he染色的具体步骤及原理
he染色的具体步骤如下:
样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。
原理:
苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。
注意事项:
1、染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
2、切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚晰而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。
3、切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。
名词简介:
苏木精—伊红染色法,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛技术方法。
结果的判断:
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
什么是革兰氏染色法?染色过程应注意什么
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰氏(HansChristianJoachimGram,1853-1938)创立。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。注意事项:1.选用活跃生长期菌种染色,老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性...
活性染料染色过程
活性染料染色机理活性染料的染色机理包括下列基本过程: 1、吸着(吸色):纤维人染液中吸取染料并向纤维内部扩散。 2、固着(固色):染料与纤维发生化学反应,生成共价键结合。 3、水洗:未固着的染料从纤维上洗去。 染色时,活性染料首先溶解于水,染料和水分子同时进入纤维内部,并被纤维吸着。染液...
革兰染色叙述错误的是
【答案】:B 革兰染色法 革兰染色法是常用的一种细菌染色法。1.染色步骤 (1)初染第一液初染剂(结晶紫)染色1min,水洗。(2)媒染第二液媒染剂(碘液)染色1min,水洗。(3)脱色第二液脱色剂(95%乙醇)用到无紫色脱落为止,水洗。(4)复染第四液复染剂(石碳酸或沙黄)染色30s,...
属于革兰氏染色法正确的步骤是()
【答案】:【】A 【答案解析】革兰氏染色法的步骤:细菌玻片涂片经结晶紫初染→碘液媒染→95%乙醇脱色→复红复染。凡未被95%乙醇脱色,菌体被结晶紫和复红染成紫色者为革兰氏阳性菌,而经乙醇脱色后,被复红染成红色者为革兰氏阴性菌。
病理图片:HE染色时颜色不一,如何调整成统一颜色?
关键是分化、漂洗、复染这几步: ... 13、分化 就是将细胞质着的色褪去,使细胞核着色更加鲜明,也称分色。将切片放入1%盐酸乙醇液(盐酸1份+70%乙醇100份)中褪色,见切片变红,颜色较浅即可,约数秒至数十秒钟。这一步骤是H.E.染色成败的关键,,如分化不当会导致染色不匀,或深或浅,得到...
E花环实验的操作方法
1% SRBC及0.05 ml灭活小牛血清,混匀。3.37℃静置5分钟,500 rpm低速离心5min后,放入冰箱,2小时或过夜。4.取出试管,吸弃上清液,加0.8%戊二醛溶液1 滴,轻轻旋转混匀,置4℃冰箱固定15分钟。5.取出后,轻轻旋转试管,使沉淀细胞重新悬浮;取1滴涂片,自然干燥后,瑞氏染色,高倍下观察。
h-e 染色是啥?
微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附,且吸附作用稳固;同样,碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性...
【HE染色法】高尔基体 滑面内质网 溶酶体这些有膜结构都是嗜酸性的...
不是的。高尔基体是嗜碱性,溶酶体是嗜酸性,滑面内质网多胞质呈无色、淡染、空泡状,例如类固醇分泌细胞。含DNA、RNA较多的细胞器一般呈嗜碱性染色,如核糖体、粗面内质网、高尔基复合体,所以蛋白质分泌细胞多呈嗜碱性染色,例如成纤维细胞和浆细胞。嗜酸性的细胞中含溶酶体和线粒体多胞质呈嗜酸性,...
如何保证革兰氏染色实验结果的可靠
染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后,应吸去玻片上的残水,以免染色液被稀释而影响染色效果。选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h,E.coli培养24h。若菌龄太老,由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。脱色时间不要过长。革兰氏染色步骤:(1)涂片:涂片方法与简单染色涂片相同。(2)...
小白鼠H&E染色不会分析,求教
正常情况下H.E.就可以了。脂肪被溶解掉了,看到的就是大泡和小泡。如果要敏感性高的话,需要用Oil-Red-O染色,其实比HE更简单,我们都是在冰冻片上直接染的。脂肪被染成橙黄色,比HE看的清楚。如果你的实验打算发表文章的话,应该先查找相 ...
毕狡强压: he染色是什么HE染色是一种组织病理的染色方法,通过这个染色可能明确的区分出组织以及细胞的结构,才可能在显微镜下观察组织以及细胞的形态.这在病理诊断中是最常用的染色方法,通过染色可以让人体的组织在显微镜下显示得更清楚...
鸡冠区17876546229: he染色的基本原理是什么?嗜酸性?嗜碱性? - ?
毕狡强压: he染色易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia). 在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细...
鸡冠区17876546229: 有关HE染色 - ?
毕狡强压: 苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 .苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分...
鸡冠区17876546229: 都说HE染色法最常用的,谁能给我具体讲讲... - ?
毕狡强压: HE 染色法为苏木精-伊红染色法,是石蜡切片技术里常用的染色法之一,也是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基础、最广泛的技术方法.属性为碱性的苏木素染色液可以使细胞着蓝色,为酸性的伊红使细胞着红色,其结果胞核呈蓝色,胞浆呈红色.两种不同的染色液使细胞通过颜色来改变折光率,在光镜下呈现出细胞图像.HE染色法之所以成为细胞染色最常用的方法是因为HE染色法过程中除化学反应外,还有物理作用中吸附、吸收效果,使HE染色提供良好的核浆对比染色效果.
鸡冠区17876546229: HE染色是什么染色方法? - ?
毕狡强压: 苏木精(Hematoxylin、He),亦名苏木紫或苏木素,用于细胞核的染色.HE染色法是组织学与病理学常用的切片染色方法,HE染色切片标本是学生观察最多的一种切片标本.HE 10X 是说:你的组织切片是用HE染色法做的,是在10倍的光学显微镜下观察所见的结果
鸡冠区17876546229: HE染色是什么染色方法? - ?
毕狡强压:[答案] 苏木精 — 伊红染色.苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 .
鸡冠区17876546229: H - E染色什么原理? - ?
毕狡强压: 细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料苏木素亲和力较强,而细胞浆则相反,它含有碱性物质与酸性染料伊红亲和力较大.因此,组织切片经HE染色后,细胞核被染成蓝色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等染成不同程度的红色,红细胞则呈橙红色.
鸡冠区17876546229: 革兰氏染色法 he染色法 姬姆萨染色法 银染色法的机理可以举一些的例子来加以说明, - ?
毕狡强压:[答案] 初染剂结晶紫进行初染,再用碘液媒染,然后用乙醇(或丙酮)脱色,最后用复染剂(如番红)复染.经此方法染色后,细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌;如果细胞中初染剂被脱色剂洗脱而使细菌染上复染剂的颜色(红色),该菌属于革...
鸡冠区17876546229: 什么是HE染色?什么是TTC染色? - ?
毕狡强压: HE染色是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法. TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞,用来表示细胞的活力.配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损...
鸡冠区17876546229: he染色时,分化用哪种试剂?如何操作? - ?
毕狡强压: 常规he染色步骤 (1)二甲苯(Ⅰ) 15min (2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min (3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min (4)100%乙醇(Ⅰ) 5min (5)100%乙醇(Ⅱ) 5 min (6)80%乙醇 5min (7)蒸馏水 5 min (8)苏木精液染色 5 min (9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s (10) 1%盐...