流式细胞术分析细胞因子，结果图分析，四个区域如何分析？分别代表什么？
那些方框叫做圈门，旁边的数字说的是门里面所占的百分比，后面那2张图是计数，右上计数的是48%那群的，下图是计数45%那个门里面的， 整张图的横坐标左边是阴性，右边是阳性
博凌科为解答：流式细胞术在许多研究生课题中常用到，但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例，大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的，方便讨论。流式细胞术分析细胞周期结果示图 首先来认识下图：1、纵坐标Cell Number：即计数到的有效细胞数；2、横坐标DNA Content：即DNA量，为什么用DNA量来区别各周期我们等下再讲；3、G1、G2、S三期在上图已经用箭头标示；4、右侧数字含义：Mean G1=195.4即G1期DNA含量平均值为195.4；%G1=73.6即G1期细胞数占总数的73.6%；以此类推关于结果的具体分析我们会在接下来一起学习讨论。主要从细胞周期的角度看各参数的意义：1、细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。可分为四个阶段（见图）：① G1期(gap1)，指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间；② S期(synthesis phase)，指DNA复制的时期；③ G2期(gap2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间；④ M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束。细胞周期图示 2、从增殖的角度来看，可将高等动物的细胞分为三类：①连续分裂细胞，在细胞周期中连续运转因而又称为周期细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。②休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。③不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等等。细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关，如：小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时，人类胃上皮细胞24小时，骨髓细胞18小时，培养的人了成纤维 细胞18小时，CHO细胞14小时，HeLa细胞21小时。不同类型细胞的G1长短不同，是造成细胞周期差异的主要原因。3、流式细胞结果图各参数的意义：常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞DNA含量（横坐标）来分析的：G1期：细胞DNA复制还没有开始，也是DNA含量最少的，即流式检测结果图的第一个峰；S 期：细胞开始复制，到完成复制，是一个一倍DNA到二倍DNA的过程，在流式结果图中显示期跨度特别大（第二个不高但很宽的峰）；G2期：DNA复制完成至分裂的一段时间，此时细胞内含二倍DNA，在流式结果图中的第二个峰；M期：细胞分裂过程，此时细胞内也是二倍DNA，用DNA含量的方法是无法与G2期分开，所以有第三峰明显升高时报告：G2/M期阻滞。
这种四个象限的图，一般都是看两种染色的关系（横坐标和纵坐标）。左下象限，是两种目标抗原都没有表达（染色阴性）。右上象限，是两种都有表达（双阳性）。
而左上象限则是纵坐标的那个抗原有表达（单阳性），但是横坐标那个没有表达（阴性）
右下象限是横坐标那个抗原有表达（单阳性），但纵坐标那个没有表达
这个图没有贴出来的是做实验时候的阴性对照（全部在左下象限），这样才能原来设置象限的位置。还有做代偿的对照（compensation control），是设置机器，排除假阳性用的。
五种免疫染色技术介绍
每一种技术都有其独特的优势，不断拓展和改进，使得免疫染色在科学研究和临床实践中发挥着不可或缺的作用。例如，流式细胞术的高通量特性使得大规模样本分析成为可能，而免疫电子显微镜的高敏感性则在病毒感染诊断中发挥着关键作用。随着技术的进步，新型免疫染色技术如TB-1数字病理切片扫描仪的出现，如图...
流式细胞分析术的工作原理
未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射,因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变,其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关,还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。在流式细胞术测量中,常用...
干货分享 | 一文读懂流式细胞术
设备利用激光散射和荧光检测技术，如FS（前向散射）和SS（侧向散射）区分细胞群，以及荧光染料标记蛋白的表达来进一步分类。通过滤光片和光电倍增管（PMT），流式细胞仪精确地测量和区分不同波长的散射光和荧光，形成散点图，帮助科学家分析细胞的复杂特性。总的来说，流式细胞术是一种精确、高效且应用...
怎么表征一个细胞上有特定的受体蛋白
表征一个细胞上有特定的受体蛋白主要目的是验证和量化细胞表面或内部的受体蛋白的存在。下面是一些常用的表征方法：1.流式细胞术 (Flow Cytometry)使用特异性抗体标记目标受体，并用流式细胞仪检测和分析细胞中受体的表达水平和细胞数量。2.免疫荧光\/免疫组化 利用特异性抗体和荧光标记来在显微镜下观察和...
流式细胞术原理
而荧光信号强弱之间一般相差很大，阴性细胞与阳性细胞之间、强阳性与弱阳性之间有时可以相差几十倍、几百倍，甚至几千倍，呈指数关系。 流式图数轴上FSC值和SsC值以“一般数序形式”表示，而荧光通道值常以“对数形式”（logarithmic scale）表示 流式直方图的x轴表示一个通道的值,y轴表示细胞数量。流...
请问什么情况下需要使用细胞内染色? 已解决
"应用流式细胞术检测细胞内抗原或细胞因子的表达情况，是近年来发展起来的一种新的检测方法。较传统方法，如免疫组化、免疫细胞化学、ELISpot、原位杂交、有限稀释分析（LDA）及单细胞PCR，胞内染色法具有明显的优势，不仅特异性和敏感性高，而且可以简便、快速地对大量标本同时进行多参数分析。通过应用几种...
看几个分子\/受体在膜上的表达情况用什么实验技术啊?
通过观察荧光信号的强度和位置，可以确定目标蛋白在细胞膜上的表达情况。2. 免疫组化：该技术使用特异性的抗体与目标蛋白结合，并使用酶标记的二抗或荧光标记的二抗进行检测。通过观察染色产物或荧光信号的强度和位置，可以确定目标蛋白在细胞膜上的表达情况。3. 流式细胞术：该技术使用荧光标记的抗体或分子...
流式细胞仪的原理流式细胞仪的原理是什么
11、SSC则代表细胞的颗粒度，细胞内细胞器和颗粒度越大则SSC越大。12、检测分析系统：荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原强度或细胞内物质的浓度，光信号转换为可被计算机识别的电信号。13、计算机把所测量的各种信号进行处理分析。14、流式细胞分选是在流式细胞术的基础上进行的。15、在流动室的...
流式细胞术对CTL细胞和Treg细胞数量及功能分析
研究还发现，nTreg细胞可通过抑制信号传递，如通过CTLA-4分子，调节T细胞的增殖和活化。通过流式细胞术分析，可以详细观察CD4+CD25+和CD4+CD25high细胞亚群的表达变化，以及细胞表面标志如CD25、CTLA-4、GITR和分化标志CD45RA、CD45RO、CD62L、CD69和HLA-DR的分布情况，从而深入理解这些免疫细胞的功能和...
流式细胞术测细胞周期一般需要多少细胞
一般实验，检测需要记录10000个细胞。根据仪器的不同，死腔的体积也不一样，所以体积的要求不一样。理想状态下，样本浓度最好是每毫升一百万。另外，还需要一个样本管来设置机器（如果是单色），双色的话需要单色对照。这些对照管的细胞数要求很多。真正用来记录的样本只要比实际记录再加上死腔体积多一点...
苗诗盖尔： 博凌科为解答:FCM数据的存贮的方式是FCS2.0(flow cytometry standard),采用列表排队(List Mode)方式.易于加工处理分析,但缺乏直观性,数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种;由数据还可以做出标准曲...
芝山区19855201064： 流式细胞术检测小鼠脾脏t细胞亚群结果怎么分析 - ？
苗诗盖尔： 简单的概括:1 先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞2 然后把淋巴细胞显示到柱状图,gate出CD3阳性的(T细胞)3 再把T细胞显示到散点图,横坐标,纵坐标分别为CD4和CD8
芝山区19855201064： 流式细胞术简称FCM,是利用流式细胞仪对特定的细胞群加以分选的多参数计量技术.下图甲为细胞周期过程中,运用该技术测得不同DNA含量的细胞分布... - ？
苗诗盖尔：[答案] (1)图甲中对细胞进行放射性同位素标记,研究DNA含量变化,应选择标记胸腺嘧啶(或T). (2)据图甲分析,AB段DNA含量为2N,表示G1期,BC段DNA含量为2N→4N,表示S期,CA段DNA含量为4N,表示分裂期,则一个完整的细胞周期的表示方...
芝山区19855201064： 细胞内细胞因子的流式细胞怎样检测?？
苗诗盖尔：胞内流式分析法是用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合,即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌,同时采用特殊的化学与抗体选择,确保静止与无细胞因子分泌细胞的最小荧光背景.具有其它方法难以比拟的优点: 快速:流...
芝山区19855201064： 流式细胞术简称FCM,是利用流式细胞仪对特定的细胞群加以分选的多参数计量技术.如图甲为一个细胞周期中,运用该技术测得不同DNA含量的细胞分布... - ？
苗诗盖尔：[答案] (1)图甲中对细胞进行放射性同位素标记以研究DNA含量变化,而DNA分子特有的碱基是胸腺嘧啶,因此应选择标记胸腺嘧啶(或T). (2)甲图中AB段DNA含量为2N,表示G1期,BC段DNA含量为2N→4N,表示S期,CA段DNA含量为4N,表示分裂...
芝山区19855201064： Th细胞的Th细胞胞外细胞检测 - ？
苗诗盖尔： 胞外细胞因子的检测:主要检测血浆(血清)和其他本液中的细胞因子,血浆(血清)中细胞因子的测定.可确切反应细胞因子的表达状态,某些体液标本如脑脊液、滑膜组织液、支气管灌洗液、胸腹水等与特定疾病直接相关. 流式细胞术(...
芝山区19855201064： 细胞内因子的流式检测是怎么回事? - ？
苗诗盖尔： 细胞因子在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用.细胞内因子的流式检测介绍,包括技术优势、操作步骤、应注意事项和染色结果对比. 随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要.在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比.目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括:ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析... 楼主可以到生物帮那里详细的了解下,那里有比较详细的介绍,我在上个星期看到过,生物帮内容主要包括生命科学领域产品、技术文档、视频等,可以看下 www.bio1000.com/zt/cell/46213.html 会找到介绍的.
芝山区19855201064： 细胞因子的活性怎样检测(求实验设计方案)？
苗诗盖尔： 请看维基百科相关记述: 流式细胞术 维基百科,自由的百科全书 (重定向自流式细胞仪) Jump to: navigation, search Image:03wiki-zn-frontpage-icon.gif流式细胞术正在翻译. 目前已翻译90%,原文在en:flow cytometry.希望您积极翻译与修订...
芝山区19855201064： 怎样用excel拟合流式检测细胞因子数据 - ？
苗诗盖尔： 如果CBA的检测结果符合下列函数模型: f(x1,x2,x3,...)=x1+x2+x3+...+x1²+x2²+x3²+...+x1*x2+x2*x3+x3*x1+....+x1*x2*x3+.... 可以用excel来做,你可以参考这个回答.网页链接
芝山区19855201064： 流式细胞检测th1 th2 步骤 要刺激吗 - ？
苗诗盖尔： 目前通用的方法就是通过识别表面标记,细胞内细胞因子加上特殊的转录因子这三项来用流式检测 th1: CD4+CXCR3+ ,IFN-γ+, T-bet+ th2: CD4+CCR4+CCR6–, IL-4+, IL-5+, IL-13+. STAT6+, GATA3+刺激后会改变细胞的百分比
