常用的细胞因子检测方法有哪些
细胞因子主要是指由内分泌细胞分泌的一类可以参与免疫应答的蛋白多肽。对于细胞因子的检测方法主要有三种:细胞生物学检测、免疫学检测和分子生物学检测。细胞因子的发现依赖于其生物学活性,因此,建立了生物分析法用于细胞因子的检测。随后,用于检测实验溶液(如组织培养上清液)中细胞因子的免疫分析法被建立,并不断用于实验室研究。但准确地、可重复地测定细胞因子具有一定困难,主要原因是众所周知的细胞因子的含量极低(大部分都是以pmol/L计),同时存在着源于异嗜性抗体,类风湿因子以及特异的和非特异的细胞因子结合蛋白等[1,2] 的显著干扰。
一、免疫学检测方法包括 1.ELISA检测方法 2.RIA检测方法 3.免疫荧光技术
二、生物学检测方法包括体内和体外两种方法。体内法采用动物模型来检测细胞因子的含量,反映的是动物体内的生物学活性,参考价值大,但操作比较繁琐、成本高、影响因素多、实验周期长,故很少用。体外法主要是利用来源于白血病病人或实验性白血病动物模型的细胞株,根据细胞因子与细胞株之间作用原理不同又分为不同的检测方法。
三、分子生物学检测方法主要包括 1.Northern杂交法 2.反转录PCR(RT/PCR)法。
(2)免疫学检测法:细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性,可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子,常用的方法包括流式细胞术、ELlSA、RlA及免疫印迹法;
(3)分子生物学方法:目前公认的细胞因子的基因均已克隆化,较容易地得到某一细胞因子cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录PCR,细胞或组织原位杂交等。
(1)生物学检测法:又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。生物活性检测法又可分为: 1、细胞增殖法; 2、靶细胞杀伤法; 3、细胞因子诱导的产物分析法; 4、细胞病变抑制法。
(2)免疫学检测法:细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性,可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子,常用的方法包括ELlSA、RlA及免疫印迹法
(3)分子生物学方法:目前公认的细胞因子的基因均已克隆化,较容易地得到某一细胞因子cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录PCR,细胞或组织原位杂交等。具有灵敏、快速等优点,甚至从l~10个细胞中就可检出其中的特异mRNA
常用的细胞因子检测方法有哪些
(2)免疫学检测法:细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性,可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子,常用的方法包括流式细胞术、ELlSA、RlA及免疫印迹法;(3)分子生物学方法:目前公认的细胞因子的基因均已克隆化,较容易地得到某一细胞因子cDNA探针或根据已知的核苷酸序列...
10种常用细胞因子检测方法,看完这一篇就妥了
检测方法大全:<\/免疫学方法,如Western Blot(蛋白印迹,定性和半定量)、ELISA(酶联免疫,简便且定量)和ELISpot(细胞因子定位),揭示了细胞间的信号传递。生物学方法,如RT-PCR(反转录-PCR,敏感于低丰度表达,需要对照)和CBA(Cytometric Bead Array,快速多参数检测,信息丰富)揭示基因表达的实况...
细胞因子的检测有哪些常用的方法
一、免疫学检测方法包括 1.ELISA检测方法 2.RIA检测方法 3.免疫荧光技术 二、生物学检测方法包括体内和体外两种方法。体内法采用动物模型来检测细胞因子的含量,反映的是动物体内的生物学活性,参考价值大,但操作比较繁琐、成本高、影响因素多、实验周期长,故很少用。体外法主要是利用来源于白血病病人或...
细胞因子检测可以用哪些方法,简述其原理
对于细胞因子的检测方法主要有三种:细胞生物学检测、免疫学检测和分子生物学检测。细胞因子的发现依赖于其生物学活性,因此,建立了生物分析法用于细胞因子的检测。随后,用于检测实验溶液(如组织培养上清液)中细胞因子的免疫分析法被建立,并不断用于实验室研究。但准确地、可重复地测定细胞因子具有一定困难...
临床上最常用的测定细胞因子的方法是( )。
【答案】:A 免疫检验可分为两部分,一部分为利用免疫检测原理与技术检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞黏附分子等免疫相关物质;另一部分是利用免疫检测原理与技术检测体液中微量物质,如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素等。
有关细胞因子的ELISA测定方法,下列说法正确的是
【答案】:A 考点:对细胞因子免疫测定方法的认识。[解析]ELISA方法是目前临床最常用的细胞因子免疫测定方法,主要用于可溶性细胞因子的检测,其缺点是,测定的是细胞因子的免疫反应性,而不是细胞因子的生物活性。正常生理情况下,血循环中各种细胞因子的浓度极低,使用血清或血浆标本检测不出。酶联免疫斑点...
试述细胞因子的生物学检测法原理,常用的方法有哪些?
生物学检测法又称为生物活性检测法,可分为以下几类:细胞增殖法、靶细胞杀伤法、细胞因子诱导的产物分析法、细胞病变抑制法等。该法比较敏感,并能直接测定生物学功能,属于一种最可靠的方法,是科研部门最常用的技术,需要长期培养依赖性细胞株,步骤繁杂,影响因素多,是这一方法的缺点。
常用于体液标本细胞因子检测的方法是
【答案】:C 酶联免疫斑点试验( ELISPOT)已被越来越多地应用于类风湿因子、IFNγ等细胞因子分泌细胞的定量检测。流式细胞仪可以区分具有不同分泌特性的细胞亚群,如Th1、Th2细胞等。ELISA法具有特异、简便、易于推广和标准化等优点,广泛用于体液标本细胞因子以及细胞体外培养上清液中的细胞因子检测。
属于细胞因子免疫测定方法的是
【答案】:E 免疫测定方法有ELISA方法、流式细胞分析法、酶联免疫斑点试验、偏振荧光检测技术、免疫组化染色、激光共聚焦显微镜等。
皮肤细胞因子测量方法
免疫学测定是目前使用最为广泛的方法,主要利用细胞因子蛋白或多肽的抗原性,获得特异性抗血清或单克隆抗体,利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子。皮肤细胞因子有白细胞介素IL-1至IL-33、集落刺激因子、干扰素、生长因子与转化生长因子、肿瘤坏死因子等。
休昂林青: 以细胞因子作为抗体杂交. EMSA 等手段 都能. 细胞因子,分很多种类,有很多类型.看看情况寻找相关的检测方法.
富阳市13545654188: 细胞因子浓度的检测 - ?
休昂林青: 细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称,在免疫应答、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用.目前,细胞因子生物学活性检测和浓度测定方法主要有以下几类:1.细胞增殖法 许多细胞因子具...
富阳市13545654188: 如何测定细胞内的细胞因子? ?
休昂林青: 测定细胞内的细胞因子可用酶联免疫斑点试验.测定的基本步骤为:先用抗特定细胞因子的抗体包被固相微孔,再加入靶细胞培养,待靶细胞分泌细胞因子后,洗涤去除未结合于固相的细胞,然后加入相应的酶标抗特定细胞因子的抗体,测定中所用的包被抗体和酶标抗体应针对细胞因子的不同抗原表位.反应后洗涤板孔,加入酶的底物,显色测定,显色的深浅与结合于固相上的细胞内细胞因子量成正比,并可在光学显微镜下观察分泌细胞因子的细胞.
富阳市13545654188: 目前用于评价组织和血液中细胞因子的技术有哪些 - ?
休昂林青: 在血液病临床上常用的细胞因子有:干扰素、白细胞介素、促红细胞生成素、集落刺激因子等.干扰素(IFN )具有抗病毒、抑制细胞增殖及免疫调节功能.出IFNa 应用于慢性粒细胞白血病的治疗能有效地控制症状,取得血液学和细胞遗传学的...
富阳市13545654188: 细胞因子免疫学测定方法的主要优缺点各有哪些? ?
休昂林青: 免疫测定方法主要优点有:特异性高.使用特异的单克隆抗体,可用于单一细胞因子的检测.测定操作简便,无需维持依赖性细胞株.其主要缺点是:所测定的只是细胞因子的蛋白含量,与其生物活性不一定成正比.测定结果与所用的抗体的来源及亲和力有很大关系,使用不同来源和亲和力的单抗,对一标本测定得到的结果可能不同.测定下限不如生物活性测定方法.如标本中存在细胞因子的可溶性受体,可能会影响特异抗体对细胞因子的结合.标本中存在的各种细胞因子结合蛋白可能对细胞因子免疫测定产生干扰.
富阳市13545654188: 怎么样检测细胞因子? - ?
休昂林青: 目前,细胞因子已广泛应用于临床的已有EPO、IFN-α、G-CSF、GM-CSF以及试用于临床的白细胞介素等. 为了研究细胞因子在生理系统的作用以及了解细胞因子产品用于临床治疗的效果,进行细胞因子的检测就必不可少,而且用于临床诊断的细胞因子分析方法必须适用于常规操作. 细胞因子的检测尚未在临床诊断上广泛开展,已知目前采用的细胞因子检测方法均不完善,且不同的检测方法所得的结果差异较大,给临床治疗带来一定的困难. 因此,有必要了解各种检测方法的特性及影响细胞因子浓度的因素. 更多资料你去看看生物帮吧. http://www.bio1000.com/zt/cell/46213.html 可以多学习下,希望能帮到你.