APC的APC基因突变检测方法
APC基因突变类型主要有点突变和框架移码突变,前者包括无义突变,错位突变和拼接错误,后者包括缺失和插入. APC基因突变有300多种,这些突变遍及整个基因，60%以上的突变位于第15号外显子的5′端. 其中密码子第1286～1513号之间的10%左右的编码区集中了约65%的体细胞突变,被称为突变密集区(MCR). 大部分突变属于错位突变，由缺失或1~8个碱基对的插入引起. 大约95%的突变结果是在下游形成提前的终止密码子,使APC蛋白呈截短改变，这可能削弱了APC蛋白固有的抑制细胞增殖功能，从而导致APC蛋白功能的障碍；Jarvinena等[1]认为这些APC截短蛋白可以结合于野生型APC蛋白，并对野生型蛋白具有显性负效应, 使之失活而导致肿瘤发生. 现国内外关于APC基因突变的研究很多，不同的报道所选择的研究目的基因也大都不相同，但大部分以研究15号外显子突变为主. Miyaki等[2]报道日本人在MCR以密码子1260~1453段突变率最高；国内王艳等[3]报道在1339~1436密码子区域突变率最高,1260~1359密码子区域突变率最低；而高枫等[4]将1337~1453段分为两段，分别设计引物扩增，也证实了上述说法.
APC 蛋白与 β连环蛋白 （ beta-catenin ） ( 一种转录transcription 因子 ) 形成复合物，导致β连环蛋白降解。如果缺乏 APC 蛋白，过多的β连环蛋白就会在 细胞核 （nucleus） 内的聚集。β连环蛋白与细胞核内的另一种蛋白结合 , 形成一种复合物；这种复合物又与 DNA结合，启动了几种 基因 （genes） 的转录。这种复合物中的一个靶基因叫做 c-myc 一种已知的 癌基因。 C-myc 本身就是几种基因的转录因子 （transcription factor）， 它控制着细胞的生长和分裂。因此，APC 基因的突变导致了一系列的连锁反应，最终导致细胞分裂的加速。研究显示, 对缺乏APC 蛋白的结肠癌细胞添加APC 蛋白质有减退肿瘤细胞成长功能。成长的减退是由于细胞自动死亡增加的结果, 可见 APC 有控制细胞死亡并且成长的功能. 所以, APC基因的损失对细胞成长与细胞死亡之间的平衡有一定的影响。 APC基因控制细胞数量。
通过检测APC基因突变,可筛选出FAP家族成员高危患者,也可用于评估结直肠癌的疗效和预后,所以检测APC基因变化对预防、早期诊断及早期治疗结直肠癌具有重大意义[13]. 检测APC基因突变的方法报道较多,大致分为3类.
第1类,直接序列分析,PCRSSCP法. 检测APC基因高度多态性DNA标记,不必对整个庞大的APC基因所有外显子进行检测[14]. 应用微卫星多态性标记进行LOH分析是目前抑癌基因定位和等位基因丢失研究中最经常采用的方法. APC基因等位丢失亦常出现在散发性结直肠癌中,LOH发生率为35%～45%[15]. 此类方法适合于较小片段基因(100～500 bp)突变的检测,对APC基因需分成40个相互重叠的片段来检测,费时,费力.
第2类,包括异源脱氧核糖核酸分子(DNA)分析法(Hdxa)和错配化学清除/羟胺锇酸酐(CCM/HOT)等. 一次可检测较大片段的DNA,减少受检片段,如CCM/HOT法使之降到25个片段. 然而,仍要对外显子进行突变检测,需较大片段的序列分析来确定,对APC基因检测也非简便的方法.
第3类,是针对基因突变产生终止密码而表达不全蛋白质(截短蛋白质)来设计的. 如体外合成蛋白质试验(IVSP法)和蓝/白选择试验,可以检测大片段的DNA或RNA,又能选择性发现产生终止密码的突变,与蓝/白选择试验不同的是,IVSP法还可根据不全蛋白大小来确定突变的位点. 通过对APC基因进行体外合成蛋白质及等位基因特异性表达的测定,可以更有效地检测到不能被PCRSSCP法所检测到的APC基因突变. 总之，由于APC基因突变与FAP早期发生密切相关，且FAP具有较高的遗传倾向，这种疾病如果不加治疗，其恶变率几乎达到100%，所以对APC基因的定位及其功能的研究对于FAP的早期诊断和治疗显得尤为迫切和重要[16]. 如果说最初APC基因的发现为FAP的分子诊断学提供了理论基础，现APC基因的研究进展正使针对这种疾病的分子诊断方法成为可能. 相信通过对APC基因的进一步研究，不仅会有更实用的基因检测诊断方法问世，而且可能得到针对肿瘤发生机制的特异性基因治疗方法
APC启动子有两个区，1A和1B。启动子1A区最为活跃。APC启动子高甲基化也可能是导致结直肠癌的原因。有研究表明APC启动子1A区在结直肠癌中高甲基化，二在腺瘤中不甲基化。APC启动子高甲基化抑制了APC的转录。据报道APC的1A启动子区高甲基化也发生在胃肠癌症中，比如食管癌，胃癌，胰腺癌，肝癌，结直肠癌。
什么是遗传性癌症?
家族性甲状腺癌综合征：这是由RET基因突变引起的遗传性甲状腺癌，可导致多个家庭成员出现甲状腺癌。家族性黑色素瘤：这是由CDKN2A和CDK4基因突变引起的遗传性黑色素瘤，可导致多个家庭成员患上黑色素瘤。腺瘤家族综合征：这是由APC基因突变引起的遗传性多发性息肉腺瘤，并容易发展成结肠癌。需要注意的是，...
肿瘤基因有突变是什么意思
肿瘤基因突变可以分为许多类型。有些突变使基因失去正常功能，有些突变则可能使基因获得新的功能。此外，不同癌症的肿瘤基因突变也存在着差异。例如，乳腺癌中常见的BRCA1、BRCA2基因突变与结直肠癌中的APC基因突变存在差异。科学家通过对肿瘤基因突变进行分类，可以更好地了解肿瘤的特点，有助于制定更针对...
著名抑癌基因TP53的突变和药物
第二种基因是抑癌基因,如TP53、BRAC1或BRAC2、PTEN、RB1和APC等,它们负责调控肿瘤细胞的增殖,就像是汽车的刹车一样。需要注意的是抑癌基因的突变是比较随机的,基因的任何位置、不管发生任何形式的突变,只要这个突变导致该基因失去功能,或者功能降低,都可能影响到肿瘤的发生。这就导致针对某个抑癌基因开发直接的靶向...
千兆基因组定序完成 癌症研究重大里程碑
同时调查并记录家族成员的基因，发现 APC （adenomatous polyposis coli） 基因 1B 启动子（promoter）的点突变（point mutation）对于胃癌有关键的影响，APC 基因是一种肿瘤抑制基因（tumour suppressor gene）过去已知 APC 基因与家族性大肠瘜肉症（familial adenomatous polyposis），这是引起结肠癌（colon ...
胃镜检查中常见的胃息肉病
其中1，2条中符合之一即可。基因检测显示APC基因胚系突变。建议该家系患者从20岁其进行结肠镜检查及基因检测。存在基因突变患者应行全结直肠切除回肠贮袋肛管吻合术。图1 FAP患者胃肠道内多发的息肉性病变 MUTYH相关性息肉病诊断标准：仍未明确，但临床观察到结肠数十枚息肉（10-99枚），病理类型为腺瘤或...
什么是专职APC?
专职APC是指一类特化的细胞，它们具有摄入，加工，处理，提呈胞外抗原，激活CD4+T细胞，诱导免疫应答的能力。这类细胞必须表达MHC-Ⅱ类分子，协同刺激信号分子和各种粘附分子。专职APC包括单核-巨噬细胞，树突状细胞，内皮细胞和B细胞。树突状细胞（DC）机体功能最强的专职抗原递呈细胞，它能高效地摄取、...
抗癌基因有哪些
将抑癌基因导入到缺乏该基因的恶性肿瘤细胞中，观察时候有相应的表现。那么，抑癌基因有什么类型呢?下面我们来具体了解抑癌基因的相关知识。抑癌基因的分类。目前已经鉴定的抑癌基因有一百多种，比较常见的抑癌基因有Rb、P53、APC、nm23等。Rb基因也叫做视网膜母细胞瘤基因，是第一个被发现的抑癌基因。
研究一个抑癌基因的功能需要做哪些试验,系统点的
抑癌基因的产物主要包括:①转录调节因子,如Rb、p53;②负调控转录因子,如WT;③周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CKI),如p15、p16、p21;④信号通路的抑制因子,如ras GTP酶活化蛋白(NF-1),磷脂酶(PTEN);⑥DNA修复因子,如BRCA1、BRCA2。⑥与发育和干细胞增殖相关的信号途径组分,如:APC、Axin等。编辑本段抑癌基因失...
遗传癌症是怎么回事
遗传癌症通常是由一些特定的遗传突变引起的。例如，BRCA1和BRCA2基因的突变是导致乳腺癌和卵巢癌的主要遗传因素之一。其他一些基因突变也与癌症有关，例如p53、APC、MLH1等。这些遗传突变可以是家族遗传的，也可以是自然发生的。如果一个人携带了这些突变，那么他们患某些癌症的风险会明显增加。但是，即使...
主要的抑癌基因有哪两种,其作用方式是什么?
根据是否有突变，分为突变型和野生型两种。根据作用器官不同，分为广谱性和特异性。根据功能分类，分为：①细胞信号转导和表观遗传学调控，如APC参与信号转导，NFl催化RNAs失活等。②细胞周期负调控，如Rb、p53、CDKN2A基因参与细胞周期调节。③负调控转录因子，如WT、DCC等基因。④与发育和干细胞增生...
赖话朗依： 被检测的DNA碱基顺序依次读出800bp以上,sanger测序是一代所有测序和新一代所有测序的金标准,即:目前所有基因检测的国际金标准,是包括荧光定量PCR Taqman探针法、普通PCR法、芯片法、二代测序法、质谱法等方法的金标准. ...
东营区13091765739： FAP患者的筛检是什么? ？
赖话朗依： 临床上曾经对FAP患者自青春期开始采用硬式直肠乙状结肠镜检查寻找直肠乙状结肠... 自发的FAP患者体细胞可能会直接检测到APC基因突变,眼底镜观察有无先天性视网...
东营区13091765739： APC和TP53基因突变会危及生命吗 - ？
赖话朗依： APC 蛋白与 β连环蛋白 ( beta-catenin ) ( 一种转录transcription 因子 ) 形成复合物,导致β连环蛋白降解.如果缺乏 APC 蛋白,过多的β连环蛋白就会在 细胞核 (nucleus) 内的聚集.β连环蛋白与细胞核内的另一种蛋白结合 , 形成一种复...
东营区13091765739： (2012?佛山二模)如图表示某种抗原递呈细胞(APC)在免疫调节中的作用,据图回答:(1)该种APC能表达TL - ？
赖话朗依： (1)由题意可知,TLR存在能激活小鼠的免疫反应,若TLR不存在,小鼠就不能探测到细菌的存在,所以TLR在免疫中具有识别作用,若TLR蛋白过多,免疫系统会攻击人体正常细胞,引发自身免疫疾病. (2)分析题图可知,受病原体刺激后,...
东营区13091765739： 做癌症易感基因检测的步骤有哪些 - ？
赖话朗依： 有三步:1、样本采集.2、完成基因检测并出具检测报告.3、机构将检测报告发送给受检者,由机构的专业人员对报告进行解读.肿瘤有遗传倾向,肿瘤遗传史人群,建议做个肿瘤易感基因检测来预防下,可去中源协和基因看看.
东营区13091765739： 健康基因检测 什么意思 - ？
赖话朗依： 就是检测健康人群的基因型,预测个人患病的风险,并向受检者提出生活上的指导,避免疾病的发生.现代医学认为:疾病是由于先天的基因禀性和后天的外在因素共同作用的结果.几乎所有疾病的发生都与基因有关,在某些情况下基因发生了...
东营区13091765739： 发现某个基因突变位点后,如何检测其对基因功能的影响? - ？
赖话朗依： 方法很多 如果这个基因表达蛋白的结构被解析出来的话 可以根据解析出的结构 分析突变是否在蛋白重要的功能位点 实验方法 克隆得到这个基因, 做定点突变得到你需要的突变基因 在细胞中表达 看蛋白在细胞定位有无变化 做coIP看和蛋白相互作用的蛋白有无变化 如果蛋白是个酶的话 看突变前后催化活性的变化 总之,看具体蛋白制定实验 最后最好做一个转基因的小鼠 把突变的基因转到小鼠中 看突变体和野生型的小鼠的不同
