高效液相色谱仪常用哪几种固定相?

作者&投稿:登菁 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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在高效液相色谱(HPLC)中,使用的固定相和流动相的选择取决于待分离物质的性质、分析时间、检测波长等。以下是一些常见的固定相和流动相的选择:

  • 正相色谱(Normal Phase Chromatography):在正相色谱中,固定相是非极性或弱极性的物质,如硅胶、C8或C18反相色谱柱等。流动相是极性溶剂,如水、甲醇、乙腈等。正相色谱常用于分离脂溶性物质,如脂肪酸、胆固醇、烃类化合物等。

  • 反相色谱(Reversed Phase Chromatography):在反相色谱中,固定相是极性或强极性的物质,如C8或C18硅胶色谱柱。流动相是非极性溶剂,如己烷、庚烷等。反相色谱适用于分离水溶性物质,如肽类、蛋白质、氨基酸等。

在选择固定相和流动相时,还需考虑溶剂的pH值、离子强度等因素。最佳的固定相和流动相组合应该是根据实际需要和样品性质来选择的。

组分的出峰顺序主要取决于样品中各组分与固定相和流动相的相互作用。一般来说,极性较小的组分会比极性较大的组分更快地从固定相上洗脱下来。同时,如果样品中存在多个不同极性的组分,它们的出峰顺序将按照极性从小到大的顺序依次洗脱。

然而,在反相色谱中,出峰顺序则是从极性最大的组分开始,逐渐过渡到极性较小的组分。这是因为反相色谱的固定相是极性的,能够吸附极性较大的组分,而流动相是非极性的,对所有组分都有一定的洗脱能力。因此,随着流动相中极性溶剂的比例逐渐增加,对固定相上吸附的组分的洗脱能力也逐渐增强,从而使得极性较大的组分先被洗脱下来。

此外,离子交换色谱(Ion Exchange Chromatography)也是一种常见的分离方法,主要用于分离带电荷的离子型物质。在离子交换色谱中,固定相是离子交换剂,可以结合或离子化样品中的特定离子,而流动相则是用于将离子从固定相上洗脱下来的溶剂。离子交换色谱的出峰顺序主要取决于样品中各离子与固定相的相互作用,以及流动相的性质和浓度。

总之,在采用HPLC进行分离时,应根据样品的性质和需要选择合适的固定相和流动相组合。对于不同的分离目标,还可以采用不同类型的色谱柱、改变流动相的组成或pH值、添加离子对试剂等方法来优化分离效果。




高效液相色谱常用哪些检测器
4,蒸发光散射检测器。蒸发光散射检测器(EvaporativeLight-scatteringDetector)是通用型检测器,可以检测没有紫外吸收的有机物质,如人参皂苷、黄芪甲苷等。5,荧光检测器。荧光检测器(Fluorescence Detector,简称FLD)是高压液相色谱仪常用的一种检测器。用紫外线照射色谱馏分,当试样组分具有荧光性能时,即可...

高效液相色谱仪常用的检测器是
正确答案:D 解析:紫外检测器是高效液相色谱仪最常用的检测器,其灵敏度、重复性及线性范围均较好,由于对温度和流速不敏感,适用于进行梯度洗脱 。

高效液相色谱仪包括哪五个系统?
2、进样系统;进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。3、分离系统;色谱柱:对样品进行分离,是整个色谱系统的心脏,它的质量优劣直接影响到分离的效果。4、检测系统;检测器:将色谱柱连续流出的样品组分转变成易于测量的电信...

高效液相色谱常用哪些检测器
最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可...

高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种,有什么区别吗?
紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,...

在高效液相色谱仪中常用的检测器有哪几种试述其应用特点?
检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等

你了解液相色谱的检测器吗?
高效液相色谱仪(HPLC)由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。其中,检测器是HPLC的关键部分,负责将色谱柱中流出的样品组分转化为易于测量的电信号,进而被数据系统接收,生成样品分离的色谱图。常用的检测器包括紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。下面我们将详细介绍液相色谱...

高效液相色谱仪可以测定哪些物质
高效液相色谱仪只能测定易溶于甲醇、水、乙腈等溶剂的物质。高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作...

液相色谱仪的洗脱方式有哪两种?
使用高效液相色谱仪进行分析时,常用两种洗脱方式,一种为等度洗脱,另一种为梯度洗脱。用等度洗脱进行色谱分离时,由不同溶剂构成的流动相的组成,如流动相的极性、离子强度、pH值等,在分离的全过程中皆保持不变。用梯度洗脱进行色谱分离时,在洗脱过程中含2种或两种以上不同极性溶剂的流动相组成会连...

高效液相色谱仪主要包括哪几个部分
高效液相色谱仪般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统和数据处理与记录系统组成,具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分。其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求...

钟山区17713381531: 高效液相色谱中固定相分类?最常用的是哪类? -
元儿天麻: 高效液相色谱中固定相分类?最常用的是哪类 高效液相色谱中固定相可分为正向色谱和反向色谱 1 正相色谱法 采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相) 流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷) 常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间 常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等) 2 反相色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8) 流动相为水或缓冲液 常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间 适用于分离非极性和极性较弱的化合物 RPC在现代液相色谱中应用最为广泛 据统计,它占整个HPLC应用的80%左右

钟山区17713381531: 高效液相色谱法正相色谱常用的固定相是什么? -
元儿天麻:[答案] 反相固定相:C18、C8 正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合 流动相:甲醇、乙腈、水. 很高兴为你解答,希望对你有所帮助,

钟山区17713381531: 高效液相色谱法中常用的固定相和流动相 -
元儿天麻:[答案] 反相固定相:C18、C8 正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合 流动相:甲醇、乙腈、水

钟山区17713381531: 反相高效液相色谱法常用的化学键和固定相有哪些?(列举出三个) -
元儿天麻:[答案] 常用的固定相就是C8,C18,氨基与腈基,苯基等.有涂敷和键合两种方式.

钟山区17713381531: 高效液相色谱法的主要类型有哪些 -
元儿天麻: 高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法. 1、液-固色谱法(液-固吸附色谱法) 固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的. ①液-固色谱法的作用机制 吸附剂:一些多...

钟山区17713381531: 反相液相色谱法固定相和流动相通常为哪类物质 -
元儿天麻:[答案] 反相色谱:流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱. 常用的固定相:氰基、苯基、C8、C18等 常用的流动相:有机相为乙腈,甲醇,四氢呋喃,水相为超纯水.调节ph值一般酸有磷酸,三氟乙酸,乙酸,三乙胺,磷酸盐(钾盐和钠盐),乙...

钟山区17713381531: 什么物质用反相高效液相色谱分析 -
元儿天麻: 反相高效液相色谱一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间.适用于分离非极性和极性较弱的化合物.RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右.

钟山区17713381531: 什么是HPLC色谱? -
元儿天麻: 常用的HPLC色谱柱多为硅胶基质填料的,又分正相色谱柱和反相色谱柱两大类.其它填料的色谱柱还有聚合物填料的和无机填料的,应用较少,我也了解不多,在此不加描述了. 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶以及其他具有极性...

钟山区17713381531: 高效液相色谱固定相选择原则是什么 -
元儿天麻: 色谱固定相的选择是个很复杂的事情,涉及到色谱固定相的键合相性质、基质的形状(球形、无定形);基质的表面积,基质的孔径,基质的金属杂质含量,是否封尾等因素,一言难尽,你可以上“色谱世界”网站看看,这个网站在色谱方面非常专业,对你会有很大的帮助. 高效液相色谱中C18的使用基本占到整个色谱固定相70%左右.所以大多数情况下选择C18色谱柱.

钟山区17713381531: 色谱为什么叫做"色"谱? -
元儿天麻: 色谱法用于分离和提纯对固定相吸附力不同的物质.在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相 ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相.柱色谱为向玻璃管中填入固定相,以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液,...

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