试剂蒽酮的鉴别方法

蒽酮试剂怎样配制~

应该首先加入132mL水，然后慢慢的加入400mL浓硫酸，边加边搅拌散热。等到加完而且冷却到室温以后，最后加入2.4g蒽酮，搅拌溶解，避免浓硫酸溶解时的高温对蒽酮影响。仅供参考

1、方法提要
食品中相对分子质量>1×104的高分子物质在80%乙醇溶液中沉淀，与水溶液中单糖和低聚糖分离，用碱性二价铜试剂选择性地从其他高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的多糖，用苯酚-硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量，其显色强度与粗多糖中葡聚糖的含量成正比，以此计算食品中粗多糖含量。

2、主要仪器
（1）分光光度计。
（2）离心机（3000r/min）。 （3）旋转混匀器。

3、试剂
本方法所用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
（1）乙醇溶液（80%）：20mL水中加入无水乙醇80mL，混匀。
（2）氢氧化钠溶液（100g/L）：称取100g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L，加入固体无水硫酸钠至饱和，备用。
（3）铜试剂储备液：称取3.0gCuSO4•5H2O，30.0g柠檬酸钠，加水溶解并稀释至1L，混匀，备用。
（4）铜试剂溶液：取铜试剂储备液50mL，加水50mL，混匀后加入固体无水硫酸钠12.5g并使其溶解。临用新配。
（5）洗涤剂：取水50mL，加入10mL铜试剂溶液、10mL氢氧化钠溶液，混匀。
（6）硫酸溶液（10%）：取100mL浓硫酸加入到800mL左右水中，混匀，冷却后稀释至1L。
（7）苯酚溶液（50g/L）：称取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀释至100mL，混匀。溶液置冰箱中可保存1个月。
（8）葡聚糖标准储备液：准确称取相对分子质量5×105已干燥至恒重的葡聚糖标准品0.5000g，加水溶解，并定容至50mL，混匀，置冰箱中保存。此溶液1 mL含10.0mg葡聚糖。
（9）葡聚糖标准使用液：吸取葡聚糖标准储备液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，置冰箱中保存。此溶液1mL含葡聚糖0.10mg。

4、测定步骤
（1）样品处理：
a、沉淀粗多糖：准确吸取液体样品5.0mL，置于50mL离心管中，加入无水乙醇20mL，混匀5min后，以3000r/min离心5min，弃去上清液，反复操作3~4次。残渣用水溶解并定容至5.0mL，混匀后，供沉淀葡聚糖。
b、沉淀葡聚糖：准确吸取b项终溶液2mL置于20mL离心管中，加入100g/L氢氧化钠溶液2.0mL铜试剂溶液2.0mL，沸水浴中煮沸2min，冷却，以3000r/min离心5min，弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤，离心后弃去上清液，反复操作3次，残渣用10%（体积分数）硫酸溶液2.0mL溶液并转移至50mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液为样品测定液。
（2）标准曲线的绘制：准确吸取葡聚糖标准使用液0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL（相当于葡聚糖0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg）分别置于25mL比色管中，准确补充水至2.0mL，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，在旋转混匀器上混匀，小心加入浓硫酸10.0mL，于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比，1cm比色皿测定吸光度值。以葡聚糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
（3）样品测定：准确吸取样品测定液2.0mL置于25ml比色管中，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，在旋转混匀器上混匀，小心加入浓硫酸10.0mL于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min，冷却至室温，用分光光度计在485nm波长处，以试剂空白为参比，1cm比色皿测定吸光度值。从标准曲线上查出葡聚糖含量，计算样品中粗多糖含量。同时做样品空白实验。

5、结果计算
(m1-m2)×V1×V3×V5 X= —————————— m3×V2×V4×V6式中 X—样品中粗多糖含量（以葡聚糖计）（mg/g）；
m1—样品测定液中葡聚糖的质量（mg）；
m2—样品空白液中葡聚糖质量（mg）；
m3—样品质量（g）；
V1 —样品提取液总体积（mL）；
V2—沉淀粗多糖所用样品提取液体积（mL）；
V3 —粗多糖溶液体积（mL）；
V4—沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液体积（mL）；
V5—样品测定液总体积（mL）；
V6—测定用样品测定溶液体积（mL）。


6、准确度与精密度在不同食品中进行不同浓度的加标回收实验，回收率为87.8%~110.87%，不同实验室对同一样品进行10次测定结果的相对标准偏差为5.8%。

试剂蒽酮的鉴别方法：
例：糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为630纳米,故在此波长下进行比色.

糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的定量.

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物,不但可以测定戊糖与己糖,而且可以测所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应X 所以用愈酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量.在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下,用意酮法可以一次测出总量,省去许多麻烦,因此,有特殊的应用价值.但在测定水溶性碳水化合物时,则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中,不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与意酮试剂发生反应而增加了测定误差.此外,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅,故测定糖的混合物时,常因不同糖类的比例不同造成误差,但测定单一糖类时,则可避免此种误差.

应该首先加入132ml水，然后慢慢的加入400ml浓硫酸，边加边搅拌散热。等到加完而且冷却到室温以后，最后加入2.4g蒽酮，搅拌溶解，避免浓硫酸溶解时的高温对蒽酮影响。仅供参考

中药化学成分的预试验
系统预试法——应用一些简单的定性试验，对中药中所含各类化学成分作全面检查。
单项预试法——根据需要，有重点的检查某类成分或某药效成分。
方法：试管反应+薄层层析检查
中草药主要来源于植物。植物的化学成分较复杂，有些成分是植物所共有的，如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。有些成分仅是某些植物所特有的，如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。
各类化学成分均具有一定的特性，一般可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一。如药材样品折断后，断面不油点或挤压后有油迹者，多含油脂或挥发油；有粉层的多含淀粉、糖类；嗅之有特殊气味者，大多含有挥发油、香豆精、内酯；有甜奈者多含糖类；味若者大多含生物碱、甙类、苦味质；味酸者含有有机酸；味涩者多含有鞣质等等。
中草药所含化学成分均为多类的混合物，分析时常常互相干扰，不易得到正确结果。因此需根据中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质，再用各类成分的鉴别反应加以鉴别。

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汝州市19651397607： 用化学方法怎么区别大黄酚、大黄酚蒽酮、香豆素、黄酮 - ？
井华琥乙： 使用盐酸-镁粉反应和酚羟基的特异性络合显色反应及氧化还原反应

汝州市19651397607： 怎样鉴别“异丙醇,甘油,乙醛,丙酮,苯酚,三乙” - ？
井华琥乙： 首先我不知道你说的三乙是什么东西,其他的鉴定如下: 1、加溴水有白色沉淀的是苯酚. 2、其余四个加碘和氢氧化钠,不发生碘仿反应(碘仿反应呈现黄色)的是甘油. 3、异丙醇/乙醛/丙酮:发生银镜反应的是乙醛. 4、异丙醇/丙酮TLC用2、4-二硝基苯肼显色,有黄色的为丙酮.或者加吉拉德试剂,有沉淀的是丙酮.

汝州市19651397607： 如何鉴别异丙醇与丙酮 - ？
井华琥乙： 首先,取四种试剂适量.加入银氨溶液,发生银镜反应的为 丙醛.其次,取剩余三种试剂适量.加入nahso3 有沉淀生成的为 丙酮.最后,取剩余两种试剂适量,加热为蒸汽,通氧气氧化后,能够发生银镜反应的为 正丙醇.剩余为 异丙醇.

汝州市19651397607： 用简单的化学方法鉴别丙醛,丙酮,丙酸 - ？
井华琥乙： 测ph值.ph值最小的是丙酸. 用新制银氨溶液或氢氧化铜溶液,有银镜反应或产生砖红色沉淀的是丙醛,没有反应的是丙酮.知识延伸:1.醛酮的鉴别方法就是银镜反应或者新制氢氧化铜.所谓的新制氢氧化铜法即斐林试剂,用来检测葡萄糖就是用这种方法,因为葡萄糖是多羟基醛.2.新制氢氧化铜的配置方法是氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液2:1混合,营造碱性环境,如果氢氧化钠少的话就会变成黑色,而不会出现砖红色.3.银氨溶液的配制方法是在洗净试管中,注入1mL硝酸银溶液,然后逐滴加入氨水,边滴边振荡,直到最初生成的沉淀刚好溶解为止,试管一定要洁净,否则不能生成光亮的银镜.

汝州市19651397607： 糖类一般用什么方法检测?比如左旋葡萄糖 - ？
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汝州市19651397607： 乙醇和2 - 丁酮和丁醛用什么鉴别? - ？
井华琥乙： 用化学复方法鉴别丁酮2丁烯醛 用化学方法鉴别乙酸,乙醇,2-丁酮 方法一:首先,用饱和碳酸氢钠溶液,只有乙醇制不能生成气泡.其次,再加酸性高锰酸钾溶液,只能草酸能使高锰酸钾褪色.方法二:先用I2/NaOH溶液与之作用,只有乙醇能生成黄百色晶体;剩余再加酸性高锰酸钾溶液,只能草酸能使高锰酸钾褪色.方法三:先用卢卡氏试剂,只有乙醇出现浑度浊;再对剩余二者用酸性高锰酸钾鉴别.

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井华琥乙： [a]多糖含有几百个或更多残基,但只有一个还原基团,因此它的还原能力极弱,对于他们的测定,应先将它们用酸水解成单糖组分. 蒽酮比色法是一种快速而简便的定糖方法,糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛及其衍生物,该衍生物与蒽酮发生反应...

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井华琥乙： 蒽酮 [ēn tóng] 蒽酮又称之为9,10-二氢蒽-9-酮;蒽酮,淡黄色针状晶体.不溶于水,溶于乙醇和热苯.不溶于冷氢氧化钠溶液,加热时溶解成蒽酚的碱金属盐.它的乙醇溶液呈蓝色荧光.用于制取苯绕蒽酮和染料.也用于色层分析试剂及体液中糖分的比色测定或肝脏组织中动物淀粉的测定等.

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井华琥乙： 实验装置和药品: 主要实验仪器: 试管 滴管 酒精灯 试管夹 烧杯 锥形瓶 布氏漏斗 抽滤瓶 pH试纸 水浴装置 主要化学试剂: 2,4—二硝基苯肼试剂 乙醛水溶液 丙酮 苯乙酮 稀硫酸 浓硫酸 95%乙醇 5%硝酸银 浓氨水 甲醛 苯甲醛 铬酸试剂 ...