微量分光光度计测定核酸浓度和纯度

作者&投稿:良章 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
~ 微量紫外分光光度法是检测核酸纯度和含量的常用方法。DNA和RNA在260nm处有最大吸收峰,蛋白质在280nm处有最大吸收峰,盐和小分子集中在230nm处。260nm波长的吸光度能测定DNA或RNA浓度,浓度与吸光度正相关。建议先电泳检测样品,以确认是否进行纯度和浓度测定。

对于不同类型的核酸,计算浓度的方法有所不同。例如,IMPLEN的NanoPhotometer N60新产品的使用过程包括开机、选择检测模式、校准和上样。首先,使用无菌水校准仪器,确保准确性。然后,点入待测样品,进行浓度和纯度测定。

结果通过曲线和数据展示。左侧曲线表示核酸在不同波长下的吸光度,纯核酸在A230处吸光值最低,在A260处最高,在A280处吸光度为半山坡。右侧数据栏显示核酸的浓度和纯度信息。仪器会根据纯度与理想值的差异,用黄色感叹号提示问题,并给出可能原因。

评估核酸纯度时,双链DNA的A260/A280值应在1.7~1.9之间,高于此范围可能含有RNA残留,低于此范围可能有蛋白质残留。RNA的A260/A280值应在1.9~2.1之间,低于1.8可能蛋白质杂质较多,高于2.2可能RNA已降解。

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原子吸收分光光度计由哪几部分组成?各部分的作用分别是什么?
原子吸收分光光度计的部分组成和各部分的作用如下:1、光源:光源是原子吸收分光光度计的核心部分,主要负责产生待测元素的激发光。常用的光源有空心阴极灯和氘灯。空心阴极灯发射的光谱线窄,适用于微量元素的测定;氘灯发射的光谱线宽,适用于多元素同时测定。2、原子化器:原子化器的作用是将待测样品...

分光光度计分为哪几个部分
单色器:单色器是分光光度计的核心部分,它的作用是将复合光分解成单色光。单色器通常由棱镜或光栅构成,它们能将入射的复色光分解成单色光,然后通过狭缝,产生一束特定波长的光。样品池:样品池是用来放置样品的容器。样品可以是液体、固体或者半固体。在样品池中,光会穿过样品,然后进入检测器。检测器...

分光光度计是测什么的?
它利用光和能量的特性来识别颜色并确定光线中每种颜色的含量。分光光度计的两个主要组件是和光度计。分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。特点:1、独特的双光路、双光束...

nanodrop测dna浓度测完后需要合上吗
不需要。nanodrop测dna浓度小于0.2ng\/ul后,擦干水,关上即可,不需要合上。NanoDrop超微量分光光度计是美国 Nanodrop公司制造的是一款独特的测定核酸蛋白质浓度的仪器,应用于核酸,蛋白质含量测定。

怎样用紫外分光光度计测DNA质量和浓度?
一般用微量分光光度计比较快速简便,DNA浓度会直接在软件上显示,A260 \/ A280的比值用于评估样品的纯度, 纯净的样品比值大于1.8,低于2.0。较纯净的核酸A260\/A230的比值大于2.0。

关于微量紫外分光光度计的NanoDrop的问题
一、产品应用 ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。该产品可用于以下几个方面:紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;探针检测:...

紫外分光光度法可以检测核酸的相对分子量吗
理论上讲是可以的。必须得有以下几个条件,第一、你得由此核酸的标准曲线;第二、能准确称量纯的核酸;第三、能配置成可以用紫外分光光度计准确检测的定体积的溶液;第四、当然可以通过浓度、体积和所称质量换算出它的分子量了。

元素分析检测分析的仪器有哪些???
1. 可见分光光度计:用于对物质进行定量或定性分析。2. 紫外可见分光光度计:能够对物质进行定量或定性分析,适用于测定核酸和蛋白质的浓度。3. 原子吸收光谱仪:可用于检测钙、镁、铜、锰、镍、锌、金、银、铅、镉等元素。4. 原子荧光光度计:能够对砷、汞、硒、锡、铅、铋、锑、碲、锗、镉...

DNA制品可用哪几种方法测定其含量,试从原理,准确性方面加以比较_百度...
测定DNA浓度的方法有两种,即利用分光光度计法测定DNA的紫外光吸收值;另一种方法是测定样品中溴化乙锭发射的荧光的强度来计算核酸的含量.紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基(G,A,T,C)在260nm处具有强吸收峰,所以通过测定260nm的吸收峰即可对DNA进行定量.但有时也会因为所处溶液的pH值不同而导致吸光...

如何测量RNA浓度
1、超微量分光光度计测260nm吸收值计算。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。2、也可以用RNA胶(凝胶成像)检测。例如:原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。在胶上就有三条明显大小不一的条带。凝胶迁移分析。可以用来研究RNA-...

子洲县18248025947: 如何用分光光度计测量核酸的浓度 -
法雁麦滋: 方便,灵敏,除了知道含量,还知道组成成分,比如od260/od280低了,就说明蛋白等杂志多了.但是,不知道质量,比如真核rna:跑胶的话有三条带,说明你的rna抽的不错,但是用分光光度计虽能测出rna含量高,但是我们不知道是不是被降...

子洲县18248025947: 怎样用紫外分光光度计测DNA质量和浓度? -
法雁麦滋: 一般用微量分光光度计比较快速简便,DNA浓度会直接在软件上显示,A260 / A280的比值用于评估样品的纯度, 纯净的样品比值大于1.8,低于2.0.较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.

子洲县18248025947: 如何测量RNA的纯度和含量 -
法雁麦滋: 1. 相关概念RNA质检参数OD260/OD280、OD260/OD230的意义.260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值.A230: 测定其它碳源物质,如酚,糖类等.A260:核酸的吸收峰测,测RNA,DNA,引...

子洲县18248025947: 测定DNA含量可以用什么方法? -
法雁麦滋: 外分光光度计 OD260/280比值,如果浓度够大的话可以适当稀释,是OD260在0.1到1之间最好. OD260值为1时,双链DNA一般为50ng/ul.单链DNA一般为40ng/ul,需要具体测的话还是用荧光定量DNA检测试剂盒,用多功能酶标仪检测. 还有一种就是跑电泳,根据已知浓度条带的亮度对比你提的DNA亮度,这个需要分析软件,肉眼是无法正确比较的.

子洲县18248025947: 测出rna分光光度计260nm的值如何求浓度 -
法雁麦滋: 一般通过总量,纯度与完整性三大项检测来确认RNA质量: 1总量:微量分光光度计测260nm吸收值计算. 2纯度:微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值,用于评估有机溶剂残留;260nm/280nm吸收值的比值,用于评估蛋白质污染比例.

子洲县18248025947: 测定DNA含量用什么方法? -
法雁麦滋: 组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间.核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础. 在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg...

子洲县18248025947: DNA或RNA样品不纯,用紫外分光光度计测定其浓度和纯度的准确性会受到影响,为什么? -
法雁麦滋: 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器.常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量.核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA.核酸在波长 260 nm处有最高...

子洲县18248025947: 如何确定样本rna浓度 -
法雁麦滋: 利用实时定量pcr技术,他可以检测pcr过程中dna的浓度:原理是:当在引物作用下dna开始复制时 就会有荧光,然后电脑就会检测到,故复制一次,荧光强度就会增加一次,进而检测到dna的浓度,,

子洲县18248025947: 用分光光度计测dna浓度的数值代表什么意义 -
法雁麦滋: 首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些.它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器. 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA.核酸的...

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