微生物细胞生长的测定方法

作者&投稿:焦妻 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
测定微生物的生长有哪些方法~

常用测定微生物生长的方法有:
1)、称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.
2)、比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点:比较准确.
3)、测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)、血球计数板法.优点:简便、快速、直观.缺点:结果包括死菌和活菌.
5)、液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点:可计算活菌数,较准确.缺点:比较繁琐.
6)、平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.缺点:操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.

测生长量:直接法有粗放的测体积法(在刻度离心管中测沉降量)和精细的测干重法,间接法有比浊法(即用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定)和生理指标法(测含氮量法,测含碳量和测磷)
计繁殖数:直接法指用记数板(例如雪球计数板)在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法 间接法是一种活菌计数法;有平板菌落计数法(即把稀释后的一定量菌样通过浇注或涂布的方法,让其内微生物单细胞一一分散在平板上,代培养后,每一个活菌就菌落形成单位,根据每皿上形成的cfu数乘上稀释度就可推算出菌样的含菌量和厌氧菌的菌落计数法)和厌氧菌的菌落计数法

微生物生长的测定方法有多种,根据研究对象或目的选择。(一)微生物细胞数目的检测方法1.总细胞计数法 显微镜直接记数法和比浊法(1)血球计数板法 血球汁数板中央有一个体积一定的计数室( 0.1mm3)。将菌悬液或孢子悬液在显微镜下计数,然后再按一定公式计算出细菌总数。 (2)涂片计数法 将一定体积(0.1ml)的样品,均匀地涂在载片的一定面积内(1cm2)。在显微镜下计算细胞数量,推算1cm2所含细胞数目。(3)比浊法:菌体细胞培养液混浊,在一定范围内,菌体数量与浑浊成正比,故可通过分光光度计或比色计求出浑浊度,通过与标准曲线对比,求出样品中菌液浓度,算出个体数。特点:所得结果包括死菌和活菌。2. 活菌计数法(平板菌落记数法):是通过测定样品在培养基上形成的菌落数来间接确定其活菌数的方法.故又称平板计数法。特点:计算的结果是活菌落。注意:样品稀释度。一个活细胞形成一个菌落。(1)涂布平板法 用灭菌的涂布器将一定体积(不大于0.1ml)的适当稀释度的菌液涂布在琼脂培养基的表面,然后保温培养有到菌落出现,记录菌落的数目并换算成每毫升试样中的活细胞数量。(2)倒平板法 将样品稀释到一定浓度,取一定体积(0.1—1ml)倒入冷却至45℃的固体培养基混合,制成平板,培养后,出现菌落,由菌落数推算出的菌总数。3 滤膜过滤法:样品同过微孔滤膜后,细菌收集在滤膜上,然后将滤膜放在培养基中培养,通过菌落计数求出样品活菌落。 (二)微生物生长量和生理指标的测定方法测定微生物生长量及相关的生理指标,常用以下方法:1.湿重法:将单位体积微生物培养液离心,收集沉淀物,然后再称重。2.干重法:将离心得到的细胞沉淀物,置于100---105℃的烘箱中干燥过夜除去水分,然后再称重。特点:适合与菌体浓度高的样品。表示菌体生长量。3、测定细胞内菌种化学成分:方法难,操做困难,但较准确。细胞内菌种化学成分多少(∝),反映群体中菌体数量的多少。(1) 测定含氮量:N在细胞内稳定,测定总N量,粗蛋白=N*6.25g。(2) 测定DNA:微生物细胞DNA含量稳定,采用荧光指示剂或染色剂与菌体DNA作用荧光比色或分光光度法测得DNA的含量。(3) 其他生理指标:如测定碳、磷、RNA、ATP、DAP(二氨基庚二酸)的含量等。 (二)丝状微生物菌丝长度的测定方法 对于丝状微生物。特别是丝状真菌,通常是通过测定菌丝的长度变化来反映它们的生长速率。方法有: 1.培养基表面菌体生长速率测定法 主要测定一定时间内在琼脂培养基表面的菌落直径的增加值。 2.培养料中菌体速率测定法主要测定一定时间内在固体培养料中菌丝体向前延伸的距离。如:栽培食用菌的培养料。 3.单个菌丝顶端生长速率测定法 在显微镜下借助目镜测微尺测定在一定时间内单个菌丝的伸长长度。


微生物细胞生长的测定方法
微生物生长的测定方法有多种,根据研究对象或目的选择。(一)微生物细胞数目的检测方法1.总细胞计数法 显微镜直接记数法和比浊法(1)血球计数板法 血球汁数板中央有一个体积一定的计数室( 0.1mm3)。将菌悬液或孢子悬液在显微镜下计数,然后再按一定公式计算出细菌总数。 (2)涂片计数法 ...

MTS法测定细胞增殖的原理?该方法与MTT法有何不同?
1、MTT法:利用有色物质对特定波长光的吸收特性来进行定性分析的一种方法。2、MTS法:是一种检测细胞存活和生长的方法。二、原理不同 1、MTT法:为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。2、MTS法:以生成有色化...

在测定微生物生长曲线中比浊法与血球板计数法,两者有何不同?
比浊法是用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定,得到的是活细胞的数目,而血球板计数法是在光学显微镜下直接计数的方法,但得到的是包括死细胞在内的细胞数。血球计数板通常用于动物细胞,测量较为精确,使用台盼蓝染色以后可以分辨细胞的死活。不过也有缺点,一是假如测量的细胞的原始密度及高,在...

2015考研复习:微生物学笔记(七)?
微生物生长的测定测定生长量:测体积称干重比浊法生理指标法(测含氮量测含碳量测磷、DNA、RNA、 ATP。) 测细胞的个数:比例计数法、血球计数法、平板活菌计数法。第二节 微生物的生长规律细菌的个体生长和同步生长。研究细菌个体的生长方法:用电子显微镜观察细胞的超薄切片 同步培养(synchronous cultur...

测定微生物群体生长有哪些方法?有何特点?
所谓生长就是指生物个体由小到大的增长,即表现为细胞组分与结构在量方面的增加;繁殖是指生物个体数目的增加。但是在单细胞微生物中,生长繁殖的速度很快,而且两者始终交替进行,个体生长与繁殖的界限难以划清,因此实际上常以群体生长作为衡量微生物生长的指标。群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖...

细胞生长曲线的介绍
细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。在细胞达到饱和密度后,停止生长,进入平顶期,然后退化衰亡。为了准确描述整个过程中细胞数目...

细胞生长曲线计算公式
t=T\/A,A=log2Y\/X。绘制细胞生长曲线,根据公式t=T\/A,A=log2Y\/X计算细胞倍增时间(t为细胞倍增时间,Y为细胞峰值前1d的细胞数,X为接种细胞数,T为细胞生长时间)计算即可。细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。

如何判断细胞生长处于对数期
要判断细胞生长是否处于对数期,测定细胞生长曲线即可:一:在同一规格的培养瓶中,接种同等量的同一代细胞,经培养后每隔24小时取出几瓶细胞进行计数,以培养时间为横座标,不同时刻的细胞数的对数为底座标,标出各点并连成线,即为该细胞的生长曲线,可反应出细胞生长的动态。二:用96孔\/24孔细胞培养...

生物生长属于什么变化
6、概念:Quorum sensing、代时、比生长速率、倍增时间、迟缓时间 Quorum sensing:细菌通过监测细胞分泌的特定信号分子浓度从而监测种群自身密度的方式。此种现象又被称为自诱导,因为信号分子的浓度会随着菌密度增加而增加,超过阈值后细菌开始表达一系列的密度依赖型基因(QS),合成生物膜、次级代谢旺盛、不再生长等等。[...

【干货分享】细菌生长曲线详解
细菌生长曲线描述了单细胞微生物在适宜条件下,接种到液体培养基中,定时取样测定细胞数量随时间变化的动态过程。这条曲线以细胞增长数目的对数为纵坐标,以培养时间作为横坐标,清晰地揭示了微生物生长过程中的四个关键阶段。分批培养是一种在封闭系统中对微生物进行的培养方式,过程中既不补充营养物质也不...

哈密市17778389289: 测量微生物生长的方法有哪些? -
赖俩橘红:[答案] 测生长量:直接法有粗放的测体积法(在刻度离心管中测沉降量)和精细的测干重法,间接法有比浊法(即用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定)和生理指标法(测含氮量法,测含碳量和测磷) 计繁殖数:直接法指用记数板(例如雪球计数...

哈密市17778389289: 测定微生物生长量的方法有几种 -
赖俩橘红: v常用测定微生物生长的方法有:1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.2)比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点...

哈密市17778389289: 微生物细胞生长的测定方法微生物cell生长的测定方法比较系统的有哪些? -
赖俩橘红:[答案] 微生物生长的测定方法有多种,根据研究对象或目的选择.(一)微生物细胞数目的检测方法1.总细胞计数法 显微镜直接记数法和比浊法(1)血球计数板法 血球汁数板中央有一个体积一定的计数室( 0.1mm3).将菌悬液或孢子悬液在显微镜下计数,...

哈密市17778389289: 下列哪些是微生物生长的测定方法( ) A细胞总数计数法 B活菌计数法 C重量法 D? -
赖俩橘红: abc均可 主要的微生物数目检测方法包括了直接检测法,间接检测法和生理指标法.直接检测法包括:显微镜配合血细胞计数板检测,膜过滤检测.间接检测法包括:间接膜过滤检测,比浊法,单菌落分离检测.生理指标法:主要包括耗氧量检测,粘度检测等等.

哈密市17778389289: 微生物细胞生长的测定方法 -
赖俩橘红: 微生物生长的测定方法有多种,根据研究对象或目的选择. (一)微生物细胞数目的检测方法 1.总细胞计数法 显微镜直接记数法和比浊法 (1)血球计数板法 血球汁数板中央有一个体积一定的计数室( 0.1mm3).将菌悬液或孢子悬液在显微...

哈密市17778389289: 微生物生长常用的测定方法及其优缺点.求详细求准确 -
赖俩橘红:[答案] 细菌可以直接用比色法测定,也可以用瓦博氏呼吸仪测定,前者主要包括活菌体和死菌体,后者只包括活菌体代谢过程中的菌体. 真菌或放线菌:用菌丝体干重法,或者ATP含量法 病毒只好用噬菌(噬细胞)斑法了,

哈密市17778389289: 微生物群体生长状况的测定方法可以是( ) ①测定样品的细胞数目 ② 微生物群体生长状况的测定方法可以是( ) ①测定样品的细胞数目 ②测定次级代谢产... -
赖俩橘红:[选项] A. ②④ B. ①④ C. ①③ D. ②③

哈密市17778389289: 细菌生长速度怎么测算 -
赖俩橘红:[答案] 一般是测算细菌的数量 常用的有以下几种方法 1.计数器测定法:即用血细胞计数器进行计数.取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数.由于计数室的容积是一定的(O.1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,...

哈密市17778389289: 微生物计数方法有哪些? -
赖俩橘红:[答案] 测定微生物细胞数目的方法有很多,介绍几种 1.血细胞计数法 将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数. ①此法的缺点是不能区分死菌和活菌. ②对...

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