有限稀释法 为进行克隆化的简单有效方法,每孔接种的杂交瘤细胞数量是

作者&投稿:始雍 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
~ 【答案】:A
"克隆化"的目的是使每孔为单一细胞系分泌单一特异性抗体。因此,"有限稀释法"接种的杂交瘤细胞数量是每孔1个。


佳木斯市13015553582: 求有限稀释法(limiting dilution analysis,LDA)具体步骤 -
邬泥尼膜: 有限稀释法是一种常用的克隆方法. 将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数,计出1mL的细胞数. 用HT培养液稀释, 使细胞浓度为50~60个/mL,于96孔培养板中每孔加0.1mL(五六个细胞/孔).接种2排,剩余细胞悬液用HT培...

佳木斯市13015553582: 简述人工制备单克隆抗体的方法? -
邬泥尼膜: 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤...

佳木斯市13015553582: 单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义? -
邬泥尼膜: 哈哈~我们刚考到这题 原理: B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力.B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的.将这种B细胞与...

佳木斯市13015553582: 在单克隆抗体中,为何需要多次检测细胞阳性,有何目的 -
邬泥尼膜: 在单克隆抗体中,为何需要多次检测细胞阳性, 检测阳性,就是能产生特定抗体的杂交瘤细胞. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化.通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养.采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增.经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存.

佳木斯市13015553582: 如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养 -
邬泥尼膜: 融合后的细胞经过hat培养基选择后,只有杂交瘤细胞可以存货.但是,选出的杂交瘤细胞不一定就是能分泌研究者所需特定抗体的杂交瘤细胞.未将这些具有不同抗原特异性的杂交瘤细胞逐个分离,目前可用的方法有:有限稀释法、显微操作...

佳木斯市13015553582: 制备单克隆抗体的技术流程是怎样的呢?
邬泥尼膜: (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗... 融合细胞呈克隆生长,经有限稀释后(一般稀释至0.8个细胞/孔),按Poisson法计...

佳木斯市13015553582: 怎样制备单克隆抗体
邬泥尼膜: 这个在高三的生物选修很详细地说了... 难道楼主忘记了? 好啦..找给你... 1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠.免疫的方法取决于所用抗原的性质.免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法. 2)骨...

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