如何做细菌生长曲线
细菌生长曲线的测定
一、目的要求
了解细菌生长曲线的特点及测定的原理
学习用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
二、基本原理
少量的细菌,接种到一定体积的、合适的新鲜液体培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标、生长时间作横坐标,绘制的曲线为生长曲线。一般生长曲线可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期(图8-4-1),生长曲线是微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。不同的微生物其生长曲线不同,即使是同一种微生物,在不同的培养条件其生长曲线也不同,测定在一定条件下培养的微生物的生长曲线。在科学研究及生产上是非常有意义的。
大肠杆菌是微生物学教学和科研常用菌种,也是某些生物制品的生产菌种,常需要了解在一定条件下其生长曲线的特征。测定微生物的数量如本章实验1-3所介绍有多种不同的方法,可以根据要求和实验室的条件选用。本实验用光电比色计进行比浊,测定OD值的方法、此法所需仪器不多,操作简便、迅速。
三、实验材料
(一)仪器
光电比色计、试管、锥形瓶、移液管
(二)培养基和菌种
肉膏蛋白胨培养液、大肠杆菌菌种
四、实验内容
(1)预先将大肠杆菌接种到肉膏蛋白胨培养液中,37℃振荡培养18h备用。
(2)把光电比色计的波长调至420 nm,开机预热10-15min。
(3)以未接种的肉膏蛋白胨培养液校正比色计的零点(以后每次测定都要重新校正零点)。
(4)取盛有150 mL无菌肉膏蛋白胨培养液的500 mL锥形瓶6个,分为两组,分别编号为1、2、3号和4、5、6号。各瓶加入培养18h的大肠杆菌培养液10 mL,37℃下振荡培养。
(5)于接种后的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 h,分别用无菌移液管从各瓶中吸取培养液5mL,在光电比色计上测定OD420值。若菌液太浓时,作适当稀释,使OD420值在0.0-0.4之间较好。经稀释后测得OD420值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的OD420值。
(6)于培养第8h取样测定后,向其中一组(1-3号)每瓶加入肉膏胨培养液的5倍浓缩液10 mL作补料;另一组(4-6号)每瓶加入10 mL无菌水。继续振荡培养和定时测定。
以时间为横坐标,以活菌数的对数为纵坐标,可得出一条生长曲线,曲线显示了细菌的生长繁殖的4个时期:迟缓期,对数期,稳定期,衰亡期
先是调整期的直线,再是指数起的增长曲、再是稳定期的直线,最后是衰亡起的下降直线
什么是细菌生长曲线
1、细菌生长曲线(Bacterial growth curve)是专指单微生物的。它是将少量的单微生物接种纯种到一定容积的液体培养基后,在适宜的条件下培养,定时取样测定数量。2、以增长数目的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标,绘制一条如概述图所示的曲线,我们称这条曲线为细菌的生长曲线。
与细菌的生长曲线相符的是
【答案】:D 将一定量的细菌接种至一定容积的液体培养基中进行培养,以时间为横坐标,以细菌数目的对数为纵坐标进行作图,这种描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律的曲线就是细菌的生长曲线。典型的细菌生长曲线可分为以下4个期:①迟缓期,此期细菌细胞不分裂,细菌数目没有增加;②对数期,又称...
如何做细菌生长曲线
以时间为横坐标,以活菌数的对数为纵坐标,可得出一条生长曲线,曲线显示了细菌的生长繁殖的4个时期:迟缓期,对数期,稳定期,衰亡期
细菌生长曲线定义
细菌生长曲线是一种特定于单细胞微生物的生理现象。当少量的单一微生物被纯化并接种到适宜的液体培养基中,置于理想的培养环境中,我们会在固定的时间点取样,通过测量细胞的数量来描绘这个过程。这个测量结果以细胞增长的对数为纵坐标,时间作为横坐标,形成的图形,如同我们常见的图表,便被定义为细菌的生...
细菌的生长曲线如何确定,有何意义
细菌的生长曲线有4个时期:调整期,对数期,稳定期,衰亡期.它表示了细菌生长过程中各个过程的情况,每个时期都有自己特定的优势微生物.你可以参照生长曲线,根据你的需要控制微生物的生长,来达到你需要的效果.
什么是细菌生长曲线,各个阶段有怎样的特点
生长曲线分为以下四期: (1)迟缓期:此期细菌体积增大,代谢活跃,但分裂迟缓,菌数未见增殖。迟缓期长短不一,因菌种、接种的菌量、菌龄和培养基而异,一般约为1-4h。 (2)对数增殖期:此期细菌生长迅速,菌数呈几何级数增长。此时细菌的形态、染色性、生理活性都较典型,对外界环境因素的作用比较...
微生物实验报告:测定细菌生长曲线
测定微生物生长曲线的方法很多,有血细胞计数法,平板菌落计数法,称重法和比浊法。本实验才用比浊法,由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。将所测得的光密度值(OD600)与对应的培养时间做图,即可绘出该菌在一定条件下的生长...
问答题 细菌生长曲线分为哪几个时期?各有何特点
此期生长曲线上活菌数直线上升。细菌以稳定的几何级数极快增长,可持续几小时至几天不等。此期细菌形态、染色、生物活性都很典型,对外界环境因素的作用敏感。稳定期 该期的生长菌群总数处于平坦阶段,但细菌群体活力变化较大。细菌繁殖速度渐趋下降,相对细菌死亡数开始逐渐增加,此期细菌增殖数与死亡数...
分光光度法测细菌生长曲线是静置还是振荡培养
分光光度法测细菌生长曲线需要静置。测细菌生长曲线需要静置后看细菌的状况。吸收曲线在分光光度法的作用是在测定样品时按制定吸收曲线时的方法制备待测样品溶液,测定其吸光度,在此吸收曲线上查出被测物质的浓度,从而计算得出该样品某物质的含量。
细菌典型生长曲线可以分为几期,其划分依据是什么
把一定微生物接种到一定的液体培养基中后,在一定条件下培养,定时取样测定活菌数,以活菌数的对数值为纵坐标,以培养时间为横坐标,就可以画出一条有规律的曲线,这就是微生物的典型生长曲线。根据微生物在不同时期内生长繁殖的特点不同。一般把典型生长曲线划分为适应期、对数增长期(指数期)、稳定...
皮空达力:[答案] 将少量的单细胞微生物接种纯种到一定容积的液体培养基 在适宜的条件下培养 定时取样(至少有5-6个时间点),用OD600(optical density)测定细胞数量 以细胞增长数目的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标,绘制一条曲线.
南部县19488471429: 如何做细菌生长曲线 - ?
皮空达力: 先是调整期的直线,再是指数起的增长曲、再是稳定期的直线,最后是衰亡起的下降直线
南部县19488471429: 细菌生长曲线的测定隔多长时间测一次细菌数目 - ?
皮空达力: 细菌生长曲线,是将少量的单细胞微生物接种纯种到一定容积的液体培养基后,在适宜的条件下培养,定时取样测定细胞数量,以细胞增长数目的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标,绘制一条如图所示的曲线. 生长曲线显示了细菌的生长繁殖的4个时期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期. 迟缓期:又叫调整期.细菌接种至培养基后,对新环境有一个短暂适应过程(不适应者可因转种而死亡).此期曲线平坦稳定,因为细菌繁殖极少.迟缓期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异,一般为1~4小时.此期中细菌体积增大,代谢活跃,为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物.
南部县19488471429: 用分光光度计怎么测细菌数和它的生长曲线 - ?
皮空达力:[答案] 你找一本微生物实验相关的书上面就会有,用一个没有接种的培养基做空白,我当时做的是酵母,每培养2个小时做一次比色,直到比色值趋于恒定,停止培养,就可以绘制出生长曲线,很具体的操作我现在记不太清了
南部县19488471429: origin8怎么拟合细菌生长曲线 - ?
皮空达力: 用od值必须注意,只有透光率在20%~80%之间,浓度与OD值的关系才是呈线形的.2、由于用比浊法不能分辨死菌活菌,所以要防止在生长后期死菌与活菌相混合导致OD值假增高,我们采用的方法是:第一次测定生长曲线的时候,在测定OD值的时候,同时采用台盼蓝染色法作活细胞计数,从而得到一个修正数据.以后在发酵时就可以只测OD值来监测生长状况了.另外,也有人采用同时接种平板的方法得到修正值的,我觉得太麻烦花时间的说.
南部县19488471429: 怎样测定活性污泥的增长曲线 - ?
皮空达力:[答案] 细菌生长曲线 间歇培养法 在一定体积的液体培养基中接种少量细菌并保持一定的条件(如温度、PH、溶解氧等)进行培养,结果出现了细菌数量由少到多,并达到高峰,又有多变少的变化规律.测定生长曲线时,将少量经纯培养的细菌接种到经灭菌...
南部县19488471429: 怎么在word里绘制细胞生长曲线,谢谢前辈们 - ?
皮空达力: 正常的细胞分裂是1个分裂为2个,2个分裂为4个,4个分裂为8个,即随着时间变化,细胞数目增殖.要做这样的曲线,需要建立一个时间和细胞数量数据表,先假设数据如下: 时间(秒)细胞数量(个) 1 2 2 4 3 8 4 16 5 32 6 64 7 128 8 256 9 512 10 1024 其中A2=1,B2=A2^2 选中上列数据,点击菜单栏中点击:插入-图表-折线图-二维折线图-折线图,即可生成
南部县19488471429: 若要测定细菌的生长曲线,应如何设计实验? - ?
皮空达力: 用od值必须注意透光率20%~80%间浓度与OD值关系才呈线形2、由于用比浊能辨死菌菌所要防止期死菌与菌相混合导致OD值假增高我采用:第测定曲线候测定OD值候同采用台盼蓝染色作细胞计数修数据发酵测OD值监测状况另外采用同接种平板修值我觉太麻烦花间说
南部县19488471429: 细菌生长曲线的测定 - ?
皮空达力: OD值一般都是几,取10的对数会出现负值啊 但要看你负多少了