。

由于反相介质表面为强烈疏水性，并且流动相为低极性的有机溶剂，生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。

参考资料来源：百度百科－正相色谱

参考资料来源：百度百科－反相色谱

在液-固吸附色谱,，液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱。液-固吸附色谱（固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强，K值越大，保留时间越长）液-液分配色谱（是将固定液涂在担体上作为固定相的，它的分离原理与液液萃取的原理相同，从而服从分配定律。在固定液中溶解度大，K值大，保留时间长）。
正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性；反正色谱是指流动相的极性大于固定相的极性。
对于反相色谱，极性越小的物质，流动相的极性越大，保留时间越长。极性越小的物质，流动相的极性越小，保留时间越短。对于极性大的物质来说，流动相的极性对其保留时间影响较小。而正相色谱正好相反。
因此在应用上正相色谱用于分离极性较大的物质，如蛋白质、生物碱等。反相色谱多用于分离极性较小的物质，在流动相的选择上，反相色谱的优势更大，在实际工作中反相色谱的应用更为广泛

在液-固吸附色谱,，液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱。液-固吸附色谱（固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强，K值越大，保留时间越长）液-液分配色谱（是将固定液涂在担体上作为固定相的，它的分离原理与液液萃取的原理相同，从而服从分配定律。在固定液中溶解度大，K值大，保留时间长）。
正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性；反正色谱是指流动相的极性大于固定相的极性。
对于反相色谱，极性越小的物质，流动相的极性越大，保留时间越长。极性越小的物质，流动相的极性越小，保留时间越短。对于极性大的物质来说，流动相的极性对其保留时间影响较小。而正相色谱正好相反。
因此在应用上正相色谱用于分离极性较大的物质，如蛋白质、生物碱等。反相色谱多用于分离极性较小的物质，在流动相的选择上，反相色谱的优势更大，在实际工作中反相色谱的应用更为广泛

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洪洞县18725599282： 何谓正相色谱和反相色谱?在应用上有什么特点 - ？
左丘党力久：[答案] 反相还是正相,是根据流动相相对于固定相的极性而言的.流动相极性强于固定相的,称作反相色谱;流动相极性弱于固定相的,称作正相色谱. 反相色谱流动相的极性强,容易带着极性分子走,而留下非极性分子.这主要用于非极性样品的分离.常用...

洪洞县18725599282： 何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点? - ？
左丘党力久： 正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱.其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点.溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心.反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱. 反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定.分离效率高,它能分离蛋白质、...

洪洞县18725599282： 何谓正相色谱及反相色谱?在应用上有什么特点 - ？
左丘党力久： 正反相的概念其实可以用极性大小来描述,流动相的极性比固定相(色谱柱)强的即为反相,流动相的极性比固定相弱的为正相.

洪洞县18725599282： 什么是正相色谱,什么是反向色谱? - ？
左丘党力久：[答案] 液-液色谱有正相和反相之分.如果采用极性固定相和相对非极性流动相,就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相,则称为反相.由于极性化合物更容易被极性固定相所保留,所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物.相反,反...

洪洞县18725599282： 什么是正相色谱,什么是反相色谱 - ？
左丘党力久： 什么是正相色谱,什么是反相色谱? 液相色谱有正相和反相之分.正相色谱和反相色谱还有吸附色谱和极性化学键键合色谱之分. 如果采用固定相的极性大于流动相的极性,就称为正相色谱; 如果固定相的极性小于流动相的极性,则称为反相色谱.

洪洞县18725599282： 什么是正相色谱法和反相色谱法?它们分别适宜分离何种极性的物质? ？
左丘党力久： 正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性;反正色谱是指流动相的极性大于固定相的极性.对于反相色谱,极性越小的物质,流动相的极性越大,保留时间越长.极性越小的物质,流动相的极性越小,保留时间越短.对于极性大的物质来说,流动相的极性对其保留时间影响较小.而正相色谱正好相反.因此在应用上正相色谱用于分离极性较大的物质,如蛋白质、生物碱等.反相色谱多用于分离极性较小的物质,在流动相的选择上,反相色谱的优势更大,在实际工作中反相色谱的应用更为广泛

洪洞县18725599282： 正相分配色谱和反相分配色谱的概念及其应用范围是怎样的? ？
左丘党力久： 在正相分配色谱法中,流动相的极性小于固定相极性.常用的固定相有氰基或氨基键合相,在中药有效成分研究中主要用于分离极性及中等极性的分子型物质. 在反相分配色谱法中,流动相的极性大于固定相极性.常用的固定相有十八烷基硅烷(ODS)或C8键合相.流动相常用甲醇-水或乙腈-水.主要用于分离非极性及中等极性的各类分子型化合物.

洪洞县18725599282： 何谓反相液相色谱?何谓正相液相色谱?分别试用于分析什么样的样品? - ？
左丘党力久： 液-液色谱有正相和反相之分.如果采用极性固定相和相对非极性流动相,就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相,则称为反相.由于极性化合物更容易被极性固定相所保留,所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物.相反,反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物.正相色谱的流出顺序是极性小的先流出,极性大的后流出;反相色谱的流出顺序正好相反. 另外,其他有些色谱如柱色谱也有正反相之分.

洪洞县18725599282： 什么是正相分配色谱和反相分配色谱? ？
左丘党力久： 反相色谱主要是以水等极性物质作为流动相,按相似相容原理,出峰先后是从极性强的到极性弱的;而正相色谱的流动相大多为非极性物质,出峰先后则是从弱极性的到强极性的.