如何检测外泌体中的mirna？
外泌体提取：首先，从细胞培养上清液、血浆、尿液等样品中提取外泌体。可以使用商用的外泌体提取试剂盒，按照厂家提供的操作说明进行提取。
总RNA提取：从提取的外泌体样品中提取总RNA，包括miRNA。常见的总RNA提取方法有酚/氯仿法或商用的RNA提取试剂盒。根据所选方法的操作说明进行提取。
反转录：使用逆转录酶将提取的总RNA转录成cDNA。miRNA通常是较短的RNA分子，因此需要使用miRNA专用的逆转录试剂盒，具体操作可参照所选试剂盒的说明。
miRNA扩增：利用逆转录后得到的cDNA进行miRNA扩增。常用的方法有实时定量PCR (qPCR)、miRNA芯片和高通量测序等。选择适合的方法进行miRNA扩增，并按照相应的实验操作步骤进行。
数据分析：根据miRNA扩增的结果，进行数据分析和解释。对于qPCR，常使用相对定量方法或绝对定量方法（如标准曲线法）来分析miRNA的表达水平。对于芯片和测序数据，可以使用不同的生物信息学工具进行差异表达分析、富集分析等。
miRNA检测的方法会根据实验目的和样品类型而有所不同。因此，在进行实验前，最好参考相关文献或咨询专家以获取更具体的建议和指导。
如何检测外泌体中的mirna?
检测外泌体中的miRNA通常需要经过以下步骤：外泌体提取：首先，从细胞培养上清液、血浆、尿液等样品中提取外泌体。可以使用商用的外泌体提取试剂盒，按照厂家提供的操作说明进行提取。总RNA提取：从提取的外泌体样品中提取总RNA，包括miRNA。常见的总RNA提取方法有酚\/氯仿法或商用的RNA提取试剂盒。根据所...
如何准确地鉴定和鉴别外泌体中的蛋白质 核酸和脂质成分?
1、蛋白质：可以使用质谱分析技术来鉴定和定量外泌体中的蛋白质成分，包括多肽鉴定、蛋白质组学和定量蛋白质分析等方法。2、核酸：可以使用RNA或DNA测序技术来鉴定和定量外泌体中的核酸成分，包括RNA测序和DNA测序等方法。3、脂质：可以使用质谱分析技术来鉴定和定量外泌体中的脂质成分，例如质谱成像技术...
外泌体的电镜观察
直接观察外泌体 全标本包埋外泌体 100,000 × g exosome沉淀 或 富集的冰冻外泌体 2% or 4% (w\/v) PFA PBS 1% 戊二醛 草酸双氧铀, pH 7 甲基纤维素-UA, pH 4: 9份2% 甲基纤维素 +1份4%乙酸双氧铀，用前混合 Formvar-carbon载样铜网 封口膜 5号镊子 玻...
纳米颗粒跟踪分析仪测出来的外泌体的浓度单位是什么?
在科学研究中，纳米颗粒跟踪分析仪是一种常用的工具，可以帮助科研人员准确测量外泌体的浓度，从而更深入地了解外泌体在生物体中的作用和机制。科学指南针平台可以提供纳米颗粒跟踪分析仪测试服务，为科研工作者提供高质量的检测数据和专业的技术支持。
细胞外泌体是什么?
细胞外囊泡—这个词是由国际细胞外囊泡学会（ISEV）创造的术语，根据细胞外囊泡的生物合成或释放途径可以对囊泡进行分类：外泌体（exosomes）直径为30-150nm，起源于内吞途径，其密度约为1.11-1.19g mL-1；微粒\/微囊泡（microparticles\/microvesicles）直接从质膜释放，直径约100-1000nm；凋亡小体（...
外泌体还可以这样研究吗
一是超速离心法，这是目前外泌体提取最常用的方法 。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块， 由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种 方法得到的是微泡不是外泌体 。二是过滤离心， 这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性 ，但...
外泌体提取策略
根据22 篇外泌体文献的统计,排在4 位的检测指标为 CD63(13\/22)、Tsg101(8\/22)、CD9 和CD81并列第三位(6\/22);接着检测较多4 个指标为Alix (4\/22)、HSP70(3\/22)、flotillin (3\/22)和Syntenin (2\/22);此外还有一些指标仅在1 篇文献中出现过,例如HSP90、LAMP2B、LMP1、ADAM10、nicastrin、AChE...
什么是外泌体?
Ø 超速离心法：超速离心法是大家最熟悉的一种分离方法，文献中应用最多且也是目前比较受到认可的方法。超速离心是先通过低速离心去除细胞和细胞凋亡碎片，再通过超高速去除大囊泡和沉淀外泌体。此方法耗时耗力，往往需要8-30个小时；且需要大量的起始材料和超速离心机；产量不高。希吉亚外泌体美容...
什么是外泌体_外泌体是什么?
多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应...
思路迪诊断的外泌体卵巢癌检测试剂盒上市,对于行业有何重要意义?
近日，思路迪诊断研发的外泌体卵巢癌检测试剂盒（商品名：泌思优TM）获得中国国家药品监督管理局的批准上市，这款产品是全球首个基于外泌体技术的卵巢癌体外诊断产品，总体灵敏度超过95%，其获批上市的意义重大。泌思优TM获批上市，将显著提高卵巢癌的早期检出率，进一步促进卵巢癌的早诊早治，卵巢癌早...
辛素全威： 将组织块研磨成粉末 需要不断加入液氮哦 然后像提细胞RNA那样提出RNA 然后买个miRNA检测试剂盒就行了 比如锐博的 才两三百
北川羌族自治县15688277387： 一般的RNA - seq能不能检测到miRNA了 - ？
辛素全威： 不能,miRNA成熟体太短了,在20~24nt左右波动,首先建库前可能就没有将Total RNA中的miRNA保留下来,更不可能去测了,所以通常所说的RNA-Seq就是测一下mRNA而已.要检测出miRNA,在前期样品提取、样品建库过程上有所改变.
北川羌族自治县15688277387： 如何从提取的RNA中筛选出miRNA - ？
辛素全威： 是否是已知的miRNA?如果是已知的miRNA,我建议你到Sanger网站检索一下序列,然后合成相应探针进行NorthernBlot确证,或者利用RT-PCR克隆相应片段进行测序,等等,具体用什么检测方法要取决于你的课题需要.(引用,仅供参考)
北川羌族自治县15688277387： 如何筛选目的基因的miRNA - ？
辛素全威： 你指的是寻找miRNA的靶基因位点吗?一般都是利用生物信息学软件进行预测,但这种预测都是有局限性的,比如miRNA可能会与靶基因之间产生错配,这样会丢失一些靶基因,另外预测的都未经过实验的验证,还需要进行实验的验证来去伪存真.当然植物可以使用降解组测序的方法来进行靶基因预测,原理就是植物中miRNA与mRNA往往是碱基近乎完全匹配来结合后将mRNA降解,剪切位点通常位于miRNA的第十位或第十一位碱基,被剪切后的片段可以通过建库后进行测序,可以真实的得到miRNA在mRNA上的作用位点的序列.动物的就不行了,动物中一般是miRNA结合在mRNA上对mRNA翻译进行抑制,无法像植物那样得到其降解后的小片段进行测序验证
北川羌族自治县15688277387： 小分子RNA的检测方法 - ？
辛素全威： 实时荧光定量PCR技术是1996年由美国Applied biosystems公司推出在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术.该技术在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,使每一个循环变得“可见”,...
北川羌族自治县15688277387： 如何预测和鉴定mirna的靶基因 - ？
辛素全威： 现在有一些预测miRNA靶基因的算法和网站,免费的,例如miRtarget等,网上一搜一大把.可以用它们去预测. 但这些算法常常不是很靠谱,因此应多几种算法综合考虑.但这样仍然不是特别靠谱. 实验筛查的方法目前最有效的是转录组+翻...
北川羌族自治县15688277387： 是否能从细胞培养液中提取RNA进而做PCR - ？
辛素全威： 细胞外的RNA 通常是miRNA了,血浆可做,培养上清也可以,但RNA的提取需要特殊试剂盒,细胞外RNA通常在外泌体,不过看你要做哪方面的实验,一般来说检测培养上清中的RNA没有太大意义
北川羌族自治县15688277387： 定量pcr可以检测mirna表达吗 - ？
辛素全威： miRNA定量检测 采用荧光定量PCR检测 是可以进行PCR检测的,这点上没错的
北川羌族自治县15688277387： 如何筛选一个靶基因的miRNA - ？
辛素全威： 免疫沉淀 当然,确定miRNA与mRNA之间的互作,我们还有更直接的方法,那就是从实验上寻找物理相互作用.我们可以利用RNA诱导沉默复合物(RISC)中的Argonaut(AGO)蛋白的抗体进行免疫共沉淀(co-IP).生物通 www.ebiotrade.com 目...
北川羌族自治县15688277387： 鉴定外泌体的方法有哪些? ？
辛素全威： 研载生物还可以实现用纳米流式检测技术鉴定外泌体的方法,是一种外泌体单颗粒水平多参数定量分析,更加灵敏精确.
