RNA提取原理
RNA提取原理用Trizol的溶液提取，将总RNA与DNA和蛋白质分离。Trizol是一种酸性溶液，含有硫氰酸胍(GITC)、苯酚和氯仿。GITC不可逆地使蛋白质和RNase变性。随后进行离心。在酸性条件下，总RNA保留在上层水相中，而大部分DNA和蛋白质保留在中间相或下层有机相中。然后通过用异丙醇沉淀回收总RNA。RNase酶可以通过加入吡咯碳酸二乙酯(DEPC)来灭活。
RNA提取时，加氯仿后分三层：水相(含rna,可能还有少量DNA），中间白色薄层（应该是蛋白和DNA），下层有机相（氯仿和蛋白等）
氯仿是分子量比较大的有机溶剂，在提取RNA时，氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。DNA提取过程有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和DNA脱离，DNA进入水相。但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离，否则DNA会释放到水相。不管有酚也好，没有酚也好，氯仿本身也对蛋白有变性作用，剧烈的震荡，很容易使得DNA的亲水基团，与水相接触。所以不要剧烈震荡。
异丙醇的作用是通过-OH的疏水作用使得RNA或者DNA链中的亲水基团受到保护，等同于沉淀，但是这是个反应时发生在水相中，与前面的氯仿不矛盾。
细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA，像是组成剪接体的snRNA，负责rRNA成型的snoRNA，以及参与RNAi作用的miRNA与siRNA等，可调节基因表达。而其他如I、II型内含子、RNaseP、HDV、核糖体RNA等等都有催化生化反应过程的活性，即具有酶的活性，这类RNA被称为核酶。
在各种生物活动中，RNA起着至关重要的作用。脱氧核糖没有2‘-OH.RNA的2‘-OH中的O（氧原子）可以在氢氧根（水）和氢结合的时候靠近3’碳原子下面的磷酸基团形成包含5个共价键的P（5个P-O）。
RNA和DNA属于核酸，加上脂质、蛋白质和碳水化合物。核糖的2位碳上连有羟基为RNA的一个重要结构特点。这类羟基使得RNA双链的结构应与A型构象最接近，不过，在单链的某些二核苷酸环境下，也有极小的可能形成DNA最常见的B型螺旋构象。
怎样提取DNA
②分子量大，一般比细菌的大2—3个数量级，比病毒的大4—5个数量。对不同生物材料，要根据具体情况选择适当的分离提取方法。3.DNA提取的几种方法 (1).浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,...
红细胞DNA提取的原理是什么?每步加的试剂都有哪些作用?
原理：（DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol\\L时，DNA溶解度最低。利用这一原理，可以使DNA析出！DNA不溶于酒精，细胞中某些物质易溶于酒精，可以得到纯度较高的DNA。DNA在沸水浴遇二苯胺变蓝。）作用：（1）柠檬酸钠是防止血液凝固，（2）...
煮沸法提取病毒dna的原理
这种原理是通过煮沸进行细胞的裂解。根据中国化学网显示，利用核酸溶解于水的性质，将组织细胞破碎后，用低盐溶液除去，然后将沉淀溶于水中，使dna充分溶解于水中，离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M，加入2倍体积95%乙醇，立即用搅拌法搅出，然后分别用66%到80%和95%乙醇以及丙铜洗涤...
植物DNA提取的原理和方法是什么?
原理就是去掉植物细胞壁 细胞膜 质体 线粒体 叶绿体 剩下细胞核了。就是DNA了。通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨，...
液氮研磨组织提取dna原理
使细胞膜破裂。液氮研磨组织提取dna主要是将新鲜的叶片在液氮中研磨，以机械力破碎细胞壁，然后加入十六烷三甲基-溴化铵分离缓冲液，使细胞膜破裂，才能提取到dna。这是一种快速简便提取植物总DNA的方法，也是实验中常用的方法。
生物实验中提取不同物种的基因组DNA的实验原理是什么?
提取不同物种的基因组DNA的实验原理 不同物种的DNA提取方法 摘要 DNA作为遗传微粒，为生物体的遗传信息复制和传递做出了巨大的贡献，而1953年J.Watson和F.Crick提出的双螺旋结构模型不仅解释了有关DNA的性质，而且也清楚地解释了DNA的各种生物功能，进而使DNA的研究进入到了分子水平。然而DNA是如何具体在...
人血提取基因组1.基本原理是什么?2.步骤及试剂是什么
血中DNA的提取血液中DNA提取的原理：如果以外周血为DNA提取材料,在外周血中提取DNA就是从有核的白细胞中提取DNA.因此,从外周血中提取DNA包括以下几个关键步骤：第一,破坏红细胞,通常利用红细胞与白细胞膜结构的差异,先使红细胞裂解,经离心后收集白细胞；第二,白细胞裂使膜蛋白和核蛋白变性,游离DNA,...
CTAB法提取DNA的原理,要详细些
CTAB法原理 CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵)，是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol\/L NaCl)，CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提，去除蛋白，多糖，酚类等杂质后加入...
DNA和RNA提取原理是什么?还有相关试剂盒的原理,各步的作用~~
TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍\/酚法、酚\/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\\DNA\\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中。取出水相用异丙醇沉淀可...
磁珠法提取基因组DNA的原理是什么?
(a)磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂，可使动植物的细胞裂解，并使与DNA结合的蛋白质变性，DNA游离释放，磁球可以特异地吸附DNA，通过洗涤，去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质，再因洗脱液解离吸附在磁珠上的DNA，得到纯度和浓度均很高的DNA，可用于PCR扩增、酶切、分子杂交等。(b)生物磁珠是一种...
莱泡五羚：[答案] 分子克隆技术(华农) 实验一 质粒的制备 质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用.质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术. 质粒的提取方法很多,大多包括3个主要步骤:细菌的培养、细菌...
和政县13780969666： RNA提取的原理 - ？
莱泡五羚： TRIZOL裂解细胞 氯仿萃取 异丙醇沉淀 酒精清洗
和政县13780969666： DNA和RNA提取原理是什么?还有相关试剂盒的原理,各步的作用~ - ？
莱泡五羚：[答案] TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的...
和政县13780969666： 脂肪细胞RNA提取原理 - ？
莱泡五羚： 氯仿是分子量比较大的有机溶剂,在提取RNA时,氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离.DNA提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合,从而使得蛋白和DNA脱离,DNA进入水相.但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离,否则...
和政县13780969666： 提RNA过程中是根据什么原理除DNA的 - ？
莱泡五羚： 蛋白质在有机溶剂中变性所以形成沉淀,中间那白色的是变性的蛋白质.我们做过提取DNA的实验,用的是饱和酚提取的,后来又用了氯仿的.DNA、RNA很容易被分解,特别是RNA,RNA酶到处都有,我们在做DNA提取时用到EDTA抑制DNA酶的活性,防止被降解.分层不是看分子的大小的,看它在离心力的作用下运动的快慢,一般密度大的运动的快一些在下面.下层有机相中有一些脂类
和政县13780969666： 怎么提取RNA? - ？
莱泡五羚： 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~
和政县13780969666： 怎样从总RNA中提取mRNA?原理是什么? - ？
莱泡五羚： 大多数真核细胞mRNA的3'端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理.具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用. 磁珠法一般...
和政县13780969666： RNA提取和定量测定的原理和方法 - ？
莱泡五羚： 动物细胞的RNA提取一般使用Trizol,你可以到网上找它的使用说明测定的方法的话可以有: 紫外分光光度计:通过测定OD260、280和230来检测RNA是否被杂质污染 琼脂糖凝胶电泳:检测RNA是否发生降解 RT-PCR:将其反转录成cDNA,通过荧光定量PCR检测各mRNA的表达量
和政县13780969666： 怎么提RNA - ？
莱泡五羚： 核糖核酸(缩写为RNA,即Ribonucleic Acid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体.由至少几十个核糖核苷酸通过磷酸二酯键连接而成的一类核酸,因含核糖而得名,简称RNA.RNA普遍存在于动物、植物、微生物及某些病毒和噬菌体内.RNA和蛋白质生物合成有密切的关系.在RNA病毒和噬菌体内,RNA是遗传信息的载体.RNA一般是单链线形分子;也有双链的如呼肠孤病毒RNA;环状单链的如类病毒RNA;1983年还发现了有支链的RNA分子.
和政县13780969666： 培养细胞如何提取mRNA,如何逆转录?培养细胞提取mRNA的原理是什么?如何用所提取的mRNA进行逆转录? - ？
莱泡五羚：[答案] 1 细胞总RNA的提取 1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂(Gibco公司) 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁). 2)、将各孔内消化好的细胞裂解液...
