聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理是什么？
聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide
gel
electropHoresis,
PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质。在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中，凝胶的制作是分层进行的，因此凝胶不仅有分子筛效应，还具有浓缩效应。和琼脂糖凝胶相比，聚丙烯酰胺凝胶难于制备和处理。它们的分离范围较窄。但是它们也有突出的优点，由于是不连续的pH
梯度，故样品被压缩成一条狭窄的区带，因而增强了分离效果，提高电泳分辨率。尤其对小DNA
片段的分析(5～500bp)。在这一范围内，仅差1bp
的DNA
分子也能清晰地分开。其次，DNA
纯度很高。从聚丙烯酰胺凝胶中得到的DNA
纯度很高以致于下步操作不用任何处理。还有，它的负载容量高。该胶的标准加样槽中可以加入高达10mL
的DNA
样品，而不影响电泳分辨率。多应用于分离纯化和鉴定大小为5～500bp
的DNA
片段。聚丙烯酰胺凝胶电泳有连续与不连续体系两种，前者指在整个电泳体系中的缓冲液pH
值和凝胶孔径大小相同，主要用于核酸分析。后者主要用于蛋白质样品的分离，它除了电泳槽中的缓冲体系和pH
值与凝胶中不同外，凝胶本身也由缓冲体系、pH
值和凝胶孔径不同的两种凝胶堆积而成。
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http://product.bio1000.com/100250/
聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质。在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中，凝胶的制作是分层进行的，因此凝胶不仅有分子筛效应，还具有浓缩效应。和琼脂糖凝胶相比，聚丙烯酰胺凝胶难于制备和处理。它们的分离范围较窄。但是它们也有突出的优点，由于是不连续的pH 梯度，故样品被压缩成一条狭窄的区带，因而增强了分离效果，提高电泳分辨率。尤其对小DNA 片段的分析(5～500bp)。在这一范围内，仅差1bp 的DNA 分子也能清晰地分开。其次，DNA 纯度很高。从聚丙烯酰胺凝胶中得到的DNA 纯度很高以致于下步操作不用任何处理。还有，它的负载容量高。该胶的标准加样槽中可以加入高达10mL 的DNA 样品，而不影响电泳分辨率。多应用于分离纯化和鉴定大小为5～500bp 的DNA 片段。聚丙烯酰胺凝胶电泳有连续与不连续体系两种，前者指在整个电泳体系中的缓冲液pH 值和凝胶孔径大小相同，主要用于核酸分析。后者主要用于蛋白质样品的分离，它除了电泳槽中的缓冲体系和pH 值与凝胶中不同外，凝胶本身也由缓冲体系、pH 值和凝胶孔径不同的两种凝胶堆积而成。
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凝胶层的不连续性：不连续系统的凝胶包括浓缩胶和分离胶。浓缩胶的孔径大，分离胶的孔径小。在电场的作用下，蛋白质颗粒在大孔胶中泳动时遇到的阻力小，移动快。而在小孔胶中泳动时遇到的阻力大，移动慢。因此，在两层凝胶的交界处，由于凝胶孔径的不连续性使样品迁移受阻而压缩成很窄的区带。
缓冲液离子成分和pH的不连续性：在两层凝胶中均有Tris和HCl。Tris的作用是维持溶液的电中性及pH。HCl在一定pH条件下易解离出Cl-，它在电场中迁移率大，走在最前面，故称为快离子或前导离子。电极缓冲液中的甘氨酸在pH8.3的缓冲液中解离度很小，仅为0.1-1%，因而在电场中迁移率很小，称为慢离子或尾随离子。血清中，大多数蛋白质pI在5.0左右，在pH8.3或6.7时均带负电荷，在电场中均移向正极，其有效迁移率介于快慢离子之间，于是蛋白质就在快慢离子间形成的界面处，被浓缩成极窄的区带。当进入pH8.9的分离胶时，甘氨酸解离度增加，其有效迁移率超过蛋白质，因此氯离子和甘氨酸离子沿着离子界面继续前进。蛋白质分子由于分子量大，被留在后面，然后分离成多个区带。
此外，电泳体系中电位梯度的不连续性对样品的浓缩和迁移也具有一定作用。
试述聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。
利用聚丙烯酰胺凝胶作电泳的支持物来分离蛋白质、核酸等大分子化合物的聚丙烯酰胺凝胶电泳法。聚丙烯酰胺单体(Acr)与交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂过硫酸铵或维生素B2作用下聚合交联而形成三维网状结构凝胶。在催化过程中同时加入四甲基乙二胺作为加速剂。聚丙烯酰胺凝胶不但可以作为电泳支持物，同时具有...
SDS-PAGE原理
SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成。其中四甲基乙二胺（TEMED）作为加速剂能催化过硫酸铵产生自由基。过硫酸铵（APS）作为催化剂产生自由基，从而引发丙烯酰...
聚丙烯酰胺凝胶作为电泳支持物,有何优缺点?
聚丙烯酰胺凝胶电泳用于分离蛋白质和寡核苷酸。 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐...
sds-page凝胶电泳可以测定rna吗
可以。聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）是分离大分子最常用的技术之一，包括DNA，RNA和蛋白质。电泳过程是通过施加电场作用使带电离子进行迁移的过程。在该技术中，带电分子的迁移率与其净电荷和通过的溶液的电阻成正比。十二烷基硫酸钠（SDS）是一种阴离子去污剂，溶解过程中，其分子在较广pH范围内具有净负...
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理&步骤
聚丙烯酰胺凝胶提供三维网络结构，使蛋白质分子通过，其孔径大小与比例决定于丙烯酰胺和双丙烯酰胺。凝胶聚合通过过硫酸铵提供硫酸盐基团，催化生成自由基，与TEMED作为催化剂的硫酸盐自由基协同作用。浓缩胶具有小孔径，用于压缩蛋白质样品以加速分离胶的电泳过程。分离胶具有分子筛效应，孔径随pH增加而减小，...
聚丙烯酰氨凝胶电泳的实验材料
每管加至液体高度为7．5厘米。为了保证凝胶表面平整可用注射器通过细针头小心地加一层（高约1厘米）蒸馏水于表面上，勿使与凝胶液混合，室温放置。如果条件合适溶液于 30—60分钟内聚合而成凝胶。凝胶溶液的配制方法如下：溶液甲：丙烯酰胺（氯仿重结晶）25克，双体（甲醇重结晶）1克，加水配成100毫升...
凝丙烯酰胺凝胶电泳 胶体结果如何判断正负极?
正电泳是指荷电的胶体颗粒在电场中的移动。凝丙烯酰胺凝胶电泳 胶体结果如何判断正负极，有六种方法。方法一：根据两极du材料判断。一般活泼金属zhi为负极，活泼性较弱的金属或能导dao电的非金属为正极；方法二：根据电极现象判断。一般情况下功夫电极逐渐溶解为负极，电极增重可放出气体的为正极；方法三...
丙烯酰胺凝胶一定要加四甲基乙二胺吗
不是的。聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种使用聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种载体介质上，可以根据被分离物质的分子大小和分子电荷进行分离。聚丙烯酰胺凝胶具有以下优点：①聚丙烯酰胺凝胶是丙烯酰胺与N,N'亚甲基双丙烯酰胺聚合而成的高分子。凝胶晶格是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物，没有或很少有离子...
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理
而后将凝胶从管中取出，用含有SDS的缓冲液处理30 min，使SDS与蛋白质充分结合。将处理过的凝胶条放在SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶上，加入丙烯酰胺溶液或熔化的琼脂糖溶液使其固定并与浓缩胶连接。在第二维电泳过程中，结合SDS的蛋白质从等电聚焦凝胶中进入SDS－聚丙烯酰胺凝胶，在浓缩胶中被浓缩，在...
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的发展历史
如果在第一维方向上的电泳使用丙烯酰胺和不同PH的丙烯酰胺的衍生物共聚，从而建立起具有ph梯度的固相化胶条，这样的系统称为固相pH梯度等电聚焦系统。IPG—IEF已成为目前通用的一维等电聚焦方式。IPG胶条的使用大大提高了二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的重复性和分辨率，从而使二维聚丙烯酰胺凝胶电泳数据的发布和...
职向野菊：[答案] 聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis,PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质.在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的制作是分层进行的,因此凝胶不仅有分...
广平县13416434650： SDS - PAGE电泳的原理是什么? - ？
职向野菊：[答案] 作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷. 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离...
广平县13416434650： SDS - PAGE电泳的基本原理? - ？
职向野菊： SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N',N' 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此...
广平县13416434650： 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)实验什么原理? - ？
职向野菊： 聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质.在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的制作是分层进行的,因此凝胶不仅有分子筛效应,...
广平县13416434650： 聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理以及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,. - ？
职向野菊：[答案] 聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语:polyacrylamide gelelectrophoresis,简称PAGE) 作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸.聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,...
广平县13416434650： SDS - 聚丙烯酰胺凝胶原理 - ？
职向野菊： SDS使蛋白质变性,变成条状分子.消去了分子形状差异.在胶中的移动速度取决于电压和分子量大小. 不同浓度聚丙烯酰胺孔径不同.浓度大的交联程度大,孔径小,分离的分子小. 分子量大的跑得慢,分子量小的跑得快.染色脱色,紫外观察.根据条带可知有几种蛋白.根据marker还可知道蛋白的分子量.
广平县13416434650： SDS - PAGE电泳的工作原理 - ？
职向野菊：[答案] SDS-PAGE:蛋白质的相对分子质量决定了SDS-蛋白复合物在凝胶电泳中的迁移率,聚丙烯酰胺凝胶中的去垢剂SDS带有大量的负电荷,与之相比,蛋白质所带电荷量可忽略不计.因此,蛋白质在SDS凝胶电场中的运动速度和距离完全取...
广平县13416434650： SDS - PAGE原理 分子生物学 - ？
职向野菊：[答案] SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基磺酸钠), SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,...
广平县13416434650： 解释聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理,最好清晰点 - ？
职向野菊： 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳,由于此种凝胶具有分子筛的性质,所以本法对样品的分离作用,不仅决定于样品中各组分所带净电荷的多少,也与分子的大小有关.其次,聚丙烯酰胺凝胶电泳还有一种...
广平县13416434650： 请问能否用最通俗的话去解释SDS凝胶电泳的原理? - ？
职向野菊： 最大的不同是 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用的蛋白质不做任何变性处理 SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,SDS能拆散蛋白质的折叠结构,然后沿伸展的多肽链的表面吸附.使肽链带净负电荷,蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关.
