革兰氏染色镜检为紫色杆状革兰氏阳性细菌

作者&投稿:计卿 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
革兰氏染色镜检为紫色杆状革兰氏阳性细菌~

革兰氏阳性菌通过革兰氏染色之后,菌体为紫黑色,从颜色上判断为革兰氏阳性菌。
之后,根据细菌的形态,如果为球形则为革兰氏阳性球菌,为杆状则为革兰氏阳性杆菌。
操作步骤:
1
.涂片
将培养的不同菌分别作涂片(注意涂片切不可过于浓厚),干燥、固定。固定时通过火焰1一2
次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。
2
.染色
(
1
)初染加草酸铰结晶紫一滴,约一分钟,水洗。
(
2
)媒染滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。
(
3
)脱色将载玻片上面的水甩净,并衬以白背景,用95
%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20
一30
秒钟,立即用水冲净酒精。
(
4
)复染用番红液染1
一2
分钟,水洗。
(
5
)镜检干燥后,置油镜观察.革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准,过于密集的细菌,常常呈假阳性。
(
6
)
同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片,作革兰氏染色对比。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度,如脱色过度,则阳性菌可被误染为阴性菌;而脱色不够时,阴性菌可被误染为阳性菌。此外,菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌自行溶解了,都常呈阴性反应。
原理:
革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884
年由丹麦医师Gr
二创立的。革兰氏染色法(Gram
stain
)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示:染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G
一表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肤聚糖形成的网状结构组成的,在染色过程中,当用乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,通透性降低,使结晶紫一碘复合物被保留在细胞内而不易脱色,因此,呈现蓝紫色;革兰氏阴性细菌的细胞壁中肤聚糖含量低,而脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫一碘复合物易被乙醇抽出而脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色。
革兰氏染色需用四种不同的溶液:碱性染料(basic
dye
)初染液;媒染剂(mordant
)
;脱色剂(
decolorising
agent
)和复染液(counter
stain
)。碱性染料初染液的作用象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样,而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫(crystal
violet
)。媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力,即以某种方式帮助染料固定在细胞上,使不易脱落,碘(iodine
)
是常用的媒染剂。脱色剂是将被染色的细胞进行脱色,不同类型的细胞脱色反应不同,有的能被脱色,有的则不能,脱色剂常用95
%的酒精(ethanol
)。复染液也是一种碱性染料,其颜色不同于初染液,复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色,而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色,从而将细胞区分成G
+和G
一两大类群,常用的复染液是番红。

你所描述的这种情况,如果能够排除污染(能够确定染色的细菌是同一种细菌的培养物),那么只可能有三种情况,一是革兰氏染色的操作不正确,细菌染色效果不佳,导致难以判断革兰氏阴性还是阳性。二是细菌的菌龄比较老,可能从革兰氏阳性转变为革兰氏阴性,这种情况下必须使用新鲜的培养物重新染色观察才能确定。三是少数细菌确实会出现革兰氏阴阳不定的情况,例如加德纳菌。

革兰氏阳性菌通过革兰氏染色之后,菌体为紫黑色,从颜色上判断为革兰氏阳性菌。
之后,根据细菌的形态,如果为球形则为革兰氏阳性球菌,为杆状则为革兰氏阳性杆菌。
操作步骤:
1
.涂片
将培养的不同菌分别作涂片(注意涂片切不可过于浓厚),干燥、固定。固定时通过火焰1一2
次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。
2
.染色
(
1
)初染加草酸铰结晶紫一滴,约一分钟,水洗。
(
2
)媒染滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。
(
3
)脱色将载玻片上面的水甩净,并衬以白背景,用95
%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20
一30
秒钟,立即用水冲净酒精。
(
4
)复染用番红液染1
一2
分钟,水洗。
(
5
)镜检干燥后,置油镜观察.革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准,过于密集的细菌,常常呈假阳性。
(
6
)
同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片,作革兰氏染色对比。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度,如脱色过度,则阳性菌可被误染为阴性菌;而脱色不够时,阴性菌可被误染为阳性菌。此外,菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌自行溶解了,都常呈阴性反应。
原理:
革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884
年由丹麦医师Gr
二创立的。革兰氏染色法(Gram
stain
)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示:染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G
一表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肤聚糖形成的网状结构组成的,在染色过程中,当用乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,通透性降低,使结晶紫一碘复合物被保留在细胞内而不易脱色,因此,呈现蓝紫色;革兰氏阴性细菌的细胞壁中肤聚糖含量低,而脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫一碘复合物易被乙醇抽出而脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色。
革兰氏染色需用四种不同的溶液:碱性染料(basic
dye
)初染液;媒染剂(mordant
)
;脱色剂(
decolorising
agent
)和复染液(counter
stain
)。碱性染料初染液的作用象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样,而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫(crystal
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)。媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力,即以某种方式帮助染料固定在细胞上,使不易脱落,碘(iodine
)
是常用的媒染剂。脱色剂是将被染色的细胞进行脱色,不同类型的细胞脱色反应不同,有的能被脱色,有的则不能,脱色剂常用95
%的酒精(ethanol
)。复染液也是一种碱性染料,其颜色不同于初染液,复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色,而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色,从而将细胞区分成G
+和G
一两大类群,常用的复染液是番红。

我给你一张吧,是我自己组合在一起的。
从左到右,从上到下分别是:
金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌

我给你一张吧,是我自己组合在一起的。
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