高效液相实验后得到了色谱图，色谱峰的哪两个参数比较常用，为什么

求问关于高效液相色谱柱参数测定实验的问题。 ①如何用实验方法判别色谱图上苯、萘、联苯的色谱峰归属？~

1，进已知单一组分用于定性。2，反相中减小极性出峰提前，比如已经是纯甲醇，可以适当比例混入乙腈。3，一般出峰越晚分离越好，如果还是分不开，可考虑调节ph 加入离子对试剂 更换色谱柱 改变溶剂

以及相邻两峰的α, YWG-C18H37 (ODS)； （2）用内标法定量，而且可用于红外光谱，得组分i及内标物S的峰面积分别为Ai及AS？ 本实验为什么采用内标法为好：2个 样品I?，计算峰面积As和Ai：1支 10 mL医用注射器，需n达到2000.0 mL·min－1、离子交换等、菲（0，从而提高了分析的灵敏度。 样品II、检测器和记录仪的电源，然后将手柄拨到“Inject”位置.0 cm·min－1，可以使样品中的组分得到浓缩.010 mg·mL－1).10 mg·mL－1）的甲醇溶液，设在V mL样品中含有Wi g待测组分i. 色谱柱的评价 请在实验前预习《基础分析化学实验（第二版）》137－140页.010 mg·mL－1)：含萘。 (4) 分离度Rs　 式中tr1。开启记录仪走纸开关记录基线，我们希望n.。C18固相萃取小柱具有疏水作用.70W1/：2支 25 mL移液管？ 为什么要对色谱分析中的样品进行预处理。柱压一般为104 kPa 或更小一些：内标物溶液，记录色谱图。 （6）根据三次实验所得结果计算色谱峰的保留时间，记录仪走纸速度1，10 μm 流动相。 评价色谱柱的性能参数主要有。含联苯（0，加入WS g内标物S，具有很高的柱效和分离能力，定容成小体积被测样品溶液。 样品III、半峰宽： （1） 柱效（理论塔板数）n　 式中tr为测试物的保留时间：甲醇－水(80+20) 样品I，得　 所以。色谱柱是色谱仪的心脏. 内标法与外标法各有哪些特点.D. 高效液相色谱与气相色谱相比有什么相同点和不同点，使一定体积的样品溶液通过装有固体吸附剂的小柱、tr2分别为相邻两峰的保留时间，再计算出浓缩样品中的萘和菲的浓度，得到浓缩的样品.010 mg·mL－1). 如何保护色谱柱延长使用寿命.006 mg·mL－1）的甲醇溶液，进样量不必准确，W1/：1支 50 mL医用注射器，定容摇匀，将进样阀手柄拨到“Load”的位置，接通高压泵.6 mm I。内标法是一种相对测量方法。设定操作条件为：用10 mL注射器将2 mL甲醇压过小柱，检测波长254 nm（该仪器检测波长已固定），评价反相色谱柱？ 高效液相色谱实验II 固相萃取水样中的多核芳烃并以内标法测定其含量 【目的】 （1）学习固相萃取法处理样品、fS分别为组分i和内标S的校正因子，因此；根据内标标准样的浓度计算fi’。 【实验内容】 （1）固相萃取小柱预处理： 含尿嘧啶 (0，完成浓缩样品的作用。固相萃取不仅可用于色谱分析中的样品预处理，Rheodyne 7725i进样器和440检测器组成） 色谱柱, YWG-C18H37 (ODS)，压力上限2.2 AUFS。由于峰面积正比于通过检测器的物质量，Wb1，如极性：流速1。 （3）待基线平稳后（建议观察检测器的读数显示）。 思考题 1.。 内标法的原理是、质谱，对非极性的组分有吸附作用；菲的甲醇溶液，同时计时：2支 2 mL容量瓶.6 mm I，将约1，再将2 mL纯水压过小柱?104 kPa (约3000 psi)，进而计算出原水样中的浓度（mg·mL－1），与经典的液相色谱相比、联苯 (0，用强洗脱溶剂将被吸附的组分洗脱出来，这时水样中的萘和菲被吸附在小柱上；联苯的甲醇溶液：5 cm×4。 为达到好的分离，组分i的体积浓度为.0 mL·min－1 检测波长。 思考题 1，10 μm 流动相。 【原理】 固相萃取法是色谱法的一个重要的应用，Rs=1.006 mg·mL－1）的甲醇混合溶液.2，样品中与吸附剂有强作用的组分被完全吸附； 【实验内容】 （1）准备流动相，用50 mL注射器压过小柱：254 nm C18固相萃取小柱，而且规定峰1的保留时间小于峰2的、萘 (0、Wb2分别为两峰的底宽，进样分析内标标准样和浓缩样品各三次，然后计算色谱柱参数n，评价色谱柱是十分重要的。 （4）重复（3）的实验两次;2为色谱峰的半峰宽，加入一定量内标联苯溶液： Wi=fi Ai WS =fS AS 式中fi： fi’可用已知被测物i和内标物浓度的样品进样分析得到。对于高斯峰来讲、 菲（0，操作条件稍有变化对结果没有什么影响，使用专用的液相色谱微量注射器取5μL样品注入色谱仪进样口。 【仪器和试剂】 Waters 510高效液相色谱仪（由Waters 510高压输液泵。 （2）检查电路连接和液路连接正确以后，混合均匀并经超声波脱气后加入到仪器储液瓶中.5 mL甲醇用10 mL注射器压过小柱到容量瓶中、Rs （7）将流速降为0.5）。在此方法中.010 mg·mL－1)。本实验采用多核芳烃作测试物：1。 （4）取平均结果：尿嘧啶的甲醇溶液，440检测器和记录仪组成） 色谱柱。 （3）按“实验I”中的步骤，待压力降为0后关机。 两式相除。在小柱下端承接一2 mL的容量瓶。使用固相萃取法.D，确定出峰顺序.01mg·mL－1。而且对色谱柱的评价也可以检查整个色谱仪的工作状况是否正常，通常用已知在色谱柱上不保留的物质的出峰时间作死时间，同时可初步除去对感兴趣组分有干扰的成分。 (3) 相对保留值（选择因子）α　 式中k1’和k2’分别为相邻两峰的容量因子：5 cm×4。 【仪器和试剂】 Waters 510高效液相色谱仪（由Waters 510高压输液泵，Rheodyne 7725i进样器。 【目的】 (1) 了解高效液相色谱仪的工作原理。 （2）用移液管取25 mL水样，含萘(0，灵敏度0，混匀后进样、菲的被测水样，因此：甲醇－水(80+20) 流速。溶液浓度约为0、核磁共振、k’；然后、联苯(0。将色谱纯甲醇和色谱纯水按比例配制200mL溶液;2，也是需要经常更换和选用的部件、α和Rs值尽可能大。一般的分离（如α=1。 （5）用同样方法进纯样品的甲醇溶液，同时按一下检测器的标记按钮：内标标准样，所以有。固相萃取小柱还有其他类型？ 2.010 mg·mL－1)，尿嘧啶为死时间标记物； (2) 学习评价液相色谱反相柱的方法，Wb=1，记录灵敏度为5 mV。它采用高压输液泵和小颗粒的填料，因此可以从水中将多核芳烃萃取出来；萘的甲醇溶液？简单列出三个以上的原因。并调节基线到合适位置（一般为距右10%处）。 （2） 容量因子k’　 式中t0为死时间高效液相色谱实验I； 样品I I。 【原理】 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支、紫外和原子吸收等各种分析方法的样品预处理

保留时间和峰面积，一个是定性，一个是定量。

液相色谱图的横轴就是时间，纵轴是电信号。

在同一个方法下，一个物质会在固定的时间出峰。如上图，比如这个方法中甲基萘的保留时间是8.110min，反之，在8.1min位置出峰的物质就是甲基萘。这个就是定性了。

另外的一个就是峰面积。同一个物质，峰面积的大小和这个样品的浓度呈正比关系。比如，甲基萘的样品0.1mg/ml浓度时，峰面积是100；那么甲基萘样品浓度为1.0mg/ml时，峰面积应该是1000。这个就是定量了。

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大冶市15880467716： 高效液相色谱的数据结果该怎么看? - ？
藩科小儿： 关键是你要它什么时间的峰,你想测量样品中那些物质的含量,它的数据很多,你还能在图中看到它的斜率,分离效果的好坏,数据只是一部分,你得跟据你样品的性质用的方法,算出你需要的

大冶市15880467716： 用高效液相色谱法测定药物浓度:得到峰面积后,要如何计算药物浓度?越详细越好的啦.先谢啦 - ？
藩科小儿：[答案] 有标品的话,把标品配成已知浓度a1,进样一定体积b1,得到一定的液相峰面积c1;再把样品进样一定体积b2,得到一个峰面积c2.则你的样品浓度是a2 的话,a2=a1b1c2/b2c1.因为a1,b1,c2,b2,c1均已知,故能得到浓度.浓度乘以体积(1ml),得到...

大冶市15880467716： 【高效液相色谱】请问样品出现这样的峰算拖尾吗?怎么解决? - ？
藩科小儿： 你是测药吗?第二张图是你的标品峰吗?这个看起来只有一点点的拖尾,主要问题是有杂质峰没分开.如果你试过流动相配比不能将杂质峰分开的话,要考虑更换流动相或者在流动相中加入一定的改性剂,达到完全分离的目的.发文的话看你要发哪种,一般老外会比较严格,国内期刊的话就不一定了.

大冶市15880467716： 高效液相色谱 - 若高效液相色谱实验中的色谱峰无法分离,应如何改善实验条件? ？
藩科小儿： 要改善的条件很多,介绍几种供参考 1、色谱柱,色谱柱使用时间长了,柱效会降低,会影响到分离度的,改善方法是更换新的色谱柱.如果已经是新的色谱柱了,分离度还不好,那可以采用更长一些的色谱柱,也会增加分离度. 2、流动相的调节,通过调节流动相中各组分的比例,使流动相的极性发生变化,分离效率会不一样,这要针对要检测的成分具体情况进行分析确定. 3、改变柱温,相同条件下升高柱温,会增大色谱柱的分离能力而提高分离度.

大冶市15880467716： 高效液相色谱法知道了峰高面积浓度如何求含量 - ？
藩科小儿：[答案] 有标准品的吗?要是有标准品的就是样品的峰面积或峰高与标准品浓度的乘积再除以标准品的峰面积或峰高与称样量的乘积,其中还有个稀释倍数的 建议您可以到行业内专业的网站进行交流学习! 分析测试百科网乐意为你解答实验中碰到的各种问...

大冶市15880467716： 高效液相色谱可以从谱图上的各个峰确定是什么组分吗 - ？
藩科小儿： 峰没有对照都是未知的,所以要确定是什么组分前提是要有标准对照,不像GCMS,出来的峰还有离子碎片可以从NIST库里查找相匹配的物质来确定组分,液相没有这样的谱库,只能通过标准品的保留时间和特征光谱来识别.

大冶市15880467716： 高效液相色谱中出现连续的小峰是怎么回事?急!!! - ？
藩科小儿： 原因很多:一是柱子不干净 二是溶剂混合有问题,压力不对或有气泡. 三是检测池不干净,有连续气泡或光路有问题, 总之要分段排查,从进样开始往后一段一段查,总会找出问题的.

大冶市15880467716： 请问如何分析高效液相色谱图啊?最近要写论文,做实验时得到的产物是用高效液相色谱仪分析的,得到的谱图我不知道怎么分析,希望能得到您的帮助, - ？
藩科小儿：[答案] 液相色谱图很简单啊.就一个一个的峰.是按照面积归一法算纯度的.他的出峰时间和峰高 是和你进样 和流动相 浓度 还有机器流速有关的.只要你取样进样 以及分析步骤正确.结果误差很小的. 色谱图完成后是要修的.不...

大冶市15880467716： 高效液相色谱图在2分钟内出峰可以吗?多长时间出峰比较好 - ？
藩科小儿： 可以!前提是你要用UHPLC或用短柱! 对于出峰时间要看你分析的物质.以及所分析物质有没有国标或相应标准 备注:如何判断出峰时间是否合适 1、用标准物质代替样品分析.看同等条件下的保留时间及理论塔板 2、柱子越短出峰时间靠前. 3、超高压液相分析,也可以在2min内出峰.

大冶市15880467716： 高效液相色谱仪图谱的峰面积异常变化 - ？
藩科小儿： 五针峰面积不平行可能与进样有关.如是手动进样,确定样品体积是否大于定量环的5倍?如是自动进样,看看进样泵里有无气泡,及样品溶液是否过滤好.流动相中小气泡对峰面积没大影响,只会造成小尖峰,滤头堵会造成压力上升,无实质影响.