ELISA TMB显色液怎么配制？我配的怎么一混合就浑浊了
作者&投稿：笪牲 （若有异议请与网页底部的电邮联系）
第一个配方就很好，经典的AB法，效果不错，现在大多数实验室自己配的就是这个，有一点要注意的就是如果你用的TMB是TMB.2HCL就可以不用DMSO溶解,直接用水定容就可以.
求Elisa中TMB显色系统的配置方法，请告知经过您验证的配方，切勿在网络上复制TMB有TMB和TMB盐酸之分，一个可以用无水乙醇溶解，一个是用水溶解的，弄清
配方一：底物显色A液：醋酸钠13.6g ,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml.
底物显色B液 :乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,取0.15g TMB溶于3mlDMSO中,蒸馏水加至500ml.
使用的时候根据需要量取等量AB液混匀后使用
配方二：
底物缓冲液(pH 5.0磷酸钠柠檬酸)：0.2 mol/L Na2HPO425.7 ml，0.1 mol/L柠檬
酸24.3 mL，50mL蒸馏水
TMB(四甲基联苯胺)使用液：0.5 ml 2 mg/mL TMB无水乙醇溶液，10 mL底物
缓冲液，32μL30% H2O2混合，现用现配。
将底物缓冲液与TMB使用液按1：1混匀即可，现用现配。
都詹净石： TMB有TMB和TMB盐酸之分,一个可以用无水乙醇溶解,一个是用水溶解的,弄清这两个,其他的就没问题.配制方法可以见如下:http://www.bioyou.com/ProductShow.asp?ID=915 此制法绝对没问题,只要你买的试剂没问题的就行了(干粉放一年会变色,溶解度差),先配的TMB原液可分装后-20保存.工作液现用现配.那当然,如果你用量不大,可以买配好的现成溶液.http://www.bioyou.com /ProductShow.asp?ID=1084
阜南县18347989531： 有谁知道ELISA单组分显色液怎么配? - ？
都詹净石： 这个你在百度上是基本不可能找到答案的,目前TMB的显色液配方有经典的AB法,这个随便百度一下就可以找到.但单组分的东东,还是比较保密的.一些公司不可能流转出来的.就算是弄好了,也不会轻易告诉别人的. 如果你是实验室自己想用一下,而且用量不大的话,可以订一点点,或者自己配成AB法的. 如果是公司想生产试剂盒.直接配成AB型的或者订现成的,再或者花钱卖这个配方.但价格就不好说.
阜南县18347989531： 四甲基联苯胺的应用 - ？
都詹净石： TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低.由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的...
阜南县18347989531： 如何应用 elisa 检测 il - 2 il - 6 - ？
都詹净石： 需要,第一步即用包被液稀释抗原,4°C包被过夜.包被液为碳酸盐缓冲液:碳酸氢钠 2.93g;碳酸钠1.59g 配成水溶液1L,PH=9.6;4°C保存.
阜南县18347989531： ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置方法? - ？
都詹净石： ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础,ELISA试剂以及各种溶液如何配置?最近刚做了下ELISA实验,把各种ELISA配置方法汇总如下:(1) ELISA实验包被缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(3) ELISA实验稀释液;(4)ELISA实验终止液(5)ELISA底物缓冲液(6)ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液(7) ELISA实验ABTS使用液(8)ELISC.人miRNA /人microRNA: http://product.bio1000.com/101595/ 生物帮上面有这方面的资料.
阜南县18347989531： TMB.2HCI怎么溶解 - ？
都詹净石： TMB显色液试剂:TMBHCl亚硝基铁氰化钾无水酒精配制方法:(1)醋酸盐缓冲液:取1.0mol/L的HCl 190ml加入1.0mol/L的醋酸钠400ml中混合,再加蒸馏水稀释至1000ml,用醋酸或NaOH将pH调至3.3.(2)A液:取上述缓冲液5...
阜南县18347989531： TMB系米意思？
都詹净石：TMB即四甲基联苯胺(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应, 且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组...
阜南县18347989531： elisa步骤 - ？
都詹净石： 方法一:用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1. 包被:用0.05M PH9,碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜.次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟.2. 加样...
阜南县18347989531： 我是做ELISA实验的初学者,最近在建立双抗体夹心法的检测方法,不知道如何确定包被浓度和抗原浓度,谢谢! - ？
都詹净石： 你是不知道包被的浓度还是不知道怎样配治包被液啊? 我这里有份ELISA的实验过程.不过是除掉前两部的. 1、 加被检抗原(重组蛋白或自然样品):用稀释液(DS01、AS01、AS02、AS03、AS04)将被检抗原按实验设计稀释,每孔100...
阜南县18347989531： ELISA方法中的显色剂A或B的成本是什么?加的时候先后次序有影响吗?？
都詹净石： 一瓶是过氧化氢,一瓶是TMB(当然还有一些缓冲液,但主要成分是这两种).到底哪一瓶是哪一种,这个也不能肯定.先加后加是没有影响的,实际上可以先把这两个倒到一个加样槽中,混匀再用排枪加,但混匀后必须马上使用. 下面是配法,可以参考一下.不一定要自己配.
