如何选购trizol?
作者&投稿:通武 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
离心机默认离心能力用rpm表示。而一般trizol的说明书对离心的要求用rcf表示。
rpm(revolution per minute)为离心机每分钟的转数(单位:周/分钟);
RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以地心引力即重力加速度的倍数来表示,一般用×g表示。
r为离心机转子半径(单位:米)。
两者转换关系如下:
rcf=0.0011×r×rpm^2
rpm=(909×rcf÷r)^0.5
以eppendorf centrifuge 5810r,F45-30-11转子为例. max rpm=1400r/min, r=9.5cm.trizol说明书要求抽提RNA时rcf=12000×g.
则所需rpm=(12000×909÷0.095)^0.5=10715r/min.
如何选购trizol?
离心机默认离心能力用rpm表示。而一般trizol的说明书对离心的要求用rcf表示。rpm(revolution per minute)为离心机每分钟的转数(单位:周\/分钟);RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以地心引力即重力加速度的倍数来表示,一般用×g表示。r为离心机转子半径(单位:米)。两者转换关系如下:rcf=0.001...
宥彩新帅: 提取总RNA的方法现在主要的就是用商用试剂盒,还有就是用传统的酚氯仿,trizol提取,一般trizol提取的质量相对比较好,但是操作起来比较麻烦,全程冰上操作,包括离心,这要看你们实验室有没有相应的试剂或仪器了,如果用商用试剂盒的话,通常是针对比较特殊的要求的样本的,比如石蜡样本,植物样本等,你需要根据你的样本类型选择不同的试剂.
永新区13367478123: 怎样用TRIzol 法提取动物血清总RNA - ?
宥彩新帅: 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管...
永新区13367478123: TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? - ?
宥彩新帅: 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...
永新区13367478123: 如何选购椰子? - ?
宥彩新帅: 第一、在选择椰子前,一定要明确挑选椰子的目的,根据不同的目的,选择不同种类的椰子. 椰子根据表面颜色的不同,海南当地人将椰子分为青椰子和黄椰子两种(海南岛外有人把黄椰子称为金椰子).这两种椰子的口感和用途不太一样....
永新区13367478123: trizol法提取血中的RNA,怎样做量会更多?
宥彩新帅: 1 血要新鲜.如果是冻存的,在解冻时要完全,之后再加Trizol. 2 可以稍多加一些Trizol,少加些血.混匀之后放置10分钟左右,直接加三氯甲烷,混匀再去离心. 可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷. 3 每个步骤操作要快,用的时间药短些,防止降解 4 异丙醇沉淀的时候,放-20°C的冰箱半个小时,或再适当延长一点时间.迅速离心,之后加75%乙醇.只洗一遍,洗2遍易损失部分RNA. 5 不要过分干燥,管内稍有点残余的乙醇也没关系.干燥一会就迅速加DEPC水少量.一般我都加的30.如果需要浓度高点可以少加水. 6 提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存. RNA直接冻存会降解.也会影响以后反转的效率.
永新区13367478123: 新手如何购买死飞,死飞自行车 - ?
宥彩新帅: 首先新手前期肯定是要练手的,不用入手太高端的,买个差不多的练练,第一辆车基本就是用来摔的,当然纯为了好看资金不宽裕也可以考虑入手千元以内的.当然这种最好不要上路,如果非要上路的话建议选个一千以上的,在往上就是自己组装了,基本三千起步上不封顶 尤其注意的是不要被人忽悠,多看多问. 实在还不明白迷茫的话建议你看看这篇文章的详细介绍 ☆:姜壄壅教你选死飞
永新区13367478123: 用trizol提取rna时,为什么dna不会溶解在水相 - ?
宥彩新帅: 提取RNA时如何去除DNA的污染的方法: 注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有 问题.发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度 离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体...
永新区13367478123: 如何挑选边境牧羊犬??
宥彩新帅: 优秀的狗,性格必须是温顺、忠实、胆大、勇敢、驯服、心理状态稳定.你可以 用以下方法去挑选一条好性格的爱狗: 1.当母狗和幼犬在一起时,应选择那些表现安稳、勇敢、对新事物新环境既不疑惧又感兴趣的幼犬.淘汰那些惊疑不安、懦...
永新区13367478123: trizol法提取RNA时如何去除基因组DNA 在哪一步加NDA消化酶 - ?
宥彩新帅: 在trizol里加入三氯甲烷震荡离心后,取上头的水层,只要水层取得干净,没有沾染下头的东西,一般就不会有DNA污染,提取出来蛮干净的.
永新区13367478123: trizol提取rna异丙醇之后看不到沉淀怎么回事 - ?
宥彩新帅: 这时的沉淀就是RNA了.可能的原因如下. 1.作为原料的细胞数量太少. 2.细胞裂解的时候不充分,严重影响产量 3.离心出来的沉淀很少很少,肉眼不容易分辨. 你可以从这几个角度去找找原因.