凯氏定氮法测定蛋白质的原理是什么?
凯氏定氮法优点:可用于所有食品的蛋白质分析中;缺点:最终测定的是总有机氮;精度差;所用试剂有腐蚀性。
凯氏定氮法注意事项:
1、样品应是均匀的,固体样品应预先研细混匀,液体样品应振摇或搅拌均匀。
2、样品放入定氮瓶内时,不要沾附颈上,万一沾附可用少量水冲下,以免被检样消化不完全,结果偏低。
3、硝化时如不容易呈透明溶液,可将定氮瓶放冷后,慢慢加入百分之三十过氧化氢2到3毫升,促使氧化。
4、在整个消化过程中,不要用强火。保持和缓的沸腾,使火力集中在凯氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下,使氮有损失。
5、蒸馏完毕后,应先将接受瓶液面离开冷凝管下端,并放在其下方,冷凝液清洗管口内壁,再蒸1min后关掉热源,否则会造成吸收液倒吸。
凯氏定氮法简介:
1、是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的,现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等,是分析有机化合物含氮量的常用方法。
2、凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右。因此,通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量。假设测定物质中的氮全来自蛋白质,即:蛋白质含量=含氮量/16%。
3、凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
4、即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。
凯氏定氮法测定蛋白质含量中消化完了溶液呈什么颜色
蓝绿色,等从消化炉上取下后不一会就变成无色。凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法,即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,在碱性条件下将铵盐转化为氨;随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量,由于蛋白质...
凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理是什么?
三种试剂分别如下:在凯氏定氮法测定蛋白质含量实验中,消化阶段所用的试剂有浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜。其中加浓硫酸主要是消化,即是通过加热使硫酸将食物中的有机氮转化成无机氮。加硫酸钾与硫酸铜主要是祈祷催化剂的作用用于加快消化的反应速率。采用凯氏定氮法的注意事项:样品应是均匀的。固体样品应...
蛋白质含量的测定方法有哪些
蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。1、微量凯氏定氮法:含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。2、双缩...
蛋白质含量测定
多采用凯氏定氮法,检测的是粗蛋白,原理是检测其中的氮含量,因为氮含量在真蛋白中大约是百分之6左右,所以,检测出氮含量后,乘以6、25就是粗蛋白含量了。 缺点是把非蛋白中的氮也算进去了,三聚氰胺是非蛋白氮,用凯氏定氮法检测时,也把它算进去了。
凯氏定氮法测定蛋白质,蒸馏液加入过量的氢氧化钠后呈?色
绿色 因为所用混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈红色.如果没有溴甲酚绿,可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液.
国家标准检测蛋白质含量测定方法
蛋白质含量测定方法就是检测N元素的含量,像三聚氰胺的问题,就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的。国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法,食物中的蛋白质在催化加热条件下分解,导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫,硼酸吸收,用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸耗计算氮含量...
凯氏定氮法测定蛋白质时,样品经强热和浓硫酸的作用消化生成( ),与硫...
凯氏定氮法测定蛋白质时,样品经强热和浓硫酸的作用消化生成NH3。在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的...
检测食品中蛋白质含量的原理和方法是什么?
基于食品中蛋白质含量与食品中氮含量的比例关系换算的。如乳中蛋白质与氮含量的比值为6.38,大豆中蛋白质与氮含量的比值为5.71,普通食品中蛋白质与氮含量的比值为6.25。因此是通过测定食品中氮含量后再根据换算系数得到食品中蛋白质含量。二、蛋白质的检测方法:1、凯氏定氮法:样品在高温浓硫酸的...
怎么测定蛋白质的含量?
①凯氏定氮法 原理:蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。②双缩脲法 原理:尿素在180℃下脱氨生成双缩脲,在碱性溶液中双缩脲可与...
蛋白质的测定中,最常用的分析方法是( ),它是将蛋白质消化,测定其总含氮...
凯氏定氮法的局限性 1、对样品的前处理要求较高 在进行凯氏定氮法测定之前,需要对样品进行前处理,如酶解、酸水解等,以释放出其中的氮元素。然而,这些前处理步骤对样品的要求较高,如果处理不当,可能会影响测定结果的准确性。2、对某些特殊蛋白质的测定效果不佳 凯氏定氮法对于某些特殊蛋白质的...
长兴忠川贝:[答案] 凯氏定氮法 蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍 【GB/T 5009.5—1985】 食品中蛋白质的测定方法 本标准适用于各类食品中蛋白质的测定. 1 原理 蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨...
淮北市17011128550: 凯氏定氮法是蛋白质经典测定法,其原理是通过测出样品中氮的含量而求出蛋白质的含量.氮在蛋白质中的平均含量为16%;奶粉中蛋白质含量的国家标准为:... - ?
长兴忠川贝:[答案] (1)国家标准为每奶粉中含蛋白质不少于18.5g,氮在蛋白质中平均含量16%,则合格奶粉中氮的含量为 18.5g*16% 100g*100%=2.96%; 现测定一袋该类奶粉中氮的含量为2%,2%<2.96%,故该奶粉不符合国家标准. (2)盐酸中溶质的质量为:21.4g...
淮北市17011128550: 蛋白质的测定原理 - ?
长兴忠川贝: 蛋白质中含有碳氢氧氮硫磷等多种元素,而蛋白质中只有氮元素的含量基本是恒定的,大致占到百分之十六到百分之十九之间,如果能测定蛋白质中氮元素的含量,就可以推算出蛋白质的含量.
淮北市17011128550: 凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量的原理和基本操作方法是什么?如题. - ?
长兴忠川贝:[答案] 原理:有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵.硫酸铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的总氮量.、试剂与材料:浓硫酸...
淮北市17011128550: “凯氏定氮法”测得奶粉中蛋白质含量是由丹麦人约翰•凯达尔发现的.其原理是用强酸处理蛋白质样品,让样品中的氮元素释放出来,通过测得氮的含量,... - ?
长兴忠川贝:[答案] (1)蛋白质中的氮元素不容易测定,从测量步骤可知样品处理目的是把蛋白质中氮元素转化为NH4+; 故答案为:将奶粉中氮元素全部转变为NH4+; (2)铵根离子与氢氧根离子反应生成氨气,则碱化蒸馏时反应的离子方程式为:NH4++OH- △ . NH3↑+H2...
淮北市17011128550: 测定蛋白质含量的方法 缺点 - ?
长兴忠川贝:[答案] ①凯氏定氮法 原理:蛋白质平均含氮量为16%.当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量. ②双缩脲法 原...
淮北市17011128550: 一般测定蛋白质含量时都用含氧量乘以6.25,这一数值是如何得来的?为什么? - ?
长兴忠川贝:[答案] 是含氮量乘以6.25! 因为蛋白质的平均含氮量是16%,这是凯氏定氮法的基本原理.请百度一下“凯氏定氮法”. 16%是大量统计的结果,是平均值.所以,反过来,就是用含氮量乘以100/16,即6.25
淮北市17011128550: 凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗? - ?
长兴忠川贝: 可以.凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法.即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品...
淮北市17011128550: (2009•滨湖区一模)蛋白质是一种含氮的有机高分子化合物.现代食品工业普遍采用一种叫做“凯氏定氮法”的方法来测定蛋白质的含量.测定原理为:把蛋白... - ?
长兴忠川贝:[答案] 答:(2)(NH4)2SO4可以与NaOH反应,化学方程式为:(NH4)2SO4+2NaOH=Na2SO4+2NH3↑+H2O, 盐:电离时... 0.175 1*100%=17.5% 因为此方法是让蛋白质中的N原素释放出来,通过测定氮元素的质量从而换算出蛋白质的含量.可见该...