高效液相色谱一次进样量为多少正好合适。在线等
用面积归一化法没有影响，最多是进样量少低于检出限，测不出来
可以。
增加进样量和增加浓度是一样的意思。
你可以看一下自己实验条件的定量限（信噪比为10时候的浓度）是多少，只要比这个高就好。当然了，最好是吸收大一点，看着漂亮。
不过有一个过载量，这个要通过线性才能看出来。只要是线性试验的中间浓度其实都是可以的。
压力增大导致密度增大这种想法很大胆，你进样时定量环是与大气相通的气压怎么会增加？
手动进样是定量环应该不会有压力变大的现象，样品的密度也不会增大。
如果觉得上次的溶液有残留，进样前可以先用溶剂冲洗一下进样器。
计算要求是以峰高来计算的吗？如果是以峰面积计算，则峰高变化一些不会对结果造成影响的。
那一种进样的结果准确还要做一下重复性来考察。
超高液相时候不小心进样针把样品瓶给穿透了,怎么办啊?
一般国产的进样针都是不太密封的。针头是不是那种灰白色的像塑料一样材质的？那个一定要留好。可以去换一个好一点的注射器，然后接在进样针上面。一般玻璃注射器很容易不紧，漏气。所以如果是用纯水做溶剂的样品，可以用塑料的注射器。那种气密性相当好。不过如果加了太多的有机溶剂可能会出现杂质。
液相色谱仪使用及工作原理。
工作原理：流动相通过输液泵流经进样阀，与样品溶液混合，流经色谱柱，在色谱柱中进行吸附、分离，最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号，在色谱工作站上出现相应的样品峰。液相色谱的使用：首先对样品进行预处理，然后进样，进样完毕后，清洗进样口，每次分析结束后，清洗通道，最后关闭仪器。
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法：手动进样步骤 配置好流动相，将滤嘴洗头放入流动相页面内，打开泵和检测器，快跑排除气泡，设置既定流速，稳定一段时间，让基线跑平，用液相针吸取称量融配脱气后的对照（含量已标定）。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中，拔出针头好立刻关闭六通阀，一般随六通阀关闭电脑...
高效液相色谱法,利巴韦林注射液有关物质每针进样需要多少流动相啊?_百 ...
这与你的仪器方法有关，假设你的流速是300uL\/min,总方法时间是15min,那么你每针样品总共消耗的流动相体积就是V=300μL*15=4.5ml;由于一般都有A,B两个流动相，这里算出的体积是每针样品所有流动相使用的总体积。
高效液相的原理,最好详细点
试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻,因此就直接通过柱子,首先在色谱图上出现,一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中,这些组分在柱上的保留值最大,在色谱图上最后出现。 高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、.分离系统、检测系统...
高效液相色谱仪怎么定量分析的?
高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析，是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析，得到数据后进行对照计算，推算出含量的。题中已经知道未知含量物质的峰面积后，还无法得到含量，如果需要得到绝对含量数据，还需要将一个已知含量的样品（标准样品）在同一条件下进行一次分析，得到相同物质组份...
高效液相色谱的优点
3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析...
如何保证高效液相色谱法中进样的准确性?
含量测定的准确度用加样回收试验评价，可以做单水平的（100%），也可做3水平的（80%、100%、120%）。与传统的HPLC相比，UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍，它缩短了分析时间，同时减少了溶剂用量降低了分析成本。不过由于实验过程中仪器内部压力过大，也会产生相对应的问题。
气相色谱法与高效液相色谱法相同点和不同点
（二）仪器构造不同 1、气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。2、高效液相色谱仪主要有：进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。（三）检测原理不同 1、气相色谱法是一种物理的分离方法。利用...
高效液相色谱分析法的原理是什么?
高效液相色谱分析原理：（一）高效液相色谱分析的流程：由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分...
班昂都梁：[答案] 在下仪分学得不好,几乎没用到过HPLC,但我知道这个上面没人能帮得上你的忙更有可能误了你的事,劝你去色谱论坛或仪器分析论坛求助吧,那上面的人长期用到起的,有很好的经验^.^
通江县13442187343： 高效液相色谱可不可以大规模分离样品? - ？
班昂都梁： 可以,但要考虑样品的极性大小选择适当的色谱柱和其它色谱条件,通常分析型HPLC进样一次可得到1mg样品;半制备型的HPLC视进样量而定,一般一次可得到不少于100mg的样品.选定合适的色谱条件是关键.
通江县13442187343： 高效液相色谱法为何只要进针10微升? - ？
班昂都梁： 根据样品浓度或性质进行的调整的,色谱柱能承载的样品的数量是有限定的,过多的样品进入色谱柱会使柱过载,使样品峰形不好,或者检测出的来的数值不准,或者裂峰甚至会损坏色谱柱.另外色谱仪的检测范围也是有限定的,过高的峰测得的峰面积与实际峰面积会有偏差. 反之过少样品进入色谱柱又使得样品的峰太小不容易检测到,或者信噪比太小影响检测精度. 所以进样的体积是由你要检测物质的性质(单位数量能产生的响应值)和数量以及检测器和柱的性能决定的,按着已经过验证的方法来分析就行了.
通江县13442187343： 液相色谱的峰面积与进样量的关系成正比吗?一般进样量为20ul,如果等浓度样品溶液,进样量改为100ul,其峰面积是其5倍吗?测量样品时,选择进样量的... - ？
班昂都梁：[答案] 1、一般液相色谱进样的定量环大都在10或20uL,100uL的很少见(制备常见).2、如果是在线性范围内的话,是成正比的.但是大的进样量会引起色谱峰的扩散,对峰面积有一定影响.最好还通过提高浓度来实现.3、关于进样量,最好...
通江县13442187343： 高效液相色谱法有＂四高一广＂的特点有哪些 - ？
班昂都梁： 高效液相色谱法有＂四高一广＂的特点:高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须用色谱泵对流动相加高压.高速:分析速度快、流动相流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时.高效:分离效能高.可选择不同的固定相和流动相搭配以达到最佳分离效果,高效液相色谱比气相色谱的分离效能高出许多倍.高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级.应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势.
通江县13442187343： 高效液相色谱法分析一个样品为什么只出溶剂峰不出样品峰?是不是浓度太低?应该分析多大浓度的样品合适? - ？
班昂都梁： 浓度太低只是其中的一种可能性,可以提高样品浓度或加大进样量解决.还有其它的原因 1.样品在色谱柱上无保留或是保留时间太长,较大的可能是流动相不适用,改变流动相种类或比例.无保留的原因也较多,除以上原因外,也有可能是柱子选择不对,或是柱损坏. 2.紫外检测器的话,可能是波长选择的原因,可能此波长下样品的紫外吸收非常小.
通江县13442187343： 高效液相色谱法中采用什么定量时,样品溶液和标准溶液的进样量相同 - ？
班昂都梁： 外标法与进样量有关,均需精密进样;内标法与进样量无关 ,但对照品与样品内必须精密加入相同量得内标溶液,这样内标浓度与样品浓度(对照品)比值是固定的,故内标法与进样量无关,多看看色谱方面书就知道了!
通江县13442187343： 高效液相色谱仪样品一般用什么溶剂溶解? - ？
班昂都梁： HPLC样品的浓度这个需要看你分析的是什么样品,他的响应值是高还是低,检测项目是杂质检测还是含量检测,如果做有关物质,一般浓度较高,因为要检测出很小的杂质,根据响应值的不同来确定浓度,具体操作的时候可以做成不同浓度,...
通江县13442187343： 求助:关于高效液相色谱法含量计算公式的理解 - ？
班昂都梁： 关于高效液相色谱法含量计算公式的理解 含量方法学认证主要考察以下几个性质: 1专属性:查看被测物质与被测结果间是否正确且唯一对应. 考察方法:将处被测成分外的其他物质均做空白干扰对照,包括流动相、辅料空白、溶剂空白、...
通江县13442187343： 高效液相色谱半制备时对进样的浓度有要求吗 - ？
班昂都梁： 样品浓度最高点的要求主要看色谱柱的承受能力.过高的样品浓度会对柱子产生一定的负荷,一来柱子会有所损伤,二来分离效果也会受到影响.当然要考虑物质的溶解性,与流动相接触瞬间是否有可能析出等问题. 最低点主要还是看实验者对样品的要求.什么样的浓度都是在固定时间出峰,在该位置收集溶液即为你所要求的物质.但是在得到溶液后如何能够提取并纯化,在适当的收率的情况下是否能得到你所期望的物质量.在制备角度来看,还是应该在不影响分离的情况下将样品浓度尽量提高,同时要考虑色谱柱的承受能力和分离效果及纯度等问题.
