为什么我的小鼠脑部冰冻切片全是洞呀,谁能救救我

作者&投稿:台荣 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
冰冻切片求助~

冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冰冻切片法,二氧化碳冰冻切片法,甲醇循环制冷冰冻切片法等。这些方法,随着时代的变迁,科技的发展,许多年前被认为是非常重要的技术,现在也逐步被淘汰了。当然有些技术,如低温恒冷箱冰冻切片法,正在受到青睐。

这要看你想要切到哪部分。脑部有三个方向的切面:矢状面、冠状面、水平面,看你问的问题感觉是冠状切面,看大脑从前往后切,看其他从后往前切

我一直做冰冻切片,尼氏染色,你所说的问题根源在于固定液和蔗糖液配置,一定要用PH7.4 PBS配置固定液和蔗糖液。用非PBS固定和沉糖会破坏膜结构,所以是造成空洞状的根源。另外在冰冻切片时,要掌握好温度,不易过低或过高,靠经验(可以拿普通鼠做)积累好技术,再做转基因鼠切片。

据我了解,应该是你脱水不充分,导致水残留,冰冻时候水形成结晶,融化后变成空洞。一般较大组织建议梯度脱水,先10%脱水,下沉后在转入15%,最后30%。我自己用的小鼠,直接30%,不过我用的溶液量较大。未发现空洞。个人经验,仅供参考。


为什么我的小鼠脑部冰冻切片全是洞呀,谁能救救我
我一直做冰冻切片,尼氏染色,你所说的问题根源在于固定液和蔗糖液配置,一定要用PH7.4 PBS配置固定液和蔗糖液。用非PBS固定和沉糖会破坏膜结构,所以是造成空洞状的根源。另外在冰冻切片时,要掌握好温度,不易过低或过高,靠经验(可以拿普通鼠做)积累好技术,再做转基因鼠切片。

小鼠脑冰冻切片的染色实验目的
小鼠脑冰冻切片的染色实验目的是进行免疫染色或原位杂交等,实验原理它是在低温条件下将生物组织快速冰冻至一定硬度后进行恒温冰冻切片。

怎么在干冰上解剖小鼠脑
没办法在干冰上取组织,干冰粘在组织上是小事儿,垫一张铝箔纸就行了,最关键的是脑子一往干冰上放就会被冻硬,根本不可能再做任何玻璃的操作。我们实验室一般是大批量(n>30)的取脑组织的时候才用干冰速冻,这样不用担心前面去的组织放置时间过长,和后面的取得有差别。但即使这样也是现在冰上操作...

求助小鼠心脏灌注取脑详细流程
我们实验室鼠脑冰冻切片采用4%的多聚甲醛固定,小鼠直接灌注saline20ml,4%多聚甲醛20ml经左心室固定然后取材在4度4%多聚甲醛后固定4-6h,浸20%-30%糖沉底,就可以切片,切片首先需要冰冻切片机,我们的leica1900的,不知道lz那里有没有这个机子,还有一种原始的自己刷冻台的那种,比较麻烦,切片厚度...

冰浴小鼠缺氧的表现
冰浴小鼠缺氧的表现如下:1、表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。2、小鼠外界活动停止,新陈代谢率降至最低,能量利用减少,单位时间的耗氧量减少,即耗氧率减小。

请问小鼠在什么情况下缺氧?
氯丙嗪为吩噻嗪类抗精神病药物,主要阻断脑内多巴胺受体和α肾上腺素受体和m胆碱受体,具有神经安定作用,它对中枢神经系统有较强的抑制作用。小鼠注射氯丙嗪后,置于低温使其进入假冬眠状态。小鼠外界活动停止,新陈代谢率降至最低,因此能量利用减少,单位时间的耗氧量减少,即耗氧率减小。在氧总量相等...

小鼠器官被冰冻过做石蜡切片会有什么影响?
石蜡切片要做抗原修复,具体的网上可以查到很多protocol。冰冻切片好在速度快,处理方便,不用做抗原修复,只要你不固定,泡过PFA也要做抗原修复。新鲜组织冰冻不同组织有不同的参数要求,包括冰冻方式,样品大小都会有影响,具体的要自己查protocol。冰冻样品保存要防止反复冻融,不然会损伤样本。

大小鼠灌注(脑部灌注、心脏灌注)器械推荐?
说明血液已经冲洗干净。5 不要从心脏上拔出输液针,换一个装有预冷过的4%多聚甲醛的吊瓶继续输液。当多聚甲醛输入体内时,小鼠会剧烈抽搐。6 待抽搐停止后,再持续输5分钟,多聚甲醛即可将小鼠体内各脏器充分固定,牵拉四肢有僵硬感。此时已经固定完毕,可以取材。

冰片药代动力学
冰片在人体内的吸收特性显著。未经处理的冰片,无论是通过口腔粘膜还是皮下组织,都能迅速吸收。当以1微居里\/克体重的3H-冰片给小鼠灌胃时,冰片能快速通过肠粘膜,紧接着在短短5分钟内穿透血脑屏障,显示出其在中枢神经系统中的高浓度和持久存在,这可能是其产生开窍作用的关键因素。冰片在血液中具有...

霾是什么意思(出现雾霾的时候我们该如何减少伤害
同时,罗彻斯特大学的环境医学系教授Cory-Slechta及其团队,在《环境健康展望》期刊上,就提出“细小的颗粒会对小鼠大脑造成更大伤害”。结果发现,所有实验小鼠的大脑谷氨酸含量都出现上升,而这与孤独症和精神分裂症患者的脑部情况一样。那么,对于我们来说,如何正确的认识雾霾,减少雾霾带来的伤害就尤为...

钢城区19645369914: 灌注固定后过的脑组织可以做western blot,pcr,elisa等吗 -
朱纨氯诺: 大鼠灌注取脑;用途:;1.用于常规HE染色,免疫组化分析;2.冰冻切片可以不做脑组织固定;3.不可用于westernblot和PCR;4.如果观察脑组织的缺血、损伤或其它病变时,不作;原理:;心脏灌流术能够快速冲净血液并在动物死亡前进行组织...

钢城区19645369914: 对于组织切片这块,石蜡切片与冰冻切片怎么选择? -
朱纨氯诺: 这个要根据你的实验目的和想要达到的效果来选择,各有千秋.我之前因为实验问题,在网上咨询过中洪博元,我整理一些给你参考下:1.从一抗的选择方面来看.有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键...

钢城区19645369914: 小鼠肝脏冰冻切片预处理,小鼠需要全身灌注吗 -
朱纨氯诺: 小鼠肝脏冰冻切片预处理,小鼠需要全身灌注 第一,冰冻切片是通过冷冻来获得硬度从而制成的切片,与石蜡切片不同的是,它没有经过充分的脱水,对组织的观察会有一定的影响,一般冰冻的准确率是95%,而石蜡可以达到98%以上; 第二...

钢城区19645369914: 脑冰冻切片能不用多聚甲醛灌注吗 -
朱纨氯诺: 鼠脑冰冻切片采用4%的多聚甲醛固定,小鼠直接灌注saline20ml,4%多聚甲醛20ml经左心室固定然后取材在4度4%多聚甲醛后固定4-6h,浸20%-30%糖沉底,就可以切片,切片首先需要冰冻切片机,切片厚度大概选择20-40um差不多.

钢城区19645369914: 为什么我的冰冻切片进行HE染色后有很多孔洞阿? -
朱纨氯诺: 切片进行HE

钢城区19645369914: 脑组织冰冻切片的贴片时如何避免气?脑组织冰冻切片的贴片时如何避免
朱纨氯诺: 1.清洁的玻片用多聚赖氨酸处理或3-氨丙基三乙氧基甲硅烷 2.双氧水的浓度不宜太高,时间不宜太长一般1%H2O2,10分钟. 我认为:1 如果非要用贴片法,那么可以把载玻片也放进切片机中降温后再去粘片,而且切片机的温度最好降到-23到-25度;贴片时的手感也很重要--这个只能自己慢慢体会 2:我以前做贴片时也总有气泡,后来改用漂片 就很少出现此情况,具体如下:将切片收集于盛有0.01MPBS玻盂中,在干净涂胶的载片上滴几滴PBS(片子作的越好,水滴就越浑圆越好操作),挑出较好的切片放入,再用100微升的注射器慢慢将液体抽净即可(大的注射器有时容易把片子抽进去). 此招虽麻烦,但效果很好,我一直在用.

钢城区19645369914: 小鼠 脑切片应从前往后设还是从后往前切呀?切好后应怎么摆放啊? -
朱纨氯诺: 这要看你想要切到哪部分.脑部有三个方向的切面:矢状面、冠状面、水平面,看你问的问题感觉是冠状切面,看大脑从前往后切,看其他从后往前切

钢城区19645369914: 冰冻切片一只小鼠灌注多少多聚甲醛 -
朱纨氯诺: 4%多聚甲醛灌注固定,再后固定,如果是肝脏那一定要灌注固定,把血液冲干净. ******************************* 如果你对这个答案有什么疑问,请追问,另外如果你觉得我的回答对你有所帮助,请千万别忘记采纳哟!

钢城区19645369914: 如何选择石蜡切片和冰冻切片?
朱纨氯诺: 石蜡切片的优点可以保持组织细胞的形态结构,且容易存放在室温,而冰冻切片比较麻烦,一定要存在-80度的低温冰箱中,尤其是用来做原位杂交的的切片,为了防止RNA降解,保存一贯很重要.由于石蜡切片可以切到4微米左右,所以原位杂交探针容易渗透到组织中去,容易成功,而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好.

钢城区19645369914: 想学病理案例分析应该从何入手就想学好病理案例分析应该从何入手
朱纨氯诺: 一. 空白到入门第一步:病理技术、组织学、病理解剖学方法:先实践后理论,再实... 你要学会组织处理原理、病理常规切片、冰冻切片、免疫组化、特殊染色、病理档案的...

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