在食品检验中,为什么以菌落总数为指标
微生物导致食品腐败变质、微生物毒素(致病菌、寄生虫)及传染病流行(肝炎病毒)引起的食源性疾病是我国食品安全的头号问题。
在我国的食品卫生管理中,微生物指标分为菌落总数(细菌总数)、大肠菌群、霉菌、酵母菌与致病菌。它们造成食源性疾病,可表现为轻度不适应慢性疾病甚至有生命危险。致病菌是食品安全的杀手,在我国的食品卫生标准中规定为“不得检出”。
菌落总数的测定是食品卫生检验的一个重要指标。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
菌落主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌对食品被污染程序的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 菌落总数严重超标,说明其产品的卫生状况达不到基本的卫生要求,将会破坏食品的营养成分,加速食品的腐败变质,使食品失去食用价值。消费者食用微生物超标严重的食品,很容易患痢疾等肠道疾病,可能引起呕吐、腹泻等症状,危害人体健康安全。
一、菌落总数介绍: 菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。 菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。 菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。 二、检验方法 菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。 基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。 国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。 检验方法参见: GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》 SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》 三、说明 (一)样品的处理和稀释: 1.操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。 固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀稀释液。 用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。 另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。 2.无菌操作:操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的,不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装,应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。 操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟,每个平板不得超过15个菌落。 3.采样的代表性:如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液。 4.样品稀释误差:为减少样品稀释误差,在连续递次稀释时,每一稀释液应充分振摇,使其均匀,同时每一稀释度应更换一支吸管。 在进行连续稀释时,应将吸管内液体沿管壁流入,勿使吸管尖端伸入稀释液内,以免吸管外部粘附的检液溶于其内。 为减少稀释误差,SN标准采用取10mL稀释液,注入90mL缓冲液中。 5.稀释液:样品稀释液主要是灭菌生理盐水,有的采用磷酸盐缓冲液(或0.1%蛋白胨水),后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品(如酱油)进行稀释,可以采用灭菌蒸馏水。 (二)倾注培养 1.操作方法:根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。 将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。 2.倾注用培养基应在46℃水浴内保温,温度过高会影响细菌生长,过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴,应以皮肤感受较热而不烫为宜。 倾注培养基的量规定不一,从12~20ml不等,一般以15ml较为适宜,平板过厚可影响观察,太薄又易于干裂。倾注时,培基底部如有沉淀物,应将底部弃去,以免与菌落混淆而影响计数观察。 3.为使菌落能在平板上均匀分布,检液加入平皿后,应尽快倾注培养基并旋转混匀,可正反两个方向旋转,检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min,以防止细菌有所死亡或繁殖。。 4.培养温度一般为37℃(水产品的培养温度,由于其生活环境水温较低,故多采用30℃)。培养时间一般为48h,有些方法只要求24h的培养即可计数。培养箱应保持一定的湿度,琼脂平板培养48h后,培养基失重不应超过15%。 5.为了避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆,不易分辨,可同时作一稀释液与琼脂培基混合的平板,不经培养,而于4℃环境中放置,以便计数时作对照观察。 在某些场合,为了防止食品颗粒与菌落混淆不清,可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑(TTC),培养后菌落呈红色,易于分别。 (三)计数和报告 1.操作方法:培养到时间后,计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数,计算处原始样品中每克(或每ml)中的菌落数,进行报告。 2.到达规定培养时间,应立即计数。如果不能立即计数,应将平板放置于0-4℃,但不得超过24h。 3.计数时应选取菌落数在30~300之间的平板(SN标准要求为25~250个菌落),若有二个稀释度均在30~300之间时,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则其较小数字(有的规定不考虑其比值大小,均以平均数报告)。 4.若所有稀释度均不在计数区间。如均大于300,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如均小于30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。如菌落数有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之间,则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。 5.不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近),即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,则应视为检验中的差错(有的食品有时可能出现逆反现象,如酸性饮料等),不应作为检样计数报告的依据。 6.当平板上有链状菌落生长时,如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,则应作为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算,不要把链上生长的每一个菌落分开计数。如有片状菌落生长,该平板一般不宜采用,如片状菌落不到平板一半,而另一半又分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。 7.当计数平板内的菌落数过多(即所有稀释度均大于300时),但分布很均匀,可取平板的一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。 8.菌落数的报告,按国家标准方法规定菌落数在1~100时,按实有数字报告,如大于100时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入计算。固体检样以克(g)为单位报告,液体检样以毫升(ml)为单位报告,表面涂擦则以平方厘米(cm2)报告。
在食品检验中是无法确切的观察食品中的细菌种类的,所以只能取样培养,在培养基上,每一个细菌会长成一个菌落,并且有该细菌的典型特征,这样细菌的数量种类很容易就判断出来了。不仅仅菌落总数,现在主要是致病菌,还有重金属、食品添加剂等等也包括在内。
食品企业的产品为什么要送检?检验 包括哪些项目?
食品检验无外乎分为2大类:质检和卫检。其中质检归口为市质量监督局,主要化验理化指标;卫检归口为防疫、卫生部门,主要检测微生物指标。均需送检一定的样品。如果不做检验 即无法在规范的市场(如超市,进场需提供报告)流通,也无法继续生产资格(QS)年检。另外,在生产过程中还会接受质监部门的抽检...
在检测食品中亚硫酸盐实验中,可溶性样品为什么要加氢氧化钠和硫酸?_百 ...
这是因为食品中的亚硫酸和食品中的醛、酮和糖相结合,以结合型的亚硫酸盐的形式存在于食品中,不易测定,加氢氧化钠是为了将食品中的二氧化硫释放出来,加硫酸是为了中和碱,因为反应是在微酸性条件下进行的,前一步加入的氢氧化钠是碱性物质,容易影响实验的进一步进行。
食品检验员作用
食品检验员在食品安全保障中扮演着至关重要的角色。他们的工作职责主要包括:1. 采集样品: 食品检验员首先会从市场上或生产环节中采集各种食品样品,以确保后续的检测具有代表性。2. 制定标准: 他们还会配制标准溶液,这些溶液是检验过程中的重要参照物,用于校准和比对样品的成分。3. 仪器检测: 他们熟练...
食品分析与检验中 为什么要分别存储甲乙液
碱性酒石酸铜甲液:称取34.639g硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。由于硫酸铜与氢氧化钠反应可生成氢氧化铜沉淀,...
食品理化检验在食品检验中的重要性
食品理化检验在食品检验中有着重要的意义。理化检验涉及到的项目体现食品的质量,特别近年来我们作为重点的食品安全项目的检验。外界环境的影响,对食品产生的污染,均需要采取检验的方式确定,并加以分析。
微生物食品检验中空白盐水和琼脂,为什么琼脂没长菌盐水长菌了_百度知...
菌落空白有三种:只在平皿中加入营养琼脂后暴露于操作环境中;加入稀释液于平皿倒入琼脂;加入样液于平皿倒入琼脂。三种空白对应检验三种菌落可能,你不妨试下,看能不能找到原因。
食品卫生检验的意义 食品卫生为什么检验盘点
对食品安全进行检测与控制在维持全社会进步与发展过程中具有重要的作用。2、食品微生物污染对人类的身体健康造成了严重威胁,食品微生物污染导致的质量问题日益受到大家的关注。如何对食品微生物进行快速、有效的检验和分析,保障人们的健康饮食,需要我们进一步探索。
细菌的生理生化反应原理在食品微生物检验中有什么作用
关系食品卫生问题,比如说某个浓度的大肠杆菌遇到某试剂变色了,说明食品里面含有的大肠杆菌超标,对人体大大有害
食品检测中的什么用到理化检验方法
食品理化检验,是指借助物理、化学的方法,使用某种测量工具或仪器设备对食品所进行的检验。食品理化检验的主要内容是各种食品的营养成分及化学性污染问题,包括动物性食品(如肉类、乳类、蛋类、水产品、蜂产品)、植物性食品、饮料、调味品、食品添加剂和保健食品等。
食品中维生素e含量检验为什么要用脱醛乙醇
食品中维生素e含量检验为什么要用脱醛乙醇 我来答 1个回答 #热议# 如何缓解焦虑情绪?匿名用户 2017-08-06 展开全部 第一篇 高效液相色谱法 2 原理 样品中的维生素A及维生素E经皂化提取处理后,将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中.用高效液相色谱法C18反相柱将维生素A和维生素E分离,经紫外检测器检测,...
本农八味: 菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价.菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣.
兴宾区18438506354: 为什么以菌落总数为指标 - ?
本农八味: 一、菌落总数介绍: 菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成.当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形...
兴宾区18438506354: 1、 食品检验为什么要测定细菌菌落总数? - ?
本农八味:[答案] 测定细菌菌落总数是检验食品清洁程度的指标. 也是判断其保存能力的指标.
兴宾区18438506354: 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数?为什么? - ?
本农八味: 菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数.按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长.因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等.
兴宾区18438506354: 即食性食品为什么需要规定菌落总数,大肠菌所和制病菌指标? - ?
本农八味: 菌落总数能反应食品的新鲜程度, 大肠菌群能反应食品的污染程度, 致病菌不允许带有! 最重要的是食品卫生规范里要求必须检
兴宾区18438506354: 食品检样中细菌总数及大肠菌群数各有何意义? - ?
本农八味: 菌落总数是指食品经过处理并在一定条件下培养后,所得1ml(g)检样中所含细菌菌落的总数,菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态,以便为被检样品进行卫生学评价时提供依据. 从食品卫生观点来看,食品中菌落总数越多,说明食品质量越差,病原菌污染的可能性越大,当菌落总数仅少量存在时,病原菌污染的可能性就会降低,或者几乎不存在,但是有少数情况并不完全如此,所以说也不是绝对的!这时就必须配合大肠菌群和病原菌项目的检验,才能对食品做出比较全面准确的评价
兴宾区18438506354: 即食性食品为什么需要制定菌落总数和大肠菌群和致病菌指标 - ?
本农八味: 不光是对于即食性食品,对于食品,都要有安全保证啊.所以要制定指标,规定大肠杆菌的数量标准,这样质检的时候才好判断食品是不是安全的,吃了会不会生病.
兴宾区18438506354: 食品微生物的主要检测指标有哪些 - ?
本农八味: 我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌落总数、大肠菌群和致病菌三项. 1、菌落总数 菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数.它可以反应食品的新鲜度、被细菌污染的程度、生产过程中...
兴宾区18438506354: 细菌总数的测定的原理 - ?
本农八味:[答案] 菌落总数是指食品经过处理并在一定条件下培养后,所得1g或1mL检验中所含细菌菌落的总数.菌落总数主要作为判别食品污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态过程,以便在对杯件样品进行卫生学评价时提供依据.
兴宾区18438506354: 评价食品安全的卫生指标是什么各有何意义 - ?
本农八味: 食品安全指标有理化指标和微生物指标. 理化指标包含各类重金属,如铝离子,钙离子等等,这些指标超标容易造成人体内微量失衡,甚至中毒; 微生物指标包含各种细菌,比如菌落总数、沙门氏菌,大肠菌群等,如果超标容易造成食物中毒...