蛋白质浓度测定的标准曲线图
标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量
一、 标准曲线
一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。
二、 蛋白质含量测定方法
1、 凯氏定氮法
2、 双缩脲法
3、 Folin-酚试剂法
4、 紫外吸收法
5、 考马斯亮蓝法
三、 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作
（一）、试剂：
1、 考马斯亮蓝试剂：
考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。
2、 标准蛋白质溶液：
纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。
（二）、器材：
1、722S型分光光度计使用及原理（）。
2、移液管使用（）。
（三）、标准曲线制作：
试管编号 0 1 2 3 4 5 6
100ug/ml标准蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4
考马斯亮蓝试剂 （ml） 5 5 5 5 5 5 5
摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色
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永急劳菲： 如果需要在Excel中建立,那么选择数据区域,在“插入”选项下的 “图表”中,选择“折线图”或“散点图”. 如果在曲线坐标纸上完成,将对应的浓度及测定结果绘制在坐标纸上,然后连线.
信丰县18649577254： 考马斯亮蓝测定蛋白的标准曲线绘制 - ？
永急劳菲： 1.分光光度计预热下会准些2.是否调0\100,3.用紫外的试试看 楼主可曾换一台分光光度计试试,有些仪器时间长了不准的
信丰县18649577254： 急!!!怎样用标准曲线测蛋白质浓度?？
永急劳菲： 标准曲线一般都是有这样的关系式:y=aX+b或者是y=aX-b,只要你将测得是x代进去就可以了.或者有另外一个方法定量法,A表/C表=A样/C测,A为吸光度,求C测只要你将数据代进去就可以了!!!如果还不清楚的话,请将数据上传
信丰县18649577254： 用吸光度计算样品蛋白质浓度 未知标准曲线怎样画 - ？
永急劳菲： 标准曲线就是用已知含量的蛋白质溶液测定吸光度,然后作图得到的曲线.
信丰县18649577254： 如何测定蛋白浓度 - ？
永急劳菲： 常用紫外分光光度法测定蛋白质含量. 以下引用: 6种方法测定蛋白质含量 一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法 样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液...
信丰县18649577254： 用紫外吸收法测定蛋白质浓度,在波长280nm时的标准曲线斜率大概是多少,浓度为横轴,吸光度为纵轴. - ？
永急劳菲：[答案] 那要看你的标准蛋白质溶液浓度是多少,标准曲线就是根据由标准液浓度梯度作出来的.
信丰县18649577254： 标准蛋白质曲线怎么画 - ？
永急劳菲： 用excel画吧. 横坐标是蛋白浓度,纵坐标是吸光度,用散点图. 图表 出来后,点右键,添加趋势线.
信丰县18649577254： 福林酚试剂法测定蛋白质含量的方法? - ？
永急劳菲： 原理:蛋白质与福林酚试剂反应,生成深蓝色复合物.蓝色的深浅与蛋白质含量成正比.可用分光光度计于500nm波长下进行测定.与标准曲线对照,而确定蛋白质含量. 操作方法:1、标准曲线的制作:分别吸取0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml标准溶...
信丰县18649577254： 测定蛋白质含量 - ？
永急劳菲： 用已知的标准蛋白一般(牛血清白蛋白BSA)绘制标准曲线,蛋白样品加上蛋白测定试剂,5分钟内测定OD595值,根据标准曲线确定蛋白含量.蛋白测定试剂:考马斯亮蓝G250 100mg95%乙醇50ml85%磷酸100ml 加水至1000ml.过滤,4度保存.
