ti质粒转化植株的过程
1. 根癌农杆菌对植物细胞的识别和附着。
2. 根癌农杆菌对植物信号物质的感受。
3. 根癌农杆菌Ti质粒上的vir基因以及染色体上操纵子的活化。
4. T-DNA复合体的产生。
5. T-DNA复合体的转运。
6. T-DNA整合到植物基因组中。
在这些步骤中，Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）是主要负责将新的遗传信息传递到植物细胞中的关键部分。
1、用打孔器从消毒叶片上取下直径为25mm圆形叶片，即叶盘。
2、将叶盘放入培养至对数生长期的根癌农杆菌液浸泡几秒钟，使根癌农杆菌侵染叶盘。然后用滤纸吸干叶盘上多余的菌液，将这种经侵染处理过的叶盘置于培养基上共培养23d。
3、转移到含有头孢霉素或羧苄青霉素抑菌剂的培养基中，除去根癌农杆菌。与此同时在该培养基中加入抗生素进行转化体的筛选，使转化细胞再生为植株。
ti质粒转化植株的过程
Ti质粒转化植物细胞的过程主要分为以下几个步骤：1. 根癌农杆菌对植物细胞的识别和附着。2. 根癌农杆菌对植物信号物质的感受。3. 根癌农杆菌Ti质粒上的vir基因以及染色体上操纵子的活化。4. T-DNA复合体的产生。5. T-DNA复合体的转运。6. T-DNA整合到植物基因组中。在这些步骤中，Ti质粒上的...
已鉴定正确的质粒转化农杆菌后会出现假阳性吗
会，农杆菌侵染后的细胞最后发育成整个植还是只有植株的一部分很难确定，所以假阳性不可避免，最好用转好的植株提取DNA，再进行鉴定
根癌农杆菌Ti质粒介导的植物基因转化有哪些方法?
目前已建立了多种根癌农杆菌Ti质粒介导的植物基因转化方法，主要包括：（1）叶盘转化法：叶盘转化法（leaf：dish：transformation）是Monsanto公司Morsch等人（1985）建立起来的一种转化方法，其操作步骤为：首先用打孔器从消毒叶片上取下直径为25mm圆形叶片，即叶盘。再将叶盘放入培养至对数生长期的根癌...
农杆菌转化法的优点
农杆菌Ti质粒转化系统与其他基因转化体系相比，具有许多突出的优点：①该转化体系是模仿或称之为利用天然的转化载体系统，成功率高，效果好；②农杆菌Ti质粒转化系统的机理研究得最清楚，方法最成熟，应用也最广泛；③农杆菌Ti质粒转化系统转化的外源基因以单拷贝为多数，遗传稳定性好，并且多数符合孟德尔...
在基因工程中,如何将Ti质粒构建为转化载体?
【答案】：首先把原有的天然Ti质粒进行改造，即①切除致瘤基因，有利于组织培养和植株再生；②增加能引入外源基因的单一限制酶切位点；③插入选择性标记基因，通常采用抗菌素抗性标记；④装配一个高效启动子，通常可用植物核基因或T-DNA上的章鱼碱和胭脂碱合成酶基因启动子；⑤组建一个植物基因或T-DNA...
django中CERF是什么(2023年最新分享)
1996年Hirchick等人就利用水稻反转录转座子Tos17建立了水稻基因敲除体系(geneknock-outsystem),Tos17可以在组织培养过程中被激活,插入水稻基因组中,使基因失效〔3〕。1999年Sato等利用这一体系分离了6个水稻kn1—型同源异型框基因,发现了引起水稻植株矮化的突变基因OSH15〔9〕。 最近Lucas等将烟草中的有活性的Ty1-...
农杆菌转化实验步骤
农杆菌转化法的实验步骤 整个转基因体系的建立步骤大致可以归纳为：基因表达载体的构建－载体的农杆菌转化－农杆菌与植株共培养－转化植株的筛选－转化植株的鉴定。在每一步中都涉及到很多的方法与技术。1．获取目的基因：用限制性核酸内切酶分别切割下目的基因（如抗虫基因）和Ti质粒。可以采用双酶切，防...
植物基因转化的发根农杆菌介导转化法是怎样做的?
Ri质粒的T-DNA也存在冠瘿碱合成基因，且这些合成基因只能在被侵染的真核细胞中表达。与Ti质粒相同，Ri质粒基因转化载体的构建也主要采用有共整合载体和双元载体系统。由Ri质粒诱发产生的不定根组织，经离体培养后，一般都可再生完整的植株，因此，利用Ri质粒作为转基因植物的载体，同样具有诱人的前景。
农杆菌转化法的过程
农杆菌转化法的过程如下：转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上--进入农杆菌--导入植物细胞--目的基因整合到植物染色体的DNA上--目的基因得以稳定维持和表达。1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因。2、基因表达载体的构建:将目的基因与载体(大多数选用质粒)用DNA连接酶连接起来。3、将目的基...
...杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,则该植株的种子
可能是因为质粒被转进去后不一定有在复制吧，但是肯定在转录翻译产生蛋白质 能把解析发上来么，你问的有点抽象
赏该阿归： 转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上——进入农杆菌——导入植物细胞——目的基因整合到植物染色体的DNA上——目的基因得以稳定维持和表达1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因.2、基因表达载体的构建:将目的基因...
上甘岭区13741008038： 下图是利用基因工程和植物组织培养技术获得新植株的过程,请回答:(1)图中A表示Ti质粒的___,切割A需要使用___.(2)C→D过程需要使用___处理,... - ？
赏该阿归：[答案] (1)农杆菌的Ti质粒是拟核外环状DNA分子,分布在细菌细胞的细胞质,图中A表示Ti质粒的T-DNA;切割A需要使用限制性内切酶. (2)将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法,即常用Ca2+处理微生物细胞,使其成为能吸收周围环境中DNA分...
上甘岭区13741008038： 如何将外源基因导入植物细胞并表达 - ？
赏该阿归： 1、介导转化法 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤或发状根.根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,...
上甘岭区13741008038： 如何利用基因工程技术和植物细胞工程技术获得转基因植株 - ？
赏该阿归： 1农杆菌介导法 农杆菌的Ti质粒可以作为载体.Ti质粒上有两个区域,一个是T-DNA区,这是能够转移并整合进植物受体的区段;另一个是Vir区,它编码实现质粒转移所需的蛋白质.将待转化的外源基因先克隆在大肠杆菌质粒上,然后将此质粒...
上甘岭区13741008038： 科学家通过基因工程,成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株 -- 抗虫棉,其过程大致如图.(1)基因工程的核心是 -- ？
赏该阿归： (1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建. (2)将目的基因导入棉花细胞内使用了农杆菌转化法,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体上.这种导入...
上甘岭区13741008038： 植物转基因工程的基本过程是怎样的? - ？
赏该阿归：[答案] 您这题目太大了. 几种常用的植物转基因方法 BIOX.CN 2005-5-19 16:54:41 来源:生命经纬 遗传转化的方法按其是否需要通过组织培养再生植株可分成两大类,第一类据要通过组织培养再生植株,常用的方法有农杆菌介导转化法、基因枪法;另一类...
上甘岭区13741008038： 将目的基因与质粒重组,导入细菌中(农杆菌),用该细菌感染植物细胞,请问这过程是怎样的详细一点 - ？
赏该阿归： 用限制性核酸内切酶切割目的基因与Ti农杆菌质粒 然后用DNA连接酶连接目的基因与Ti农杆菌质粒 把含目的基因的Ti质粒转入农杆菌中 然后繁殖(含有目的基因的Ti质粒的)农杆菌 然后利用(含有目的基因的Ti质粒的)农杆菌侵染植物细胞的DNA 然后就可以在植物细胞内翻译成蛋白质
上甘岭区13741008038： 土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒(如图所示),在侵染植物细胞的过程中,其中的T - DNA片段转入植物的基因 - ？
赏该阿归： A、土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒,在侵染植物细胞的过程中,其中的T-DNA片段转入植物的基因组,所以若用Ti质粒作为抗旱基因的载体时,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏,故A正确;B、将目的基因导入细菌时,需要用Ca2+处理细菌,使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,故B正确;C、用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞,实质具有抗旱基因,再采用通过植物组织培养技术将受体细胞培养成具有抗旱基因的植物,故C正确;D、能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因,只能说明目的基因导入成功,不能说明该基因工程项目获得成功,故D错误. 故选:D.
上甘岭区13741008038： 何为＂转基因＂ - ？
赏该阿归： 一、植物的遗传转化20世纪70年代末80年代初,人们用野生型Ri和Ti质粒转化烟草和马铃薯细胞获得再生植株后,以Ti质粒为载体的植物遗传转化技术随之被建立.近年来植物的遗传转化技术得到了迅速...
