DNA甲基化的检测方法主要包括哪些?

作者&投稿:钟差 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
DNA甲基化的检测方法主要包括哪些?~

去哪里找最出色的生命科学学术交流论坛?>>> 方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找。1) 基因组整体水平甲基化分析a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法b) SssI 甲基转移酶法c) 免疫化学法d) 氯乙醛法2) 特异性位点的DNA甲基化的检测a) 甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)-PCR/Southern法b) 直接测序法c) 甲基化特异性的PCR(methylation-specific PCR, MS-PCR)d) 甲基化敏感性单核苷酸引物延伸(Ms-SnuPE)e) 结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)f) 甲基化敏感性单链构象分析(methylation-specific single-strand conformation analysis,MS-SSCA)g) 甲基化敏感性变性梯度凝胶电泳(methylation-specific denaturing gradient gel electrophoresis,MS-DGGE)h) 甲基化敏感性解链曲线分析(methylation-specific melting curve analysis,MS-MCA)i) 荧光法(Methylight)j) DNA微阵列法k) 甲基化敏感性斑点分析(methylation sensitive dot blotassay,MS-DBA)l) 甲基化特异性多连接依赖性探针扩(Methylation-Specific multiplex ligation-dependent probe amplification,MS-MLPA)3) 甲基化新位点的寻找a) 限制性标记基因组扫描(restriction landmark genomic scanning,RLGS)b) MBD(Methyl-CpG binding domain column chromatography,甲基化结合区)柱层析法c) 联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD(Combination of methylated-DNA precipitation and methylation-sensitive restriction enzymes,COMPARE-MS)

方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找
1) 基因组整体水平甲基化分析
a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法
b) SssI 甲基转移酶法
c) 免疫化学法
d) 氯乙醛法
2) 特异性位点的DNA甲基化的检测
a) 甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)-PCR/Southern法
b) 直接测序法
c) 甲基化特异性的PCR
d) 甲基化敏感性单核苷酸引物延伸(Ms-SnuPE)
e) 结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)
f) 甲基化敏感性单链构象分析
g) 甲基化敏感性变性梯度凝胶电泳
h) 甲基化敏感性解链曲线分析(methylation-specific melting curve analysis,MS-MCA)
i) 荧光法(Methylight)
j) DNA微阵列法
k) 甲基化敏感性斑点分析(methylation sensitive dot blotassay,MS-DBA)
l) 甲基化特异性多连接依赖性探针扩
3) 甲基化新位点的寻找
a) 限制性标记基因组扫描(restriction landmark genomic scanning,RLGS)
b) MBD(Methyl-CpG binding domain column chromatography,甲基化结合区)柱层析法
c) 联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD

参考见解:方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找。 1) 基因组整体水平甲基化分析 a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法 b) SssI 甲基转移酶法 c) 免疫化学法 d) 氯乙醛法 2) 特异性位点的DNA甲基化的检测 a) 甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)-PCR/Southern法 b) 直接测序法

DNA甲基化变化,是肿瘤早期变化的一个标志,肿瘤这种慢性病的产生分为多个阶段,首先人体的基因中存在着癌基因和抑制癌症的基因,在健康的身体中,癌症基因和抑制癌症的基因是一种平衡并且相互牵制的状态。当人体随年龄的增长,代谢能力的下降,或因劳累、忧虑、肥胖、过度饮酒、吸烟等原因导致身体的体质下降,这时候癌基因将会打破这种平衡关系,这一变化叫做基因的甲基化变化,甲基化变化会导致基因的序列发生变化,我们将这一过程称之为基因的突变。而基因突变后,会影响到细胞的生长和变化,变化后的非正常细胞就形成了肿块或增生组织,这就是我们通常定义的肿瘤。所以DNA甲基化检测技术可以运用于判断基因靶点是否出现甲基化表达变化,从而作为肿瘤的超早期及早期检测依据,具有较高的临床诊断学意义。


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大连市18424381280: DNA甲基化的检测方法主要包括哪些? -
蒸典援生:[答案] 去哪里找最出色的生命科学学术交流论坛?>>> 方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找.1) 基因组整体水平甲基化分析a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法...

大连市18424381280: DNA甲基化的检测方法主要包括哪些? -
蒸典援生: 参考见解:方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找.1) 基因组整体水平甲基化分析 a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法 b) SssI 甲基转移酶法 c) 免疫化学法 d) 氯乙醛法2) 特异性位点的DNA甲基化的检测 a) 甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)-PCR/Southern法 b) 直接测序法

大连市18424381280: DNA甲基化检测有哪些方法?? -
蒸典援生: DNA甲基化检测: Southern Blot杂交、 Bisulfite Sequencing and McrBC-PCR

大连市18424381280: 如何进行DNA甲基化分析 -
蒸典援生: 基因甲基化的检测方法主要有以下几种:甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP) 用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进...

大连市18424381280: DNA甲基化的最主流研究方法是什么 -
蒸典援生: 甲基化特异性PCR(MSP),或甲基化组测序.适用对象不一样,前者针对特定基因的甲基化水平,后者针对全基因.

大连市18424381280: 甲基化的甲基化检测技术 -
蒸典援生: 曾经是2009年最值得关注的技术.遗传上除了ATGC这四种碱基,人们对第五种碱基-甲基化的胞嘧啶的兴趣也日益增加.甲基化修饰的存在对DNA转录的调控起了重要作用,异常的甲基化往往是许多疾病的起因.既然如此重要,系统绘制甲基...

大连市18424381280: 如何检测甲基化的程度? -
蒸典援生: 先用中亚硫酸盐处理,使DNA中未发生甲基化得胞嘧啶脱氨基转化为尿嘧啶而甲基化的胞嘧啶保持不变,PCR扩增得到所需片段,片段中尿嘧啶全部转化成T,然后对PCR产物测序,并与未处理的序列比较,判断CpG位点是否发生甲基化.我们研究院对甲基化检测很专业,感兴趣的话,可以看看:中关村华康基因研究院

大连市18424381280: 如何查找印记基因的差异甲基化区域 -
蒸典援生: 找甲基化位点也就CpG岛一般是有以下几个方法:1. MSP,亚硫酸氢盐转化后,将你想测的基因区域(如启动子区)转入细菌质粒中,进行测序(金标准).挑克隆7/10是甲基化的克隆认为这个位点70%甲基化.大概可以测400+片段,但是问题是...

大连市18424381280: 如何确定一个基因是高甲基化还是低甲基化 -
蒸典援生: 你这里说的白细胞甲基化应该是针对比如血液的,而全基因组甲基化通常涉及到的是全身的,检测时候取的样本不一样吧.

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