有谁对测试分子量的凝胶渗透色谱有了解吗?目前进口产品市场是一般都是马尔文,沃特世,PSS等品牌
不是
凝胶渗透色谱测试的是重均分子量(Mw)和分子量分布(Mw/Mn)
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography、GPC)1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物。(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开)
1.基本原理1.1分离原理
让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱,柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)。当聚合物溶液流经色谱柱时,较大的分子被排除在粒子的小孔之外,只能从粒子间的间隙通过,速率较快;而较小的分子可以进入粒子中的小孔,通过的速率要慢得多。经过一定长度的色谱柱,分子根据 相对分子质量被分开,相对分子质量大的在前面(即淋洗时间短),相对分子质量小的在后面(即淋洗时间长)。自试样进柱到被淋洗出来,所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。 当仪器和实验条件确定后,溶质的淋出体积与其 分子量有关,分子量愈大,其淋出体积愈小。
(1) 体积排除
(2)限性扩散
(3) 流动分离
1.2校正原理
用已知相对分子质量的单分散标准聚合物预先做一条淋洗体积或淋洗时间和相对分子质量对应关系 曲线,该线称为“校正曲线”。聚合物中几乎找不到单分散的标准样,一般用窄分布的试样代替。在相同的测试条件下,做一系列的GPC标准谱图,对应不同相对分子质量样品的保留时间,以lgM对t作图,所得曲线即为“校正曲线”。通过校正曲线,就能从GPC谱图上计算各种所需相对分子质量与相对分子质量分布的信息。聚合物中能够制得标准样的聚合物种类并不多,没有标准样的聚合物就不可能有校正曲线,使用GPC方法也不可能得到聚合物的相对分子质量和相对分子质量分布。对于这种可以使用普适校正原理。
1.3普适校正原理
由于GPC对聚合物的分离是基于分子流体力学体积,即对于相同的分子流体力学体积,在同一个保留时间流出,即流体力学体积相同。
两种柔性链的流体力学体积相同:
[η]1M1=[η]2M2
k1M1α1+1=k1M2α2+1
两边取对数:lgk1+(α1+1)lgM1=lgk2+(α2+1)lgM2
即如果已知标准样和被测高聚物的k、α值,就可以由已知相对分子质量的标准样品M1标定待测样品的相对分子质量M2。
凝胶渗透色谱 - 2.实验部分
直接法:在测定淋出液浓度的同时测定其粘度或光散射,从而求出其分子量。
间接法:用一组分子量不等的、单分散的试样为标准样品,分别测定它们的淋出体积和分子量,则可确定二者之间的关系。
2.1.仪器
GPC仪的组成:泵系统、(自动)进样系统、凝胶色谱柱、检测系统和 数据采集与处理系统。
2.1.1.泵系统:包括一个溶剂储存器、一套脱气装置和一个高压泵。它的工作是使流动相(溶剂)以恒定的流速流入色谱柱。泵的工作状况好坏直接影响着最终数据的准确性。越是精密的仪器,要求泵的工作状态越稳定。要求流量的误差应该低于0.01mL/min。
2.1.2.色谱柱:GPC仪分离的核心部件。是在一根不锈钢空心细管中加入孔径不同的微粒作为填料。每根色谱柱都有一定的相对分子质量分离范围和渗透极限,色谱柱有使用的上限和下限。色谱柱的使用上限是当聚合物最小的分子的尺寸比色谱柱中最大的凝胶的尺寸还大,这时高聚物进入不了凝胶颗粒孔径,全部从凝胶颗粒外部流过,这就没有达到分离不同相对分子质量的高聚物的目的。而且还有堵塞凝胶孔的可能,影响色谱柱的分离效果,降低其使用寿命。色谱柱的使用下限就是当聚合物中最大尺寸的分子链比凝胶孔的最小孔径还要小,这时也没有达到分离不同相对分子质量的目的。所以在使用凝胶色谱仪测定相对分子质量时,必须首先选择好与聚合物相对分子质量范围相配的色谱柱。
2.1.3.填料(根据所使用的溶剂选择填料,对填料最基本的要求是填料不能被溶剂溶解):交联 聚苯乙烯凝胶(适用于有机溶剂,可耐高温)、交联 聚乙酸乙烯酯凝胶(最高100℃,适用于乙醇、丙酮一类极性溶剂) 多孔硅球(适用于水和有机溶剂)、 多孔玻璃、多孔氧化铝(适用于水和有机溶剂)
2.1.4.柱子:玻璃、不锈钢
2.1.5.检测系统:通用型检测器:适用于所有高聚物和有机化合物的检测。有示差折光仪检测器、 紫外吸收检测器、粘度检测器。
2.1.6.示差折光仪检测器:溶剂的折光指数与被测样品的折光指数有尽可能大的区别。
2.1.7.紫外吸收检测器:在溶质的特征吸波长附近溶剂没有强烈的吸收。
2.1.8.选择型检测器:适用于对该检测器有特殊响应的高聚物和有机化合物。有紫外、红外、荧光、电导检测器等。
2.2.操作
2.2.1.溶剂的选择: 能溶解多种聚合物;不能腐蚀仪器部件;与检测器相匹配。
2.2.2.把激光光散射与凝胶色谱仪联用,在得到浓度谱图的同时,还可得到散射光强对淋出体积的谱图,从而计算出分子量分布曲线和整个试样的各种平均分子量
2.2.3.激光光散射实验中必须对样品严格除尘,溶液中的灰尘会产生强烈的光散射,严重干扰聚合物溶液光散射的测量。溶液除尘是光散射成败的关键。首先是溶剂除尘,配置测试样品的溶剂应进行精馏,并经过0.2μm超滤膜过滤后方可使用。配好的溶液也要用0.2μm的超滤膜过滤。另外,测试中所用的器械,如:注射器等,使用前要用洗液浸泡,清水强力冲洗。
个人觉得 美国的沃特世的 ACQUITY APC 超高效聚合物色谱仪不错。
有谁对测试分子量的凝胶渗透色谱有了解吗?目前进口产品市场是一般都是...
经过一定长度的色谱柱,分子根据 相对分子质量被分开,相对分子质量大的在前面(即淋洗时间短),相对分子质量小的在后面(即淋洗时间长)。自试样进柱到被淋洗出来,所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。 当仪器和实验条件确定后,溶质的淋出体积与其 分子量有关,分子量愈大,其淋出体积...
哪种物理性质对测分子量最有用?
在测分子量的方法中,蒸气压下降、沸点上升和凝固点降低都是常用的物理性质。然而,哪一种方法最好取决于实验条件和所需信息。蒸气压下降:蒸气压是物质在一定温度下蒸发成气体的压力。一般来说,分子量越高的物质,其蒸气压越低。这是因为分子量高的物质相对分子量低的物质更不容易蒸发。因此,通过测...
凝胶渗透色谱比起其他测试分子量的仪器有何优势,制样要注意什么_百度知 ...
方便、准确、速度快。测定分子量一般就是凝胶色谱和粘度计,然后再折算成道尔顿分子量,凝胶给出的信息丰富,不仅能给出重均分子量,还能给出数均、z均、分子量分布系数等信息。制样要注意不要有大颗粒不溶物堵塞色谱柱,进样前要用0.45um滤膜过滤,还要注意浓度不可太大,不能超过柱子耐受力,也不...
有比较好的分子量测试公司参考吗?
1.1 分离原理 GPC技术通过让被测量的高聚物溶液流经内装有不同孔径的色谱柱,实现分离。大分子无法进入小孔,仅通过粒子间隙,流动快速;小分子则可进入粒子内小孔,流动缓慢。分子根据相对分子质量被分开,大分子在前(淋洗时间短),小分子在后(淋洗时间长)。淋出液体积与试样分子量相关,分子量越...
依数性测分子量首选哪一种
选凝固点下降。分子量一般指相对分子质量。 相对分子质量,是指化学式中各个原子的相对原子质量(Ar)的总和,依数性测分子量首选的是选凝固点下降,用符号Mr表示,单位是1。对于聚合物而言,其相对分子量可达几万甚至几十万;相对分子质量最小的氧化物的化学式为H?O。
测定分子量的常用方法之一是凝固点下降法.例如水是常用的溶剂,当水中...
2.30g溶于15.6g樟脑中,凝固点下降了49.5℃,则溶解的该有机物的物质的量为:0.005mol×49.5℃13℃≈0.019mol,该有机物的摩尔质量为:M=mn=2.3g0.019mol=121g\/mol,3.667g该有机物的物质的量为:n=3.667g121g\/mol≈0.0303mol,9.236g CO2的物质的量为:9.236g44g\/mol≈0....
测定蛋白质分子量的常用方法
用本法测得的分子量,除单链蛋白质外,均不是天然蛋白质的完整分子量,而是组成这些蛋白质的亚基或肽链的分子量。本法对一些电荷异常,或构象异常,或带有大辅基的蛋白质不适用,如组蛋白F1和某些糖蛋白等。对一些结构蛋白如胶原蛋白等也不适用。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳按照凝胶电泳系统中的缓冲液、pH...
凝胶渗透色谱对分析样品的要求
1、如果测试分子量建议用通用检测器,你的样品应该是多组分的一类物质,用紫外的话很难兼顾到每一个的组分的紫外吸收强度。样品没有特殊要求,只要你选择合适的色谱条件就可以的。2、你如果做分离纯化的话,那你最好先筛出最佳的分离条件,然后在实验。样品的上样量不要太大,避免过载。3、其他目的的...
测定物质的分子量时,为什么常用经凝固点降低法而不用沸点升高法_百度知 ...
沸点升高值一般都比较小,而且沸点受气压影响太大,误差不好控制。
GPC绝对分子量测试\/多角度激光光散射与凝胶渗透色谱仪 联接与应用技MA...
理论基础是,当激光穿透样品时,散射光的强度与分子量和浓度紧密相关,这一过程可通过Zimm Plot解析出关键参数,如通过测量不同浓度溶液的散射强度,我们可以计算出重均分子量Mw。对于那些分子结构单一且分布窄的样本,A2值是一个测定绝对分子量的有效途径。然而,对于宽分布或复杂族群的样品,光散射与GPC\/...
景堂太可: 1、快速,准确,简便,成本相对低廉.2、浓度约5mg/mL,不要超声溶解,用前过滤.
曲江县15220323205: 凝胶渗透色谱测分子量有哪些注意事项 - ?
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曲江县15220323205: Upe的分子量如何检查? - ?
景堂太可: Upe的分子量检测: 高分子量聚乙烯(UPE)一般是指相对分子质量在 150 万以上的聚乙烯.大分子.采用凝胶色谱可以测试其分子量,GPC 快速柱和红外检测器,一个小时之内就可以完成 UPE 的分子量及其分布测试. 西班牙 Polymer Char公司针开发的全自动凝胶渗透色谱仪 GPC-IR,硬件简单,模块化设计,软件方便,结果重复性好.使用IR5MCT 检测器只针对 C-H 红外吸收有响应,选择性高,基线稳定,重复性好;针对极稀溶液的超高分子量聚乙烯,依旧保持很高的信噪比,能够直接进行定量分析.
曲江县15220323205: 凝胶渗透色谱法测定分子量中为什么分散系数不一样 - ?
景堂太可: GPC实验室为了检测物质的分子量分布,样品浓度大与小,只会影响整个色谱图谱的大小,不会对整个数据产生较大影响.当然,样品太稀会导致两头的数据有较大的误差.
曲江县15220323205: 凝胶渗透色谱分析中,分子洗脱顺序并解释? - ?
景堂太可: 液相色谱原理大多是分配色谱,就是说样品被固定相(柱子填料)吸附以后,在流动相洗脱过程中,样品的极性不同,在流动相中溶解的浓度也不同,有的可以互溶,有的不容,有的有一定溶解度.就可以根据这个原理进行分离.与固定相作用时间长的后洗脱,不易吸附的随着流动相流动最先被洗脱出来
曲江县15220323205: GPC法测一高分子量的聚乙烯分子量和分子量分布能用THF做溶剂吗,为什么,若不行,应该选用何种溶剂呢? - ?
景堂太可: 凝胶渗透色谱(GPC)是分析高聚物分子量分布的好方法,但同时也存在一定的问题,即聚烯烃由于部分结晶只能在高温下溶解在高沸点的溶剂中,例如1,2,4-三氯苯或者邻二氯苯. 聚烯烃GPC典型测试条件如下 ■色谱柱: PL-Gel Olexis(300*7.5mm)三柱并联; ■注射体积:200μl; ■淋洗液:三氯苯(TCB)+0.0125%BHT; ■流速:1.0ml/min; ■温度:160℃; ■检测器:组合使用光扫描检测器和粘度检测器对绝对摩尔质量分布进行RI检测或三重检测. 与楼上同问...同学你是工大的吧
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景堂太可: 1.粘度法测相对分子量(粘均分子量Mη) 用乌式粘度计,测高分子稀释溶液的特性粘数[η],根据Mark-Houwink公式[η]=kMα,从文献或有关手册查出k、α值,计算出高分子的分子量.其中,k、α值因所用溶剂的不同及实验温度的不同而具有不同...
曲江县15220323205: 如何用高效液相色谱(HPLC)进行蛋白质的纯度检测及含量测定?或者测分子量? - ?
景堂太可:[答案] 首先,蛋白质的测定一般用凝胶渗透色谱分子量测定:用HPLC测定几个分子量已知的蛋白质,绘制分子量与调整保留时间相对应的标准曲线,然后再在相同条件下测未知蛋白的保留时间,用标准曲线对照即可的未知蛋白的分子量;含...
曲江县15220323205: 用凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量为什么要用标样进行标定 - ?
景堂太可: 凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果.凝胶色谱法又称分子排阻色谱法. 凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六...
曲江县15220323205: gpc凝胶渗透色谱测试的是数均分子量吗 - ?
景堂太可: 不是 凝胶渗透色谱测试的是重均分子量(Mw)和分子量分布(Mw/Mn)