什么是革兰氏染色法?主要步骤是?关键步骤?
一、革兰氏染色法
不少于两种染料参与的染色方法称之为复染法,革兰氏染色法属于复染法类的一种染色方法。由结晶紫、碘液、番红参与,通过染料对细菌的细胞壁的着色,来区分革兰氏阴性菌与阳性菌的一种方法。
二、主要步骤及关键步骤
(1)制片。
取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。
要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色;涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性;火焰固定不宜过热(以玻片不烫手为宜)。
(2)初染。
滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1-2min,水洗。
(3)媒染。
用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约1min,水洗。
(4)脱色。
用滤纸吸去玻片上的残水,将玻片倾斜,在白色背景下,用滴管流加95%的乙醇脱色,直至流出的乙醇无紫色时,立即水洗。
乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节:脱色不足,阴性菌被误染成阳性菌;脱色过度,阳性菌被误染成阴性菌。因而脱色时间一般为20-30s。
(5)复染。
用番红液复染约2min,水洗。
(6)镜检。
干燥后,用油镜观察。菌体被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌,被染成红色的为革兰氏阴性菌。
扩展资料:
革兰氏染色的原理
结晶紫(C25H30ClN3)当中的CL-与I-发生氧化还原反应生成不溶于水的蓝紫色复合物(C25H30lN3)。
革兰氏阳性菌细胞壁较厚且肽聚糖网层次多而交联致密,进行脱色时,因失水反而使网孔缩小,再加上结构中不含类脂,所以脱色处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内。
而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过脱色处理后后仍呈无色状态,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
参考资料来源:百度百科——革兰氏染色法
什么是革兰氏染色法?这种染色法在细菌的鉴定上有何重要意义?
革兰氏染色是一种鉴定细菌的染色方法,利用细菌细胞壁结构的差异,用以区分G+和G-。染色步骤一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,G+细胞壁中的肽聚糖厚且被乙醇处理后变性,通透性下降。所以无法被复染,镜检下呈现蓝紫色;而G-则会被脱色,最终被番红染成红色。其在细菌鉴定上的意义在于将...
什么是革兰氏染色法?
为纪念革兰姆,复染法又称革兰氏染色法。
什么是革兰氏染色法?这种染色法在细菌的鉴定上有何重要意义?
革兰氏染色法 是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。阳性紫色阴性红色 原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶...
什么是革兰氏染色法?染色过程应注意什么
革兰氏染色法是由1884年由丹麦医师Gram创立的一种复染色法,用以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,对其进行分类鉴定。二、染色原理 1、G﹢菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。2、Gˉ菌:肽聚...
什么是革兰氏染色法
革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难区别。经染色后...
什么是革兰氏染色法?主要步骤是?关键步骤?
不少于两种染料参与的染色方法称之为复染法,革兰氏染色法属于复染法类的一种染色方法。由结晶紫、碘液、番红参与,通过染料对细菌的细胞壁的着色,来区分革兰氏阴性菌与阳性菌的一种方法。二、主要步骤及关键步骤 (1)制片。取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色...
什么是革兰氏染色法?染色过程应注意什么
革兰氏染色法是一种在细菌学中常用的鉴别染色技术,由丹麦医生和细菌学家汉斯·克里斯蒂安·革兰氏于1884年发明。该染色法包含初染、媒染、脱色和复染四个基本步骤。注意事项:1. 选择生长活跃期的细菌进行染色,因为老龄的革兰氏阳性细菌可能会被错误地染成红色,导致假阴性结果。2. 制作涂片时不宜过...
什么是革兰染色法?
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家 Christain Gram创立。细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。为...
什么是革兰氏染色法?这种染色法在细菌的鉴定上有何重要意义?
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰氏(Hans Christian Joachim Gram,1853-1938)创立。染色原理是,革兰氏阳性菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞...
什么是革兰氏染色法?染色过程应注意什么
革兰氏染色属复染法,即将标本固定后,先用龙胆紫染色,加碘液媒染后用酒精脱色,再用稀释复红复染。染色后除可以看到细菌形态外,还可将细菌分为两大类,即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+)。被酒精脱色复染成红色者为革兰氏阴性菌(G-)。革兰氏染色原理尚不肯定,可能与细菌所带...
项邰加味:[答案] 革兰氏染色四大基本步骤: 结晶紫初染 碘液媒染 乙醇脱色 沙黄复染 其中乙醇脱色是关键 因为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性 如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性
华亭县15524839240: 简述革兰氏染色的步骤和结果 - ?
项邰加味:[答案] 步骤 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1)涂片固定.2)草酸铵结晶紫染1分钟.3)自来水冲洗.4)加碘液覆盖涂面染约1分钟.5)水洗,用吸水纸吸去水分.6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱...
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项邰加味:[答案] 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立.未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察.染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列...
华亭县15524839240: 革兰氏染色的关键步骤是什么 - ?
项邰加味: 革兰氏染色四大基本步骤: 结晶紫初染 碘液媒染 乙醇脱色 沙黄复染 其中乙醇脱色是关键 因为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性 如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性
华亭县15524839240: 革兰氏染色的详细步骤 - ?
项邰加味:[答案] 革兰氏染色一、\x09目的:在细胞发放之前,利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测,判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌.二、\x09原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶...
华亭县15524839240: 什么叫做革兰式染色? - ?
项邰加味:[答案] 应该是:革兰氏染色 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了复合物,革兰氏阳性菌呈紫色;革兰氏阴性菌呈红色. 革兰氏染色是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明...
华亭县15524839240: 革兰氏染色成败的关键步骤是什么? - ?
项邰加味:[答案] 染色时,乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节,脱色不足,阴性菌被误染成阳性菌,脱色过度,阳性菌被误染成阴性菌,脱色时间一般为20~30s.