TA克隆的具体原理是什么？

大学理工类都有什么专业~

1、通信工程
通信工程专业（Communication Engineering）是信息与通信工程一级学科下属的本科专业。该专业学生主要学习通信系统和通信网方面的基础理论、组成原理和设计方法，受到通信工程实践的基本训练，具备从事现代通信系统和网络的设计、开发、调测和工程应用的基本能力。

2、软件工程
软件工程是一门研究用工程化方法构建和维护有效的、实用的和高质量的软件的学科。它涉及程序设计语言、数据库、软件开发工具、系统平台、标准、设计模式等方面。
在现代社会中，软件应用于多个方面。典型的软件有电子邮件、嵌入式系统、人机界面、办公套件、操作系统、编译器、数据库、游戏等。同时，各个行业几乎都有计算机软件的应用，如工业、农业、银行、航空、政府部门等。

3、电子信息工程
电子信息工程是一门应用计算机等现代化技术进行电子信息控制和信息处理的学科，主要研究信息的获取与处理，电子设备与信息系统的设计、开发、应用和集成。
电子信息工程专业是集现代电子技术、信息技术、通信技术于一体的专业。
本专业培养掌握现代电子技术理论、通晓电子系统设计原理与设计方法，具有较强的计算机、外语和相应工程技术应用能力，面向电子技术、自动控制和智能控制、计算机与网络技术等电子、信息、通信领域的宽口径、高素质、德智体全面发展的具有创新能力的高级工程技术人才。

4、车辆工程
车辆工程专业是一门普通高等学校本科专业，属机械类专业，基本修业年限为四年，授予工学学士学位。2012年，车辆工程专业正式出现于《普通高等学校本科专业目录》中。
车辆工程专业培养掌握机械、电子、计算机等方面工程技术基础理论和汽车设计、制造、试验等方面专业知识与技能。
了解并重视与汽车技术发展有关的人文社会知识，能在企业、科研院（所）等部门，从事与车辆工程有关的产品设计开发、生产制造、试验检测、应用研究、技术服务、经营销售和管理等方面的工作，具有较强实践能力和创新精神的高级专门人才。

5、土木工程
土木工程（Civil Engineering）是建造各类土地工程设施的科学技术的统称。它既指所应用的材料、设备和所进行的勘测、设计、施工、保养、维修等技术活动，也指工程建设的对象。
即建造在地上或地下、陆上，直接或间接为人类生活、生产、军事、科研服务的各种工程设施，例如房屋、道路、铁路、管道、隧道、桥梁、运河、堤坝、港口、电站、飞机场、海洋平台、给水排水以及防护工程等。
土木工程是指除房屋建筑以外，为新建、改建或扩建各类工程的建筑物、构筑物和相关配套设施等所进行的勘察、规划、设计、施工、安装和维护等各项技术工作及其完成的工程实体。

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理工科专业分为理、工、农、医四个学科门类，各学科专业设置如下：
一、理学
1． 数学类 ：数学与应用数学；信息与计算科学
2． 物理学类：物理学；应用物理学
3．化学：化学；应用化学
4． 生物科学类：生物科学；生物技术
5．天文学类：天文学
6． 地质学类：地质学；地球化学
7． 地理科学类：地理科学；资源环境与城乡规划管理；地理信息系统
8． 地球物理学类：地球物理学
9． 大气科学类：大气科学；应用气象学
10． 海洋科学类：海洋科学；海洋技术. 海洋学
11． 力学类：理论与应用力学
12． 电子信息科学类：电子信息科学与技术；微电子学；光信息科学与技术
13． 材料科学类：材料物理；材料化学

扩展资料：

理工类专业是指研究理学和工学两大学科门类的专业。理工，是一个广大的领域包含物理、化学、生物、工程、天文、数学及前面六大类的各种运用与组合。理工事实上是自然、科学、和科技的容合。
理学是中国大学教育中重要的一支学科,是指研究自然物质运动基本规律的科学,大学理科毕业后通常即成为理学士。与文学、工学、教育学、历史学等并列，组成了我国的高等教育学科体系。
工学研究的是技术，要求研究的越简单，能把生产成本降的越低越好；理科重视的基础科研，工科重视的实际应用。理科培养科学家，工科培养工程师。
科学生适合专业：软件行业自然是首选，软件行业每年的人才缺口数以万计，而社会能提供的人才往往无法满足社会的需求，做软件的优势潜在的市场开拓空间巨大，具备无限的商机和利润，其次软件业是高新技术产业，简单的说就是需要高智商才能从事的行业，理科学生从事的最优选择。
企业选择员工看到就是专业技术的掌握程度，所以专业就是择业的前奏，选择什么样的专业，那未来很大程度上会从事相应的职业。企业招聘中一些企业明文规定，需要本专业学生，所以专业就是择业踏入职场的敲门砖。
怎样在众多人群中脱颖而出，自身的专业技术是关键。其次，理科自身的优势，应该选择高端行业，因为本身具备逻辑分析能力、空间立体感等优势，根据自己的特长来选择专业，轻松应对以后课程的理解和掌握。最后理科选择专业的范围很广，专业最终标准看重的还是未来的发展前景。
参考资料：百度百科——理工类专业

TA克隆方法（OriginalTACloningKit）把PCR片断与一个具有3‘-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所使用的聚合酶具有末端转移的活性，通常在3'加上A。  

例如：Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，PCR反应时在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3’-T突出末端的DNA片断才能通过T/A配对进行连接。  

通过PCR的方法扩增目的基因片断的过程中，由于往往不清楚目的基因的DNA序列，获得的目的片断通常需要通过TA克隆的方法，重组到T-载体中，通过序列测定清楚DNA序列。

扩展资料：

T4噬菌体DNA连接酶催化DNA连接反应分为3步：

首先，T4DNA连接酶与辅因子ATP形成酶-ATP复合物；然后，酶-ATP复合物再结合到具有5’磷酸基和3’羟基切口的DNA上，使DNA腺苷化；最后产生一个新的磷酸二酯键，把切口封起来。连接反应通常将两个不同大小的片断相连。

因为DNApian断有两个端点，所以切割时出现两种可能，一种是单酶切，另一种是双酶切，这两种酶切方法在基因工程操作中都经常用到。对于单酶切来说，载体与供体的末端都相同，连接可以在任何末端之间进行，这样就导致了大量的自连接产物。

为了减少自环的高本底，可对载体进行5’除磷酸处理，原理是连接酶只能连接DNApian断的3’OH末端与5’端，所以除磷后载体不会自环。一旦有外源片断插入时，由外源片断提供5’端就能与载体进行连接。通过这种方法可大大减少由载体的自环造成的高本底。

对于双酶切来说，无论载体与供体同一片段上都有不同的末端，这样就避免了载体与供体的自环，能使有效连接产物大大增加。双酶切的另一个特点是能将供体分子定向连接到载体上。

参考资料来源：百度百科-TA[克隆]法

TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性，通常在3加上A。例如：Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，PCR反应时在每条PCR扩增产物的3端自动添加一个3-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3-T突出末端的DNA片断才能通过T/A配对进行连接。　通过PCR的方法扩增目的基因片断的过程中，由于往往不清楚目的基因的DNA序列，获得的目的片断通常需要通过TA克隆的方法，重组到T-载体中，通过序列测定清楚DNA序列。由于在PCR过程中，使用的DNA聚合酶不同，往往分为2种情况：（1）使用不同的Taq酶，在PCR扩增循环结束后，加上72℃ 10分钟一个过程，Taq酶可以在扩增产物的3末端加上A，因此PCR产物回收纯化后可以和T载体直接连接。（2）使用高保真的DNA聚合酶，如pfu酶，由于其不能在扩增产物的3末端加上A，得到的DNA序列为钝端，因此，需要在回收纯化后进行加A的过程，通常是以PCR回收产物为模板，加上一定量的普通Taq酶和反应液，加入dATP（或dNTP）， 72℃ 10分钟，然后将加A产物直接用于TA连接。

TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）把PCR片断与一个具有3‘-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所使用的聚合酶具有末端转移的活性，通常在3'加上A。
例如：Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，PCR反应时在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3’-T突出末端的DNA片断才能通过T/A配对进行连接。
　通过PCR的方法扩增目的基因片断的过程中，由于往往不清楚目的基因的DNA序列，获得的目的片断通常需要通过TA克隆的方法，重组到T-载体中，通过序列测定清楚DNA序列。由于在PCR过程中，使用的DNA聚合酶不同，往往分为2种情况：
（1）使用不同的Taq酶，在PCR扩增循环结束后，加上72℃ 10分钟一个过程，Taq酶可以在扩增产物的3末端加上A，因此PCR产物回收纯化后可以和T载体直接连接。
（2）使用高保真的DNA聚合酶，如pfu酶，由于其不能在扩增产物的3末端加上A，得到的DNA序列为钝端，因此，需要在回收纯化后进行加A的过程，通常是以PCR回收产物为模板，加上一定量的普通Taq酶和反应液，加入dATP（或dNTP）， 72℃ 10分钟，然后将加A产物直接用于TA连接。

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温岭市17089309155： TA克隆的具体原理是什么? - ？
商茂枸椽：[答案] TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法.因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3加上A.例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产...

温岭市17089309155： 什么是T - A克隆? - ？
商茂枸椽：[答案] TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)即利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端.Invitrogen公司TA克隆系统和Topo TA克隆系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接...

温岭市17089309155： 什么是AT克隆法? - ？
商茂枸椽： 就是一般pcr的时候3端有一个A,就是根据这个进行的TA克隆的 用载体连接后转进感受态细胞里 然后进行培养,摇菌.最后测序.

温岭市17089309155： 什么是AT克隆法?？
商茂枸椽： 哥们,是TA克隆法吧? 应用末端有T尾的线性化质粒克隆PCR产物的方法. 不需要酶切质粒和PCR产物,方便快捷.

温岭市17089309155： TA克隆里的insert DNA量是怎么算的 - ？
商茂枸椽： TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3'-T突出的载体DNA连接起来的方法.因为PCR反应中所使用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3'加上A. 例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3`端...

温岭市17089309155： TA克隆过程重组质粒转化到什么菌株中,具体些 - ？
商茂枸椽：[答案] 这个你买的T载体说明书上会有的,告诉你最常用的克隆菌是哪一种或者哪几种,象DH5α、TOP10、JM109、是最常用的.一般做分子的实验室都有,就算没有,这几种感受态细胞也是很常买的,也不贵,也可以找别的实验室要两个菌珠自己做感受...

温岭市17089309155： RT - PCR出一段目的基因,为什么要把它先TA克隆呢?为什么不能直接把它连接到相应的质粒上呢 - ？
商茂枸椽： 确实可以不一定要TA克隆.你可以在设计引物的时候在引物的5'端加上酶切位点,比如你选中XXXYYY位点你可以把引物设计为AA-XXXYYY-AGCT(AGCT 代表你原来的引物序列).我一般在头上加2个A,这样酶切效果好一些.两个引物可以加相同,也可以不同酶切位点.取决于2点: 1.扩增区没有该位点,(必须知道你扩增区的序列) 2.对应于你的目标分子.TA克隆的好处在于选择灵活,万一一个位点不好使,同一批质粒还可以用其他酶再切.随时可以扩增.还有方便下游作业,比如说你要连接两端PCR产物,先克隆会比较方便一些.所以2种方法各有优缺点,你可以根据情况选用.

温岭市17089309155： 请问什么是bisulfite sequencing PCR, BSP? - ？
商茂枸椽： 目前, 基因的甲基化研究主要结合亚硫酸氢钠处理和PCR技术,分为甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)和硫化测序PCR(Bisulfite sequencing PCR, BSP).技术原理:DNA经亚硫酸氢盐硫化处理后,DNA双链中的“C”转化为“...

温岭市17089309155： 常见的T载体及连接方法谁能介绍一下? - ？
商茂枸椽： T载体是TA克隆载体的简称,就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法. 生物帮上面有相关的详细介绍, http://doc.bio1000.com/list-134.html RNA电泳技术文档,RNA电泳技术文档下载 . 生物帮bio1000是生物行业门户网站,信息内容丰富、科学、专业,内容主要包括生命科学领域产品、技术文档、视频、生物、在线交流核心版块,每一个版块中有细分的栏目和内容.

温岭市17089309155： 怎样克隆启动子和测定其序列?步骤尽量说详细点 - ？
商茂枸椽： 如果基因组测序已经完成的话,直接可以看出来,如1L说的,设计引物,PCR就可以; 如果是基因组没有完成测序,要去克隆一个已知基因的启动子: 首先,你需要自己做一个genomic walking的模板(基本原理为:抽提该物种的DNA,DNA的...