枯草芽孢杆菌培养基的配制方法？

、枯草芽孢杆菌的富集培养基怎么配制~

生物实验：蛋白胨20g牛肉膏15g酵母膏15g琼脂7g 溶解 灭菌 做斜面 接种

培养基：1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂，或牛肉膏蛋白胨配方(1000ml)加10g的葡萄糖。
ph为7即可，温度30度到37度皆可——条件不是很苛刻，比较容易培养。
我个人觉得培养基的成分有所改变不会影响其性状，毕竟是广泛分布于自然界的菌种嘛。要想大量培养，如果从经济方面考虑还可以用些便宜点的原料。

枯草芽孢杆菌常用培养基配方：

1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂

枯草芽孢杆菌原生质体的制备

1 培养枯草芽孢杆菌
取亲本菌株T4412、TT2 新鲜斜面分别接一环到装有液体完全培养基(CM)的试管中，36℃振荡培养14 h，各取1 mL 菌液转接入装有20 mL 液体完全培养基的250 mL 锥形瓶中，36℃振荡培养 3 h，使细胞生长进入对数前期，各加入25 u/mL 青霉素，使其终浓度为0.3 u/mL，继续振荡培养2 h。

2. 收集细胞
各取菌液10 mL，4000 r/min 离心10 min，弃上清液，将菌体悬浮于磷酸缓冲液中，离心。如此洗涤两次，将菌体悬浮10 mL SMM 中，每mL 约含108～109 活菌为宜。

3. 总菌数测定
各取菌液0.5 mL，用生理盐水稀释，取10-5、10-6、10-7 各1mL(每稀释度作两个平板)、倾注完全培养基，36℃培养24 h 后计数。此为未经酶处理的总菌数。

4. 脱壁
二株亲本菌株各取5 mL 菌悬液，加入5 mL 溶菌酶溶液，溶菌酶浓度为100 ug/mL，混匀后于36℃水浴保温处理30 min，定时取样，镜检观察原生质体形成情况，当95%以上细胞变成球状原生质体时，用4000 r/min 离心10 min，弃上清液，用高渗缓冲液洗涤除酶，然后将原生质体悬浮于5 mL 高渗缓冲液中。立即进行剩余菌数的测定。

5. 剩余菌数测定
取0.5 mL 上述原生质体悬液，用无菌水稀释，使原生质体裂解死亡，取10-2、10-3、10-4 稀释液各0.1 mL，涂布于完全培养基平板上，36℃培养24～48 h，生长出的菌落应是未被酶裂解的剩余细胞。
计算酶处理后剩余细胞数，并分别计算二亲株的原生质体形成率。原生质体形成率＝未经酶处理的总菌数一酶处理后剩余细胞数。

蛋白胨 10g/L
酵母粉 5g/L
氯化钠 10g/L

配制固体培养基视琼脂粉的效果加 6g~16g

生物实验：蛋白胨20g牛肉膏15g酵母膏15g琼脂7g 溶解 灭菌 做斜面 接种

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金沙县13753667738： 枯草芽孢杆菌培养基的配制方法? - ？
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金沙县13753667738： 枯草芽孢杆菌的培养流程,步骤 - ？
靳封欣粒： 培养基:1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂,或牛肉膏蛋白胨配方(1000ml)加10g的葡萄糖. ph为7即可,温度30度到37度皆可——条件不是很苛刻,比较容易培养. 我个人觉得培养基的成分有所改变不会影响其性状,毕竟是广泛分布于自然界的菌种嘛.要想大量培养,如果从经济方面考虑还可以用些便宜点的原料.

金沙县13753667738： 枯草芽孢杆菌复苏用什么组分的培养基 - ？
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靳封欣粒： 生物实验:蛋白胨20g牛肉膏15g酵母膏15g琼脂7g 溶解 灭菌 做斜面 接种

金沙县13753667738： 简述配制培养基应遵循的几个原则? - ？
靳封欣粒： 1.目的明确 培养不同的微生物必须采用不同的培养条件;培养目的不同,原料的选择和配比不同;例如枯草芽孢杆菌: 一般培养:肉汤培养基或LB培养基; 自然转化:基础培养基; 观察芽孢:生孢子培养基; 产蛋白酶:以玉米粉、黄豆饼粉...

金沙县13753667738： 枯草芽孢杆菌用什么液体培养基才能获得菌体? - ？
靳封欣粒： 枯草芽孢杆菌在进行液体培养的时候本来就应该得到浑浊的菌液啊,菌液离心一下取沉淀就可以得到菌体了.像一些丝状微生物在振荡培养的时候,因为菌丝缠绕在一起所以能看到明显的菌丝球,枯草芽孢杆菌是看不到的,只要不染菌,菌液浑浊是很正常的

金沙县13753667738： 怎样获得枯草芽孢杆菌的芽孢悬液 - ？
靳封欣粒： 采用专门用于产孢的液体培养基ICPM,具体培养基配方网上搜的到,在摇床里培养至95%以上为芽孢时停止培养,此时需要镜检,将摇瓶里面的发酵液离心弃上清,离心的沉淀用PBS缓冲液洗涤3次并离心以洗去培养基等杂质,最后用PBS缓冲液使之悬浮即可.如果需杀灭营养体,可在80摄氏度水浴锅里面水浴15 min或60摄氏度水浴30 min即可.

金沙县13753667738： 寻采用不同比例的淀粉的发酵液培养枯草芽孢杆菌进行发酵最佳工艺 - ？
靳封欣粒： 实验菌种 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtillis)1.210;D53、D56:从活性污泥中分离得到.培养基的配制 斜面培养基(营养琼脂):蛋白胨1%,NaC1 0.5 D/0,牛肉膏0.3%,琼脂2%.液体营养肉汤培养基:蛋白胨1%,NaC1 0.5%,牛肉膏...

金沙县13753667738： 大肠杆菌培养基制备,要具体的步骤,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌呢? - ？
靳封欣粒：[答案] 平板计数琼脂(plate count agar,PCA)培养基 成分 胰蛋白胨 5.0 g 酵母浸膏 2.5 g 葡萄糖 1.0 g 琼 脂 15.0 g 蒸馏水 1000 mL 加热溶解 调配好后 高压蒸汽灭菌即可使用了

金沙县13753667738： 枯草芽孢杆菌怎么在实验室培养 - ？
靳封欣粒： 营养琼脂培养基平板培养或试管培养,只要有种源就行.很简单呵. 下图是培养后的样子,比较绉.