为什么测A260 / A280,他表示什么?

作者&投稿:安斩 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
为什么测A260/A280,他表示什么~

这是测核酸浓度和纯度用的。用紫外分光光度计测量样品时,不同成分的样品会有不同的吸光度。260纳米(nm)是核酸的最高吸收峰的吸收波长,280nm则是蛋白和酚类的。一般用A260/A280来检验DNA和RNA的纯度,纯DNA的这个比值约为1.8,纯RNA约为2.0.。

A260/A280你如果说的是原纸的话,那么表示的意思就是纸的克重为260克或者280克。如果是其他的物品,请你标示下。根据不同的东西标示方法不一样的。

这个比值是用来测量核酸纯度的。纯净的DNA和RNA在A260和A280都有吸收值,但以260最高。而核酸提取过程中最主要的污染物蛋白质在A280处有强烈的吸收值,所以计算这两个吸收峰的比值就可以确定核酸的纯度。DNA的这个值一般是1.8~2.0,而RNA则是2.0。值得注意的是,这个比值并不能很好的反应出核酸的纯度,简单来说寡聚核酸会造成A260值升高,如果核酸有降解,则会导致A260/A280值上升。另外,如果A280值偏高,并不一定是蛋白污染。蛋白在A280有吸收值是因为其苯丙氨酸等氨基酸残基中所含有的苯环的缘故,所有含苯环的化合物都会在A280有吸收峰。所以如果A280升高虽然有最有可能是蛋白污染,但也有可能是其他苯环物质。如植物DNA提取过程中的多酚类物质污染。另外,如果要求高的话,我们还会要求测量A230的值,正常情况下,核酸的A260/A230和A260/A280是一致的,如果这个值上升则样品可能会含有多糖类的污染。

这个比值是在测量DNA,RNA提纯后的纯度的,

如果有蛋白质污染,这个比值就比较小。因为蛋白质在280处有吸收值。高纯度的DNA、RNA这个比值应该在1.8-2左右。

这个网页有几个图,你注意看最下方的那个,纵坐标是比值,横坐标是纯度,
http://www.biotek.com/resources/articles/nucleic-acid-purity-a260a280.html

A280是指氨基酸的紫外光吸收的最大峰值在280nm波长。用来分析蛋白质的含量。A260则是核酸分子的紫外吸收最大峰值在260nm。用来对核酸、核苷酸、核苷和碱基进行定性和定量分析。

A260 / A280的比值, 用于评估样品的纯度, 因为蛋白的吸收峰是280 nm。 纯净的样品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

是RNA/DNA吧,RNA在260nm有吸收峰,而DNA在280nm有吸收峰


汉南区19573285205: 测A260/A280 A260/A230 就知道 DNA 纯不纯,这是为什么 -
文适可朋: 这是测核酸浓度和纯度用的.用紫外分光光度计测量样品时,不同成分的样品会有不同的吸光度.260纳米(nm)是核酸的最高吸收峰的吸收波长,280nm则是蛋白和酚类的.一般用A260/A280来检验DNA和RNA的纯度,纯DNA的这个比值约为1.8,纯RNA约为2.0..

汉南区19573285205: 提取基因组dna后,怎么判断dna纯度与质量 -
文适可朋: 用紫外分光光度计测OD值 A260/A280正常1.8左右 如果制备的DNA样品A260/A280<1.7,说明样品中含酶和蛋白质过高,应将样品用酚、氯仿、异戊醇抽提,再用乙醇沉淀DNA A260/A280>2,说明样品中RNA过高,可用RNase消化后,用酚、氯仿、异戊醇抽提,再用乙醇沉淀DNA

汉南区19573285205: 为什么测出的RNA比值还可以,大概是1.8 -
文适可朋: 提取细胞RNA之后,为什么要测RNA浓度 1、提取RNA测浓度时 A260/A280 大于3的原因可能是降解. 2、一般对于DNA,纯净的时候比值是1.8,而对于RNA则是接近2.0.如果超过这个值,那么最有可能的就是核酸降解了,因为寡聚的核酸和...

汉南区19573285205: dna纯度浓度测定时, 为什么测230nm处的od -
文适可朋: 除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如 A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0.A 320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品,A 320 一般是 0.

汉南区19573285205: 测量核酸纯度的时候 A260/A280 为什么DNA的和RNA的不一样(DNA>1.8 RNA>2.0)?A260不就是核酸的吸光值嘛 为什么DNA的和RNA的不一样? -
文适可朋:[答案] 很简单,因为DNA和RNA的结构不一样,所以吸光能力不一样. 多说一句,单链DNA和双链DNA的吸光能力也有差别.

汉南区19573285205: 求助RNA浓度的问题 -
文适可朋: 1、提取RNA测浓度时A260/A280大于3的原因可能是降解.2、一般对于DNA,纯净的时候比值是1.8,而对于RNA则是接近2.0.如果超过这个值,那么最有可能的就是核酸降解了,因为寡聚的核酸和核苷酸在260的吸收峰比长链核苷酸要大,所以会使比值上升.

汉南区19573285205: 测量核酸纯度的时候 A260/A280 为什么DNA的和RNA的不一样(DNA>1.8 RNA>2.0)? -
文适可朋: 很简单,因为DNA和RNA的结构不一样,所以吸光能力不一样. 多说一句,单链DNA和双链DNA的吸光能力也有差别.

汉南区19573285205: 如何根据Maker判断DNA浓度
文适可朋: marker都是有浓度的,可以根据对比marker和DNA条带的亮度大体估计.建议DNA的浓度用测A260的方法去测,这个方法是最普遍应用的.

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