什么是报告基因检测法？
报告基因 (reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。
作为报告基因，在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件：(1)已被克隆和全序列已测定；(2)表达产物在受体细胞中不存在，即无背景，在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物；(3)其表达产物能进行定量测定。
在植物基因工程研究领域，已使用的报告基因有以下几种：胭脂碱合成酶基因(nos)、章鱼碱合成酶基因(ocs)、新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)、氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、庆大霉素转移酶基因、葡萄糖苷酶基因、荧光酶基因等。nos、ocs这两个基因是致瘤土壤农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)的Ti质粒特有的，对Ti质粒进行改造，用相应的致瘤农杆菌转化植物体时，如果外源基因转入植物体中，则这两种报告基因在植物根茎叶中均能表达，不受发育调控，检测时直接用转化体提取液进行纸电泳，染色后在紫外光下观察荧光即可。nptⅡ、cat及庆大霉素转移酶基因，均为抗生素筛选基因，相关的酶可以对底物进行修饰(磷酸化、乙酰化等)，从而使这些抗生素失去对植物生长的抑制作用，使得含有这些抗性基因的转化体能在含这些抗生素的筛选培养基上正常生长，也可以用转化体提取液体，外用同位素标记，放射自显影筛选转化体。目前常用的一种报告基因是β-D-葡萄糖苷酶基因，该酶催化底物形成β-D-葡萄糖苷酸，它在植物体中几乎无背景，组织化学检测很稳定，可用分光光谱、荧光等进行检测。荧光酶基因(luc)是1985年从北美荧火虫和叩头虫cDNA文库中克隆出来的，该酶在有ATP、Mg2＋、O2和荧光素存在下发出荧光，这样就可用转基因植物整株或部分直接用X-光片或专门仪器进行检测。
在动物基因表达调控的研究中，报告基因也被广泛应用。常用的有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、β-半乳糖苷酶基因、二氢叶酸还原酶基因、荧光酶基因等。cat基因作为报告基因，检测时可通过放射自显影观察。荧光酶基因作为报告基因，具有检测速度快、灵敏度比cat基因高30～1000倍、费用低、不需使用放射性同位素等优点，得到了广泛的采用。
此外，在反式作用因子相互作用的检测方式枣酵母双杂交体系中，可通过报告基因的表达，研究蛋白质与蛋白质之间的相互作用。双杂交体系是由报告基因转录调控区、报告基因及一对可以相互作用的杂合反式作用因子组成。近年来从上述杂交体系中发展出的单一杂交体系技术，也是根据报告基因表达量的检测筛选出与已知顺式作用元件相结合的未知因子的DNA，该项技术正广泛应用于克隆细胞中含量微弱且用生化手段难以纯化的反式作用因子。
报告基因（reporter：gene）是指其编码产物能够被快速地测定的一类特殊用途的基因，常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官，并可以方便快速检测其表达活性。
可见报告基因实质是起到了判断目的基因是否已经成功地导入到受体细胞并且表达的标记基因的作用。作为理想的植物报告基因应具备以下特征：①编码的产物是惟一的，并且对受体细胞无毒；
②表达产物及产物的类似功能在未转化的细胞内不存在，即无背景；
③产物表达水平稳定，便于检测等。
转基因植物常用的报告基因主要有β-葡萄糖醛酸乙酰转移酶（β-glucuronidase）基因emphasis：role=italicgusemphasis、胭脂碱合成酶（nopaline：synthase）基因emphasis：role=italicnosemphasis、章鱼碱合成酶（octopine：synthase）基因emphasis：role=italicocsemphasis、荧光素酶（luciferase）基因emphasis：role=italiclucemphasis和绿色荧光蛋白（green：fluorescent：protein）基因emphasis：role=italicgfpemphasis等。
报告基因（reporter：gene）是指其编码产物能够被快速地测定的一类特殊用途的基因，常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官，并可以方便快速检测其表达活性。
可见报告基因实质是起到了判断目的基因是否已经成功地导入到受体细胞并且表达的标记基因的作用。作为理想的植物报告基因应具备以下特征：
1、编码的产物是惟一的，并且对受体细胞无毒。
2、表达产物及产物的类似功能在未转化的细胞内不存在，即无背景。
3、产物表达水平稳定，便于检测等。
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什么是报告基因检测法?
报告基因（reporter：gene）是指其编码产物能够被快速地测定的一类特殊用途的基因，常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官，并可以方便快速检测其表达活性。可见报告基因实质是起到了判断目的基因是否已经成功地导入到受体细胞并且表达的标记基因的作用。作为理想的植物报告基因应具备以下特征...
什么是标记基因和报告基因
什么是标记基因和报告基因 标记基因通常用来检验重组DNA载体转化成功与否，或者检测目的基因在植物细胞或组织中的定位。常用的标记基因是一些抗生素抗性基因，如卡那霉素抗性基因、潮霉素标记基因等。如：某种具有氨苄抗性基因质粒（该基因即可认为标记基因），与外源DNA片段组合形成重组质粒，并被转入受体细胞后，...
什么是报告基因?
报告基因 (reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。作为报告基因...
报告基因的定义及常见报告基因
氯霉素乙酰转移酶（CAT）: 通过催化氯霉素的乙酰化，CAT提供了多种检测方法，尽管放射性检测手段操作复杂，但非放射性方法如ELISA和荧光标记检测也日益流行。β-半乳糖苷酶（β-gal）: 作为内部对照，β-gal用于检测其他报告基因的表达，其简单易测的特性使其在实验中扮演重要角色。分泌性人胎盘碱性磷酸酶...
报告基因名词解释
关于报告基因名词解释如下：处于另一基因下游并可反映转录及上游基因表达水平的基因。详细解释：报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
什么叫基因检测,有什么具体内容吗?
基因检测是通过血液、其他体液、或细胞对DNA进行检测的技术，是取被检测者外周静脉血或其他组织细胞，扩增其基因信息后，通过特定设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测，分析它所含有的基因类型和基因缺陷及其表达功能是否正常的一种方法，从而使人们能了解自己的基因信息，明确病因或预知身体患某种疾病的...
荧光素酶报告基因检测
然后转染至细胞中，通过比较过表达或者干扰miRNA后，检测报告基因表达的改变（以萤火虫荧光素酶为报告基因，以海肾荧光素酶为内参基因）可以定量反映miRNA对目的基因的抑制作用。结合定点突变等方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。常用荧光素酶报告基因载体：1、pRL-TK这个载体是由Promega开发的，...
什么是基因检测
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什么是基因?为什么要做基因检测。
人体的各种性状和疾病是基因和环境共同作用的结果,基因只对性状产生部分作用,基因是否表达也受到内外环境的较大影响,因此基因检测报告不可以直接用作临床治疗的依据,并且脱离个体环境来判断基因的作用也是不可取的。在此前提下,基因检测报告对于了解人体各项特征仍然具备一定的参考意义。 抢首赞 已赞过 已踩过< 你对...
外源基因表达的检测是什么?
1.报告基因的酶法检测 主要的报告基因，例如Gus基因、Cat基因、冠瘿碱合成酶基因、NptⅡ基因和荧光素酶基因皆可根据各自的功能，采用酶法检测。2.外源基因转录水平上的检测。Northern杂交（Northernblotting）以RNA为探针，检测外源基因转录产物特异mRNA。Northern杂交也有斑点杂交和印迹杂交。斑点杂交只需将...
逄泊小儿： 什么是标记基因和报告基因 标记基因通常用来检验重组DNA载体转化成功与否,或者检测目的基因在植物细胞或组织中的定位.常用的标记基因是一些抗生素抗性基因,如卡那霉素抗性基因、潮霉素标记基因等.如:某种具有氨苄抗性基因质...
阿坝县19320067430： 萤火虫中的荧光酶有什么作用 - ？
逄泊小儿： 荧光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验.荧光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中.研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成荧光素酶.间接体外成像是一种...
阿坝县19320067430： 报告基因的列举 - ？
逄泊小儿： (1)最常用的报告基因大多是编码抗生素抗性蛋白的基因,通过检查产物是否具有抗生素的抗性来确定基因的表达情况. (2)氯霉素乙酰基转移酶(CAT):该报告基因来源于大肠杆菌转位子9,是第1个用于检测细胞内转录活性的报告基因.氯霉素...
阿坝县19320067430： 基因检测有哪些方法 - ？
逄泊小儿： 检测基因表达的方法: 转录水平检测:RT-PCR,real-time PCR,northern blot 翻译水平检测:western blot 还有直接检测,如报告基因、融合荧光蛋白等.
阿坝县19320067430： 荧光素酶报告基因的简介 - ？
逄泊小儿： Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统.荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence).然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光.荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达.是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法.
阿坝县19320067430： 为什么质粒不是报告基因 - ？
逄泊小儿： 报告基因 (reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因.而质粒是存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.整合有报告基因的重组质粒才是报告质粒.把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体.
阿坝县19320067430： 鉴定转录因子与启动子结合的方法和原理 - ？
逄泊小儿：[答案] 一般有体外和体内两种较为常用的方法: 体外:用EMSA 通常将纯化的蛋白和32P同位素标记的DNA探针(取promoter部... 然后再放射自显影的仪器上就可以看到条带,如果条带移动得慢,就是有结合. 体内:报告基因方法 就是将你想要检测的...
阿坝县19320067430： 基因工程中标记基因的作用 - ？
逄泊小儿： 标记基因,原本是基因工程的专属名词,但是现在它已经成为一种基本的实验工具,那么标记基因的作用有哪些呢?和报告基因的差别又是什么?据基因学资料显示,标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用....
阿坝县19320067430： 怎样检测 双荧光素酶报告基因检测试剂盒 - ？
逄泊小儿： (1) 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点.(2)设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中.(3)筛选阳性克隆,测序.扩增克隆并提纯质粒备用.
