RNA提取步骤是什么
称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g,倒入 100ml三角瓶中,加 NaCl 2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh。
2.分离
将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离。
3.沉淀RNA
将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内,并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却.待冷至10℃以下时,用6mol/L HCI 小心地调节pH值至2.0~2.5(注意严格控制pH)。调好后继续于冰水中静置10min,使沉淀充分,颗粒变大。
4.洗涤和抽滤
上述悬浮液以 4000r/min离心 10min,得到 RNA沉淀。将沉淀物放在 10ml小烧杯内,用95%的乙醇 5~10ml充分搅拌洗涤,然后在布氏漏斗上用射水泵抽气过滤,再用 95%乙醇5~10ml淋洗 3次。
5.干燥
从布氏漏斗上取下沉淀物,放在6cm表面皿上,铺成薄层,置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA制品称重,存放于干燥器内。
以下是从海水(富含Na+、Mg2+、Cl-等)中提取各种物质的流程图,根据如图...
从海水(富含Na+、Mg2+、Cl-等)中提取各种物质:海水蒸发得到氯化钠晶体,电解氯化钠得到钠和氯气,A为钠,金属钠燃烧和氧气反应生成淡黄色的过氧化钠,贝壳高温分解:CaCO3 高温 . CaO+CO2↑加入海水溶液中,CaO+H2O═Ca(OH)2,MgCl2+Ca(OH)2═Mg(OH)2↓+CaCl2,通过操作①过滤得到滤渣...
怎么从乙醇中提取clNa(杂质)
用蒸馏的方法比较好,乙醇的沸点比较低,稍微加热就能使其汽化。然后从实验室里找一个以前初中化学实验里经常用到的玻璃仪器,具体叫什么我忘记了,它是中间一根玻璃细管,外面再套了个大的玻璃管的,左右各有一个注水的口,你可以把乙醇与氯化钠的混合物倒入试管中,用橡皮塞塞紧,用橡皮管连接试管与...
盐矿提炼盐的方法
→新碱+新盐。2NaOH+CuSO4→Cu(OH)2↓+Na2SO4和盐发生反应。复分解反应。盐(可溶)+盐(可溶)→两种新盐CuSO4+BaCl2→BaSO4↓+CuCl2和某些金属反应。置换反应盐+金属(某些)→新金属+新盐反应中的金属一定要比盐中的金属活泼才可以把它给置换出来。请看金属活动性。Zn+CuSO4→ZnSO4+Cu。
粗盐提纯的三个方法与步骤
粗盐提纯步骤如下:1、先将粗盐溶于水,再过滤(注意一贴二低三靠),该步骤过滤泥沙等不溶性杂质。2、加入过量的BaCl2溶液,除去Na2SO4:BaCl2+Na2SO4==BaSO4↓+2NaCl 3、加入过量的NaOH溶液,除去MgCl2:MgCl2+2NaOH==Mg(OH)2↓+2NaCl 4、加入过量的Na2CO3溶液,除去CaCl2和BaCl2(两个反应...
我国生产及提炼纯粗盐的主要方法
方法如下:生产:晒盐从海水中可以提取食盐。粗盐提纯:先将粗盐溶于水,再过滤(注意一贴二低三靠),然后加入过量的BaCl2溶液,除去Na2SO4:BaCl2+Na2SO4==BaSO4↓+2NaCl 然后加入过量的NaOH溶液,除去MgCl2:MgCl2+2NaOH==Mg(OH)2↓+2NaCl 然后加入过量的Na2CO3溶液,除去CaCl2和BaCl2(两个反应...
工业上制取精盐的步骤
海水--晒盐(利用阳光进行蒸发结晶),得到粗盐(主要成分NaCl,还含有Mg2+、Ca2+、SO4^2-等其它离子)--精制得到精盐 精制:加入过量BaCl2溶液(沉淀SO4^2-),加入过量Ca(OH)2(沉淀Mg2+),加入过量Na2CO3(沉淀Ca2+、Ba2+),最后加适量盐酸,调节pH=7,再蒸发结晶过滤,即得到精盐 加入试剂...
美的空调代码怎么读?
外机机器运行5分钟,遥控器按开关和风速(同时按6秒左右,对准空调,听到滴声),然后按遥控器上的上下键调到11,室内机显示的2位代码。美的空调的代码是多少?同时按遥控器上开/关键和风速键6秒以上,然后调到11,通道制热时显示od与二位数检验码。美的校验码的提取步骤如下:1、首先需要同时按遥控...
DNA抽提液中Tris-Hcl,EDTA,Nacl的配比是多少
2、0.5M EDTA(pH8.0)186.1g EDTA-Na·2H2O溶于800ml无菌水中,需用磁力搅拌器剧烈搅动,用NaOH调pH值到8.0(约20g),定容至1L,高压灭菌.3、3.5M NaCL 204.75g NaCL溶于1L无菌水中,高压灭菌.4、10 CTAB溶液 10gCTAB溶于80ml无菌水中,定容至100mL,高压灭菌.5、DNA提取液(500ml)3.5M...
美的空调显示代码是什么意思
外机机器运行5分钟,遥控器按开关和风速(同时按6秒左右,对准空调,听到滴声),然后按遥控器上的上下键调到11,室内机显示的2位代码。美的空调的代码是多少?同时按遥控器上开/关键和风速键6秒以上,然后调到11,通道制热时显示od与二位数检验码。美的校验码的提取步骤如下:1、首先需要同时按遥控...
粗盐提纯的步骤是什么
粗盐提纯即将盐中所含有的杂质提取出来,从而制得纯净的盐。粗盐中含有泥沙等不溶杂质,以及可溶杂质如:Ca2+,Mg2+,SO42-等。那么粗盐提纯的步骤是什么呢?1、先将粗盐溶于水,再过滤(注意一贴二低三靠),该步骤过滤泥沙等不溶杂质。2、加入过量的BaCl2溶液,除去Na2SO4:BaCl2+Na2SO4==BaSO...
湛卫硫酸:[答案] 分子克隆技术(华农) 实验一 质粒的制备 质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用.质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术. 质粒的提取方法很多,大多包括3个主要步骤:细菌的培养、细菌...
乐都县13237558920: RNA提取步骤是什么 - ?
湛卫硫酸:[答案] 提RNA 加TRIZOL 室温静置5分钟 再加氯仿4°离心15分钟 去上层澄清相 再加异丙醇 -20放置30分钟 然后4°离心10分钟 倒掉液体 加酒精4°离心5分钟 然后倒掉酒精 晾干 加DEPC水溶解
乐都县13237558920: 呵呵,提取RNA过程? - ?
湛卫硫酸:[答案] 现在常用的是Trizol法. 提前将研钵、研棒、剪刀、镊子等用锡箔纸包好200度烘烤6小时,与实验前放到冰箱中预冷.枪头、... 整个处理过程必须带手套(最好带口罩),否则环境中的RNA酶会降解RNA. 1、取鲜样或者在-80度保存样品,液氮研磨样品...
乐都县13237558920: RNA提取的关键步骤是??? - ?
湛卫硫酸: 我只知道DNA的 析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢搅拌..朝一个方向..避免DNA折断
乐都县13237558920: RNA提取用什么方法,具体的步骤??
湛卫硫酸:1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积不应超过TRIzol体积10℅. b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用...
乐都县13237558920: RNA病毒的提取方法 - ?
湛卫硫酸: 1、 TROzlo试剂、氯仿、75%乙醇(0.1% DEPC配制). 2、 塑料器皿需用0.1% DEPC水浸泡. 3、 0.1%DEPC水:100ml dd水中加入DEPC0.1ml,充分振荡,37℃孵育12h以上,121℃高压灭菌20min,于4℃保存. 1、 样品处理 (1) 组织...
乐都县13237558920: 求TRIZOL提取RNA的详细步骤 - ?
湛卫硫酸:[答案] 厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞.2、将组织或细胞的Trizol裂解液...
乐都县13237558920: RNA的提取步骤是什么 - ?
湛卫硫酸: 去买生物公司的RNA提取试剂盒,这样比自己配试剂提取出来的要纯净的多,量也多,还方便.买了不同量的提取试剂盒后,上面会有操作步骤
乐都县13237558920: 求助QIAGEN试剂盒提取总RNA的步骤 - ?
湛卫硫酸: 总RNA提取试剂盒步骤: 1. 样品处理:a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀. b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理. c. 贴壁细胞:...
乐都县13237558920: 怎样提取细胞核内的RNA - ?
湛卫硫酸: a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀.b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理.c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每...