微生物大肠杆菌检测,详述方法步骤,重点解释其中的单料,双料是什么意思以及最终的结果报告.
微生物大肠杆菌检测,在国标GB/T 4789.3-2003,GB/T 4789.3-2008,即国标03版与08版都有详细介绍,但两个版本现均作废,改用强制执行的2010版。
其中,这里强调的单料,双料,是对应与三个版本中均提到的“初发酵”时的接种量,当样品稀释液接种量为1ml或少于1ml时使用单料管,接种量大于1ml时使用双料管(详见2010版 6.2)。单料就是按照标准附录的培养基成分表正常配制出来的培养基,双料即是除水和PH值不变外,其余成分加倍。如果你买现成的固体培养基,更方便,按说明书配制,双料只要干粉重量加倍即可。
结果报告。查阅MPN表格,先列出你初发酵时3个连续稀释度的阳性管管数,例如:我选用的10的负一次、10的负二次。10的负三次 三个稀释度,即三个稀释度相当与含有原样0.1g, 0.01g,0.001g,三个稀释度分别有阳性管数为1,1,0,对应MPN表格查出这个样品大肠菌群最有可能数为7.4cfu/g,95%可信限下限为1.3cfu/g,下限为20cfu/g,填写报告即可。
附带三个版本的国标下载连接给楼主,无需注册。提醒楼主,2010版现为强制性标准,一定要按此标进行准检测工作。
03版: http://down.foodmate.net/standard/sort/3/7627.html
08版: http://down.foodmate.net/standard/sort/3/17550.html
2010版: http://down.foodmate.net/standard/sort/3/21702.html
多管发酵法。
多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法,这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h,而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶,从而释放出荧光产物,进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。
在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵,分离培养试验,利用伊红美蓝培养皿分离,接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵,最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高,成本低,但是检测时间较长,容易受其他条件干扰,进而影响到测定结果的精确度。
扩展资料:
注意事项:
1、检样时注意无菌操作。
2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水,接种时可采用九管法,设置三个梯度,分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一个稀释度的试管应充分混匀。
3、每次实验需要有阴性对照。
4、使用小倒管培养基配制时,为排净气泡,灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧,灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、
5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0,取出培养基放到冰箱冷却,效果会比较好。
参考资料来源:百度百科-大肠杆菌测试片
参考资料来源:百度百科-大肠杆菌
食品卫生微生物学检验大肠杆菌计数中文标准名称
食品卫生微生物学检验中,大肠杆菌计数的标准中文名称是"食品卫生微生物学检验 - 大肠杆菌的计数检测"。这个标准于2008年11月21日首次发布,正式实施日期为2009年3月1日,目前仍为现行状态。标准的发布编号是20079896-T-361,但未提及被代替的国标号和废止时间。标准的国际采纳情况是采用国际标准号,但具...
大肠杆菌的检测方法有哪些?
1、细菌总数:检测每毫升或每克样品中所含细菌数,采用倾注培养计算。中国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。2、大肠菌数指数:指每立升中大肠菌群数,采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群;瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。三、...
高中生物如何检测自己酿葡萄酒中大肠杆菌
1、首先用伊红美蓝培养基,菌落呈黑色。2、其次取成熟前15天的紫皮中等颗粒的葡萄750克。3、最后挑出烂葡萄,摘除蒂,用洗净的手充分捏碎葡萄,装入清洁的非金属容器加盖即可。
微生物检测-大肠杆菌
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。1 设备和材料 1.1 温箱:36±1℃。1....
大肠杆菌生化实验判定标准
生化鉴定常用三糖铁琼脂(TSIA)和KIA\/MIU(AA+-\/++-)和IMVC(++--)来初步鉴定。最后鉴定依据全面生化反应,典型的大肠埃希菌的基本生化反应特征:TSIA(双糖铁)产酸\/产气,产气、CIT(枸橼酸盐)阴性、URE(脲酶)阴性、IDN(吲哚)阳性、MOT(动力)+\/-、ORN(鸟氨酸)+\/-。
大肠杆菌检测方法国标是用什么方法检测的
大肠菌数指数:指每立升中大肠菌群数,采用乳糖发酵法检测。中国卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群,瓶装汽水和果汁中每100ml大肠菌群不能超过5个。3、全自动微生物定量分析仪(TEMPO)检测法 全自动微生物定量分析(TEMPO)仪大肠杆菌群计数检测有TEMPOTC和TEMPOCC两种方法。TEMPOTC的开发是...
食品抽检中发酵型产品要检测大肠杆菌吗?
是的,食品抽检中发酵型产品通常需要检测大肠杆菌。大肠杆菌是一种常见的肠道细菌,可能存在于发酵食品中,尤其是那些卫生条件较差或发酵时间较长的食品。检测大肠杆菌可以评估食品卫生质量和潜在的健康风险,以确保食品安全和消费者的健康。因此,食品抽检中通常会对发酵型产品进行大肠杆菌检测。美正生物的大肠...
检测食品中大肠杆菌是什么样子的?
大肠菌群(Coliforms)是一群在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌,其主要检测意义在于反映食品卫生状况并推测其存在肠道致病菌的可能性。常以大肠菌群作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。第一法:进入无菌操作室前应更换...
大肠杆菌生物实验有什么启发
已知有97%分离出的大肠杆菌(Escherichia coli)产生葡萄糖苷酸酶,此酶能使葡萄糖苷酸-4-甲基伞形花烯(MUG)分解而生成荧光性甲基伞形花酮,可用作快速检测。Thompson(1990)的快速法可于2Omin内完成。将应试大肠杆菌(Escherichia coli)培养于哥伦比亚琼脂基础(Oxoid,含5%的绵羊血),在36℃孵育18-24h。
微生物检测包括哪些啊?
食品中微生物指标的常见检验项目如下:菌落总数、大肠菌群计数、大肠杆菌计数、肠道致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌)、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、双岐杆菌、空肠弯曲菌、霉菌计数和酵母计数。一般食品中活菌数达到108cfu.g⁻¹时,则可认为食品处于初期腐败阶段。
爱石贝儿:[答案] (1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,这些实验仪器都需要经过灭菌处理,与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进... (4)无菌操作下将90ml无菌水加入到10ml待测水样中,这样就将待测水样稀释了10倍;根据大肠杆菌鉴定的原理可知,黑...
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 如何检验生活用品上的大肠杆菌? - ?
爱石贝儿: 操作步骤 3.1 检样稀释 3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液.固体检样最好用均质器,以8 000-...
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 大肠杆菌检测方法 - ?
爱石贝儿: 运用伊红-美蓝鉴别培养基.在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别是否存在大肠杆菌:如果有大肠杆菌,其代谢产物(有机酸)就会与伊红和美蓝结合,使菌落出现深紫色,并带有金属光泽.
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 怎么检验饮料中的大肠杆菌?? - ?
爱石贝儿: 样品制备:以无菌操作取25 g样品,放入装有225 mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000 r/min均质1~2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替).稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成...
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 菌落记数 分析 - ?
爱石贝儿:[答案] 一、菌落总数的测定菌落总数:食品和药品经过处理,所得 1mL(或 1g)检样在一定条件下培养,检测到的细菌菌落的总数.菌落总数可以用为判断食品及药品被污染程度的标志,同时为被检样品提供卫生学标准.细菌菌落一般都采用平板记数法来测...
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 求食品微生物检验,菌落总数及大肠杆菌测定所需工具,程序,步骤,方法.谢谢. - ?
爱石贝儿: 1mL(g)X3 0.1mL(g)X3 0.01mL(g)X3 100mL(g) 下 限 上 限 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 3 <30 30 60 90 <5 90 0 0 0 0 1 1 1 1 0 1 2 3 30 60 90 120 <5 130 0 0 0 0 2 2 2 2 0 1 2 3 60 90 120 1600 0 0 0 3 3 3 3 0 1 2 3 90 130 160 190 1 1 1 1 0 0 0 0 0 1 2 3 ...
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 大肠杆菌菌落总数的检验程序是什么?过程越详细越好 - ?
爱石贝儿: 大肠菌群用平板计数法:称取25g样品溶解于225ml生理盐水中,混匀,溶化的琼脂(采购结晶紫中性红琼脂按照试剂说明操作),凝固后再覆盖一层(3ml左右),菌落
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 大肠杆菌的检测与培养 - ?
爱石贝儿: 希望以下资料能对你有所帮助 药敏试验 试验目的:因为细菌极易产生耐药性,为防止盲目用药减少成本,通过本试验筛选出细菌的高敏药物,从而指导临床用药.试验原理:通过抑菌圈的大小来判断细菌对药物的敏感度,抑菌圈越大说明细菌...
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 食品中的大肠杆菌的检测方法 - ?
爱石贝儿: 培养基配置 检样、稀释 乳糖胆盐发酵管观察:(36摄氏度24小时) 3.1不产气 大肠杆菌阴性 3.2产气伊红美蓝琼脂倒平板 3.2.1G染色,G阳性,说明大肠杆菌阴性 3.2.2乳糖发酵管(36摄氏度24小时),同样不产气,大肠杆菌阴性
黔西南布依族苗族自治州19246781401: 抹布 细菌(菌落总数、大肠杆菌)检测方法 - ?
爱石贝儿: 细菌稀释度检测,