小鼠脾淋巴细胞怎么分离?最佳培养浓度是多少?

作者&投稿:学环 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
小鼠脾脏淋巴细胞体外培养是贴壁的还是悬浮的?亟待解决,麻烦大家啦!~

小鼠脾脏淋巴细胞在体外培养时是贴壁生长的。
在体外培养时,需要将脾脏淋巴细胞悬液离心,去除组织碎片和杂质,然后将淋巴细胞重新悬浮在培养液中。在培养过程中,淋巴细胞会贴壁生长并增殖。
需要注意的是,培养过程中要保持无菌条件,同时避免过度培养,以避免出现细菌和真菌的污染。此外,适当的细胞因子和生长因子的添加也能促进淋巴细胞的增殖和分化。
总之,小鼠脾脏淋巴细胞在体外培养时是贴壁生长的。

我正在做大鼠脾的B细胞分选,提供点参考:脾脏处理是可以不要理会包膜,剪3-5毫米就可以了。你没说过滤之前用胰酶消化没有,应该消化,消化完后用含有胎牛血清的培养基中止。然后过滤,这样得到的淋巴细胞可能会多些。贴壁细胞不是淋巴细胞。悬浮细胞才是淋巴细胞,体积很小,正常的是小而园亮。仅供参考!

便宜的方法是ficoll密度梯度离心,将脾脏匀浆成单细胞后分离,但不太纯,包含少量粒细胞,还有单核细胞,大部分是淋巴细胞。

贵的方法采用磁珠分离,美天旎和Stemcell公司提供了不同的方案,前者需要特殊的柱子、抗体、和分离架,价格比较贵。后者也需要一个特殊的磁力柱和抗体,但操作简单。

培养浓度看你用瓶子还是96-well, 5000-10000cell/well,估计瓶子用50000就好了。

楼主如果是高中生的话,第二个问题是超纲的,教材也根本没有提到,至于头个问题,只需要知道是用含特殊物质的有选择作用的培养基去分离就行了,也就是说只有你要分离的这种细胞能在这种培养基上生存,其他细胞都死掉了,于是你的分离目的也就达到了。楼主给分吧


如何从小鼠脾脏中分离T\/B淋巴细胞
我正在做大鼠脾的B细胞分选,提供点参考:脾脏处理是可以不要理会包膜,剪3-5毫米就可以了。你没说过滤之前用胰酶消化没有,应该消化,消化完后用含有胎牛血清的培养基中止。然后过滤,这样得到的淋巴细胞可能会多些。贴壁细胞不是淋巴细胞。悬浮细胞才是淋巴细胞,体积很小,正常的是小而园亮。仅供...

小鼠脾淋巴细胞怎么分离?最佳培养浓度是多少?
便宜的方法是ficoll密度梯度离心,将脾脏匀浆成单细胞后分离,但不太纯,包含少量粒细胞,还有单核细胞,大部分是淋巴细胞。贵的方法采用磁珠分离,美天旎和Stemcell公司提供了不同的方案,前者需要特殊的柱子、抗体、和分离架,价格比较贵。后者也需要一个特殊的磁力柱和抗体,但操作简单。培养浓度看你用...

小鼠脾脏有哪些细胞
小鼠脾脏细胞主要包括以下几种:1. 淋巴细胞:这是脾脏中的主要细胞类型之一。它们参与免疫应答,对抗病原体入侵。淋巴细胞可分为多种亚群,如T细胞、B细胞等。2. 巨噬细胞:这些细胞在脾脏中扮演着重要的角色,它们能够吞噬并清除老化的红细胞和病原体等外来物质。巨噬细胞在免疫应答中也起着关键作用。

流式细胞术检测小鼠脾脏t细胞亚群结果怎么分析
1 先在FSC\/SSC散点图gate出淋巴细胞 2 然后把淋巴细胞显示到柱状图,gate出CD3阳性的(T细胞)3 再把T细胞显示到散点图,横坐标,纵坐标分别为CD4和CD8

流式细胞术检测小鼠脾脏t细胞亚群结果怎么分析
简单的概括:1先在FSC\/SSC散点图gate出淋巴细胞2然后把淋巴细胞显示到柱状图,gate出CD3阳性的(T细胞)3再把T细胞显示到散点图,横坐标,纵坐标分别为CD4和CD8

为什么单克隆抗体实验要用小鼠脾脏中的B淋巴细胞?
小鼠起了免疫反应后,主要能分泌特异性抗体的细胞就是脾脏中的B细胞(当然分泌的特异性抗体就包括了抗羊红细胞的抗体),把这个细胞提取出来和骨髓瘤融合,可以得到持续分泌抗羊红细胞的抗体细胞。脾脏是最大的免疫器官,里面的B细胞多啊,好提取。Balb\/c小鼠总共约有脾细胞有1亿个,百分之一是B细胞。

小鼠淋巴细胞为什么从脾脏提取
脾脏是机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨嗜细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心。所以淋巴细胞要从脾脏提取

【求助】请问小鼠脾脏淋巴细胞中CD4CD25Treg所占比例是多少
淋巴细胞分离液分离脾脏淋巴细胞 然后用FITC -CD4 和 PE-CD25抗体标记上流式检验可是看不见CD25阳性那一定是技术问题,你先调整一下机器的电压和补偿,Treg的CD25表达峰度不是非常高,如果补偿有问题很可能会假阴性。其次你再摸索一下抗体标记的浓度,找个高手可能容易些。Treg标记一般比较认可的是CD4和...

pbs缓冲液在小鼠脾脏淋巴细胞分离的作用
吸走上层非细胞层弃之,吸出单个核层在另 外无菌试管中,因为淋巴细胞分离液对细胞有毒性作用,加入 PBS 离心洗两遍

...脾细胞分离纯化有的人加红细胞裂解液,有的人直接加淋巴细胞...
提不管什么样的提取方法 最终提取脾淋巴细胞内都会混有大量红细胞,所以啦要加红细胞裂解液 如PI的等等

武乡县18560879018: 小鼠脾淋巴细胞怎么分离?最佳培养浓度是多少? -
全点复方: 便宜的方法是ficoll密度梯度离心,将脾脏匀浆成单细胞后分离,但不太纯,包含少量粒细胞,还有单核细胞,大部分是淋巴细胞.贵的方法采用磁珠分离,美天旎和Stemcell公司提供了不同的方案,前者需要特殊的柱子、抗体、和分离架,价格比较贵.后者也需要一个特殊的磁力柱和抗体,但操作简单.培养浓度看你用瓶子还是96-well, 5000-10000cell/well,估计瓶子用50000就好了.

武乡县18560879018: 小鼠脾淋巴细胞怎么分离 -
全点复方: 外周血中单个核细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同.淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075∽1.090之间而近似于等渗的溶液.

武乡县18560879018: Anti - MouseCD4FITC50ug做小鼠脾脏的淋巴细胞分?
全点复方: 50ug是指蛋白含量.具体的最佳浓度要靠实验摸索.一般建议从1:200开始,可以一直稀释到1:1000. 找到适合的浓度后,以后就统一用这个浓度.要注意你的细胞浓度要前后保持一致

武乡县18560879018: 小鼠脾脏元代淋巴细胞培养,需要哪些培养基和试剂??品种及种类请详细介绍,谢谢!! -
全点复方: 脾淋巴细胞么?我们实验室用的细胞培养用RPMI 1640培养液、胎牛血清( FCS) 、青霉素-链霉素(P-S双抗)等均购自美国GIBCO公司,使用前按照89:10:1比例配制成完全1640培养液.

武乡县18560879018: 小鼠脾细胞用什么培养液培养比较好 -
全点复方: 1640培养基 hyclone的 我一直在使用

武乡县18560879018: 小鼠淋巴细胞为什么从脾脏提取 -
全点复方: 脾脏是机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨嗜细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心.所以淋巴细胞要从脾脏提取

武乡县18560879018: 制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般在哪里采集?为什么? 谢谢! -
全点复方: 小鼠的B淋巴细胞一般在小鼠的脾脏里采集,不需要分离出B细胞,把脾细胞制成单细胞悬液就可以了,这个途径简单,可以获得100万个以上的细胞(包括B细胞,T细胞.人的B细胞可以在外周血中采集.

武乡县18560879018: 小鼠淋巴细胞分离液和人的淋巴细胞分离液一样吗 -
全点复方: 人淋巴细胞分离液不能分离小鼠的淋巴细胞的 人淋巴细胞分离液主要成分是葡聚糖与泛影酸葡甲胺,而小鼠淋巴细胞分离液主要成分是碘克沙醇 因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同,所以不同的动物种属及被不同的分离细胞的分离液一般不能混用 所以人淋巴细胞分离液不能分离小鼠的淋巴细胞的

武乡县18560879018: 【求助】请问小鼠脾脏淋巴细胞中CD4CD25Treg所占比例是多少
全点复方: 淋巴细胞分离液分离脾脏淋巴细胞 然后用FITC -CD4 和 PE-CD25抗体标记上流式检验可是看不见CD25阳性那一定是技术问题,你先调整一下机器的电压和补偿,Treg的CD25表达峰度不是非常高,如果补偿有问题很可能会假阴性.其次你再摸...

武乡县18560879018: 如何从小鼠骨髓中分离和培养DC -
全点复方: 1、 取骨髓,对倍稀释 2、 用滴管沿管壁缓慢加入淋巴细胞分离液(45度角倾斜,尽量产生气泡,起到缓冲作用) 3、 2000转,离心30分钟 4、 吸取白膜层,(沿管壁)交替多次吸取,加入5倍体积以上的PBS液 5、 1500转,离心15分钟(洗...

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