细胞免疫功能检测为什么要测小鼠脾淋巴细胞转化和迟发型变态反应两个实验

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枸杞子的传统药用价值：
枸杞子为茄科植物枸杞之成熟果实，它在祖国的传统医学中具有重要的地位，其药用价值备受历代医家的推崇。《本草纲目》记载：“枸杞，补肾生精，养肝，明目，坚精骨，去疲劳，易颜色，变白，明目安神，令人长寿。”
枸杞子有滋补肝肾，明目，益面色，长肌肉，坚筋骨之功效。久服有延年益寿，延缓衰老之效果。“治肝肾阴亏，腰膝酸软，头晕，目眩，目昏多泪，虚劳咳嗽，消渴，遗精。”等。
□ 枸杞子的现代分析：
现代分析表明，枸杞子所含之营�9�1成分非常丰富，每百克枸杞果中含粗蛋白4.49克，粗脂肪2.33克，碳水化合物9.12克，类胡萝卜素96毫克，硫胺素0.053毫克，核黄素0.137毫克，抗坏血酸19.8毫克，甜菜碱0.26毫克，还含有丰富的钾、钠、钙、镁、铁、铜、锰、锌等元素，以及22种氨基酸和多种维生素。
□ 枸杞与煲汤、泡酒、泡茶：
用枸杞煲汤、泡酒、泡茶是我国民间的一贯传统，确能起到一定的保健功效，但经科学家长期研究表明，枸杞中的一些功能营养成分如枸杞多糖、拘把类胡萝卜素等均难溶于汤、水、酒中，不能被人体充分吸收。
□ 枸杞汁
“取其精华、去其糟粕”是加工枸杞汁最精炼的总结，枸杞汁采用优质宁夏枸杞，选料极其严格。加工过程中去除了枸杞子的皮和籽粒后，运用高新生物工程技术，充分保留了枸杞子的主要功能成分及营养要素，并使上述易溶或难溶的有益成分均匀分散于整个饮料中，从而使之更便于直接吸收或发挥其功能作用。这与大豆蛋白质不易消化吸收，而加工成为豆腐后提高了蛋白质的利用率道理是相似的。
□ 枸杞多糖功能因子具有十分重要的、多方面的保健功能作用：
(1)免疫调节作用
枸杞多糖对小鼠非特异性免疫、特异性免疫有非常显著的免疫调节作用，能显著地增强小鼠脾淋巴细胞增殖、迟发型变态反应、升高小鼠血清溶血素含量、小鼠腹腔巨噬鸡红细胞功能、小鼠碳廓清能力、以及显著增强抗体生成的能力等。
(2)降血糖作用
枸杞多糖对实验性糖尿病有明显的降血糖作用，有效率达100%；且对正常小鼠血糖无影响。
(3)降血脂作用
枸杞多糖对实验性高脂血大鼠的血脂有明显影响，可显著降低血清胆固醇、甘油三脂含量、而对高密度脂蛋白有升高作用。实验结果表明构把多糖有明显的调节血脂作用。
(4)延缓衰老作用
果蝇生存试验表明，枸杞多糖可明显延长雌性及雄性果蝇的平均寿命及最高寿命。并有显著升高小鼠红细胞SOD作用和明显降低MDA的作用。另外还有动物及临床实验结果表明拘把多糖能明显增强去胸腺小鼠的细胞免疫功能，对小鼠性功能也有一定的恢复作用。
(5)抗疲劳作用
构把多糖能提高实验小鼠的肌糖原、肝糖原储备。增加乳糖脱氨 的总活力、加速血尿素的清除和降低运动后的血乳酸水平，能明显延长小鼠游泳时间。所以，拘把多糖能增强机体体力、迅速消除运动后的疲劳。
(6)其它作用
通过对天麻、人参、银杏、枸杞提取物的试验表明：枸杞提取物能显著延长动物缺氧条件下及辐射条件下的存活时间。
□ 枸杞子研究现状介绍
（由公司所属天然活性成分化学与保健功能研究室提供）
近年来，枸杞子作为药食兼用的名贵资源已为国内外学者所瞩目，特别是国内的许多学者在枸杞的研究领域中如枸杞子的化学成分、结构以及功能评价等方面进行了许多卓有成效的工作，用现代医学理论和仪器方法研究了枸杞子的化学成分及功能因子，这些研究资料表明枸杞子不仅营养丰富而且确实具有多方面的保健功能作用。用分离得到的纯品（纯级分）构把多糖（LBP-1，2，3，4）进行的功能学评价实验进一步表明：枸杞多糖确实是枸杞子具有许多药理作用的重要的功能因子之一。
关于枸杞子的近代研究结果扼要叙述如下：
1.枸杞子的现代分析：
分析表明枸杞子含有丰富的枸杞多糖、脂肪、蛋白质、游离氨基酸、牛磺酸、甜菜碱、维生素 B1、B2、E、C，特别是类胡萝卜素含量很高。此外，还含有大量的矿物元素，如钾、钠、钙、镁、铁、铜、锰、锌、硒等。鲜枸杞果的营养活性成分分析数据见表1。
表1、鲜枸杞果的成分分析
成分 单位 数据 成分 单位 数据
蛋白质 G/100g 4.49 K Mg/kg 1502.4
脂肪 G/100g 2.33 Na Mg/kg 55.55
粗纤维 G/100g 1.68 Ca Mg/kg 212.22
总酸 G/100g 0.04 Mg Mg/kg 317.46
碳水化合物 G/100g 9.12 Fe Mg/kg 55.85
牛磺酸 G/100g 0.32 Cu Mg/kg 7.46
甜菜碱 G/100g 0.26 Mn Mg/kg 4.07
维生素B1 Mg/kg 0.53 Zn Mg/kg 7.05
维生素B2 Mg/kg 1.37 Se Mg/kg 0.05
维生素C Mg/kg 198
类胡萝卜素 Mg/kg 960
维生素E Mg/kg 5.5

枸杞子仁中粗脂肪含量13.75%，粗蛋白质 22.42%。
粗枸杞子油中含亚油酸 77.28%，β-胡萝卜素0.24mg/kg，维生素 E 211.00mg/kg，硒 0.06mg/kg， SOD 92 NU/ml．
2.枸杞多糖的理化特性
本研究室通过DEAE－cellulose和Sephadex gel柱色谱以及氯化钠作洗脱剂从枸杞粗多糖中分离得到针形晶体LBP-I、LBP-IIL BP-III和 LBP-IV等四个级分，并采用色谱、光谱技术、氨基酸分析仪等对这四个级分的理化特性进行了研究。结果表明枸杞多糖是由多 或蛋白质和酸性杂多糖构成。LBPII、LBP-III、LBP-IV的氨基酸总含量分别为14.00%、11.OO%、7.81%。酸性杂多糖是由阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸等构成。LBP-II、LBP-Ill和LBP-IV的等电点分别为4.42、4.61和4.01。分子量均超过2万，均溶于水、难溶于酒 精。枸杞多糖的总含量大约占枸杞子重量的3.36%。
3.枸杞和枸杞多糖的生物活性功能评价
3.1 功能因子LBP-X级分对糖尿病家兔降血糖的效果
本研究室研究结果：从上述方法得到的四个级分中，选取枸杞多糖级分LBP-X对实验性四氧嘧啶糖尿病兔进行降血糖实验（开放型单向质反应序贯实验）；同时，将枸杞多糖LBP－X与粗品枸杞多糖及枸杞的降血糖效果作比较。实验表明，枸杞多糖 LBP-X级分对实验性四氧嘧啶糖尿病兔有名显的降血糖作用，降血糖有效率达100%（假场性率为1%），糖耐量的线明显下移。经配对序贯试验比较，枸杞多糖LBP-X级分的降糖效果优于粗品枸杞多糖，也优于枸杞原汁。三者对正常小鼠血糖无影响。
3.2 枸杞及功能因子LBPs对降低家兔血脂的影响
本研究室研究结果：将枸杞子、枸杞多糖及纯品构把多糖LBP-X对实验性家兔高脂血症进行降血脂的比较试验（开放型单向质反应序贯试验），实验表明，枸杞及其多糖对实验性高脂血症家兔的血脂有明显的降低血清胆固醇及甘油三酯的作用，有效率达100%。
3.3 粗品枸杞多糖LBPs及纯品枸杞多糖
LBP-X的抗疲劳作用：本研究室研究结果：粗品枸杞多糖与纯品枸杞多糖不同剂量给予小鼠比较它们抗疲劳效果。结果表明枸杞多糖粗品能显著地增加小鼠肌糖原、肝糖原储备量，提高运动前及游泳后乳酸脱氨 活力，降低小鼠激烈运动后血尿素增量，并加快其清除速率。纯品低剂量组以5-20mg/kg.d抗疲劳效果优于粗品。LBP-XI10mg/kg.d剂量组最佳。纯品高剂量组与粗品效果无差异。枸杞多糖是具有抗疲劳作用的因子。
3.4 延缓衰老
文献研究报道：通过动物试验表明，构把多糖能明显增强去胸腺小鼠的细胞免疫功能，对小鼠性功能也有一定的恢复作用。试验还表明枸杞多糖为主的组方能恢复衰老模型小鼠T和B淋巴细胞增殖反应功能，提高衰老模型小鼠肝总SOD的活性及血清总SOD和Cu/Zn SOD活性，抑制衰老模型肝组织过氧化脂质的形成，减少心、肝组织的脂褐素沉积。
3.5 耐缺氧作用
本研究室研究结果：通过枸杞、银杏、天麻及人参提取物的耐缺氧实验表明，枸杞提取物的效果最好，其低、中剂量组对小白鼠在密闭缺氧条件下的存活时间与对照组比较，有极显著差异，存活时间分别延长了61-67%。
3.6 调节机体免疫活性
本实验室研究结果：通过枸杞多糖纯级分LBO-X对小鼠免疫器官重量、巨噬细胞吞噬功能及小鼠体液免疫功能试验表明，5-10mg/kg.d的域值范围内对小鼠非特异性免疫和特异性免疫有显著的免疫增强和调节作用。
3.7 枸杞多糖可以诱导人急性早幼粒细胞性白血病HL-6O细胞凋亡。
3.8 枸杞多糖延缓衰老的临床试验
文献资料报道：有关资料表明以中老年“虚症”病例试验服用枸杞多糖，结果表明，对于易疲劳、睡眠不好、食欲不振、头晕头昏、视为模糊及易感冒等症状有明显改善。长期服用无不良反应，继续有疗效。服药后淋巴细胞转化和E-花环两项、T-细胞免疫活性指标明显增强。且血胆固醇、甘油三脂均有下降。 长期服用构把多糖的病例除改善了老化症状外，头发脱落减少、面色红润、视力增强、步履雄健、脉博流畅。还有病例性功能也得到改善。

以上事实说明构把多糖有调节人体免疫功能、清除机体自由基、维护肾气旺盛，从而达到健康长寿之目的。
枸杞子油富含丰富的亚油酸、亚麻酸、油酸、维生素E、胡萝卜素等生物活性物质.枸杞子油富含丰富的亚油酸、亚麻酸、油酸、维生素E、胡萝卜素等生物活性物质，具有降低血管胆固醇，防止动脉粥样硬化，增强视力，防止青光眼，具有明显的增白、滋润、护肤、减少色素等作用
□ 枸杞汁
枸杞汁诉组方中含有多种天然的亲水性成分如杂多糖、多元醇、维生素C等，这些成分能保待肠道中的大量水分，使肠道得到滋润、不致使大使困枯燥引起便秘，所以能起到轻泻作用，而且枸杞子中的类胡萝卜素对于视力也是极有益的，因此，枸杞汁能久饮不上火。
□ 枸杞汁
构把汁虽然甜酸可口，但对于糖尿病人来说是绝对安全的。因为加工枸杞汁时，完全不加蔗糖，是用木糖醇作甜味剂，这种甜味剂是国家权威部门对糖尿病食品唯一指定的营养添加剂，对糖尿病人安全无害。木糖醇其热量仅为 O.216焦耳/ml，也不用担心会使人发胖，所以可以放心饮用。

细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆（集落）形成法、3H放射性同位素掺入法、MTT法等。其中MTT法以其快速简便，不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但MTT法形成的Formazan为水不溶性的，需要加有机溶剂溶解，由于在去上清操作时会有可能带走小部分的Formazan，故有时重复性略差。为了解决这个问题，研究人员又开发了很多种水溶性的四氮唑盐类：如XTT、CCK-8（WST-8）等。
现就这三种四氮唑盐类方法作一个简单介绍：
1.MTT法
MTT：化学名： 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲 （Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲 ，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
缺点：由于MTT经还原所产生的甲 产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲 的有机溶剂对实验者也有损害。

2.XTT法
XTT：化学名：2,3- bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]
-2H-tetrazolium hydroxide，作为线粒体脱氢酶的作用底物，被活细胞还原成水溶性的橙黄色甲 产物。当XTT与电子偶合剂（例如PMS）联合应用时，其所产生的水溶性的甲 产物的吸光度与活细胞的数量成正比。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT。
缺点：XTT水溶液不稳定，需要低温保存或现配现用。

3.CCK-8法或称WST-8法
CCK-8试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲 产物（Formazan）。生成的甲 物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT；5、对细胞毒性小；6、为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
缺点:1、与MTT相比，CCK-8和XTT的价格比较贵。2、CCK-8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。

免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。1．体液免疫测定主要利用抗原与相应抗体在体外发生特异性结合，并在一些辅助因子参与下出现反应，从而用已知抗原或抗体来测知未知抗体或抗原。此外，尚包括检测体液中的各种可溶性免疫分子，如补体、免疫球蛋白、循环复合物、溶菌酶等。2．细胞免疫测定法是根据各种免疫细胞（T细胞、B细胞、K细胞、NK细胞及巨噬细胞等）表面所具有的独特标志和产生的细胞因子等，测定各种免疫细胞及其亚群的数量和功能，以帮助了解机体的细胞免疫水平。体液免疫检测法1.凝集反应。颗粒性抗原（细菌或红细胞等）与相应抗体特异性结合，在电解质参与下形成肉眼可见的凝集物，称之为凝集反应。1）直接凝集反应。颗粒性抗原与相应抗体直接结合所产生的凝集现象，前者多为细胞表面的结构成分，如细菌或红细胞的表面结构抗原。⑴玻片法：多用于抗原的定性检测。⑵试管法：多用于抗体的定量检测。2）间接凝集反应。将可溶性抗原吸附于载体颗粒（如乳胶颗粒、红细胞等）的表面，称之为致敏颗粒。当致敏颗粒与相应抗体结合，即可出现凝集现象。这个反应常用于测定细菌性抗体、病毒性抗体、钩端螺旋体和梅毒螺旋体抗体及某些自身抗体（如抗核抗体、抗肾抗体、抗甲状腺抗体等）。根据凝集反应的原理，还有间接凝集抑制试验、反向间接凝集试验、协同凝集试验等。2．沉淀反应。可溶性抗原（外毒素、血清、细菌培养的滤液、组织浸出液等）与相应抗体特异性结合，在电解质参与下，形成沉淀物，称为沉淀反应。沉淀反应的抗原多为多糖、类脂、蛋白质等。1）单向扩散试验。这是一种抗原定量试验，是可溶性抗原在含抗体的琼脂介质中扩散的沉淀反应。此法常用于检测血清免疫球蛋白和补体各成分的含量。2）双向扩散试验。这是可溶性抗原与抗体在琼脂介质中相互扩散的沉淀反应。本法常用于定性试验，如检测血清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等。单克隆抗体技术3）对流免疫电泳。对流电泳是一敏感快速的检测方法，即在电场作用下的双向免疫扩散。此法常用于检测血清中的乙型肝炎表面抗原与甲胎蛋白等。3．中和试验。特异性抗体可抑制相应抗原物质的活性，抗体使相应抗原的毒性或传染性消失的反应为中和试验。例如抗毒素中和外毒素的毒性，病毒的中和抗体可使病毒失去感染性等。诊断风湿热的抗链球菌溶血毒素“O”试验也为一种中和试验。乙型溶血性链球菌能产生一种溶解人、兔红细胞的溶血毒素“O”，该毒素的溶血毒性可被抗溶血毒素“O”抗体所中和而不出现溶血。试验时将病人血清与溶血毒素“O”混合，作用一段时间后加入人红细胞，红细胞不被溶解为阳性反应，表示病人血清中存在抗溶血毒素“O”抗体。血清抗体效价达400单位以上时提示患者曾感染乙型溶血性链球菌，有助于风湿热的诊断。4.免疫荧光法（荧光抗体法）。是应用荧光素染料（如异硫氰酸荧光黄等）来标记抗体，但不影响其活性，此种抗体称荧光抗体。用已知种类的荧光抗体浸染待检的含有抗原的细胞或组织切片，如有相应抗原存在，则抗原即与此种抗体发生特异性结合，形成复合物而粘着在细胞上，不易洗脱，在荧光显微镜下成为发出荧光的可见物，可达到诊断或定位的目的。包括直接法和间接法。5．酶联免疫吸附试验。本法的原理是利用酶（常用辣根过氧化物酶）标记的抗原或抗体，以测定被检标本中有无相应的抗原或抗体。有间接法、双抗体法、竞争法三种。6．溶血空斑试验。7．免疫印迹技术。免疫印迹或免疫转印技术(immunoblotting或Westernblot）是在Southern(1975)抗体抗原反应创建的DNA印迹术(Southernblotting）基础上发展起来的新型免疫生化技术。细胞免疫检测法近代免疫学广泛采用了细胞生物学、免疫血清学、免疫标记、免疫组化等多方面技术，不断发展和完善了一系列细胞免疫检测技术，用于检测各类免疫细胞的表面标志（包括抗原及受体）、细胞的活化、增殖、吞噬、杀伤功能、各种细胞因子的活性或含量等方面。这些技术为深入研究和认识机体免疫系统的生理、病理改变，阐明某些疾病的发病机制和临床诊治提供了有用的手段。随着细胞免疫学的迅猛发展，时有新的细胞免疫检测技术出现。二十一世纪初期，新发展的项目集中在对有关细胞因子以及细胞受体方面的检测。1．淋巴细胞转化试验。人类淋巴细胞在体外与特异性抗原（如结核菌素）或非特异性有丝分裂原（如植物血凝素，PHA）等一起孵育，T细胞即被激活而向淋巴母细胞转化。T细胞转化过程可伴随有DNA、RNA、蛋白质的合成增加，最后导致细胞分裂。在光学显微镜下可计数转化后的淋巴母细胞数，也可用氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR）掺入正在分裂的淋巴细胞，用液闪测定仪来确定掺入量以确定淋巴细胞转化率。2000年开始出现一种不用同位素，又可用仪器测量的淋巴细胞增殖反应的检查法，称为MTT检测法。MTT是一种甲氮唑盐，它是细胞线粒体脱氢酶的底物，细胞内的酶可将MTT分解产生蓝黑色成分。该产物的多少与活细胞数成正比，结果可用酶标仪(595nm）测量光密度，作为MTT法的指标。2．E-花环法。人类T细胞表面有羊细胞受体(CD2）能与羊红细胞结合形成玫瑰花样结构。即将分离液分离出的外周的单个核细胞悬液与羊红细胞在体外混合，经37℃培养5～10分钟后放4℃过夜，取细胞悬液计数，外周血淋巴细胞中约70%～80%淋巴细胞结成花环即为T细胞，此法可用来分离T细胞。3．T细胞亚群检测。4．细胞毒试验。Tc细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞等对其靶细胞有直接的细胞毒（杀伤）作用。抗体制备常用的检测方法是51Cr（铬）释放法，将51Cr-Na2CrO4盐水溶液与靶细胞（不同的细胞需不同的靶细胞，如NK细胞的靶细胞为K562），于37℃培养1小时左右，51Cr即进入靶细胞，与胞浆结合，洗去游离的51Cr后，即可得到51Cr标记的靶细胞，将待测细胞毒的细胞与51Cr标记的靶细胞混合（比例约为50:1或100:1），靶细胞杀伤越多，释放到上清液中的游离51Cr就越多，且不能再被其他细胞吸收，用γ射线测量仪检测上清液中的cpm值，可计算出待检细胞杀伤活性高低。细胞毒的检测对肿瘤免疫有较大价值。5．巨噬细胞吞噬功能的测定。将中药(10%斑蝥）乙醇浸出液浸渍的滤纸（1cm2大小）置于受试者前臂屈侧皮肤上，4～5小时后取下滤纸。48小时内皮肤局部可水泡，内含巨噬细胞。取水泡液0.5ml加鸡红细胞悬液0.01ml，37℃经30分钟后作涂片、染色与镜检，计算吞噬百分率及每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的平均数。本试验有助于肿瘤病情及疗效的观察。6．移动抑制试验。致敏淋巴细胞与其特异性抗原再次接触时，可以产生移动抑制因子(MIF）。这种因子可以抑制巨噬细胞和中性粒细胞的移动，使之定位于局部而增强其免疫作用。本试验用来观察受检者淋巴细胞在体外受特异性抗原刺激后，有无MIF产生，以测定机体对某种抗原的特异性细胞免疫反应的功能。7．时间分辨荧光测量技术。时间分辨荧光测量技术(time-resolvedfluorometry,TrF）是一项新型的超微量非放射性分析技术。该技术的敏感性和特异性与放射性核素测量技术相仿，但无放射测量的弊端，故问世虽短，进展却极为迅速，有取代放射测量之势。8．细胞因子检测技术。细胞因子的检测，2005年起在中医临床及实验室中已广泛应用。9．细胞受体的检测。受体是细胞表面标志之一，通过对受体的检测，可以了解细胞的功能，并为某些疾病的发病机制提供一定的理论依据。

您好，现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵，技术要求高，都会寻求外包。但是现在竞争也比较大，的得看单位这边整体做的怎么样。

其次要看下你选择单位的规模如何，上海这边的，你可以看下基尔顿生物。

保健食品功能学评价程序和检验方法：1.主题内容和适用范围本程序和检验方法规定了评价食品保健作用的统一程序和检验方法。本程序和检验方法适用于评价食品的免疫调节、延缓衰老、改善记忆、促进生长发育、抗疲劳、减肥、耐缺氧、抗辐射、抗突

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洪泽县19335137021： 为什么单克隆抗体实验要用小鼠脾脏中的B淋巴细胞? - ？
展弘双参： 小鼠的B淋巴细胞一般在小鼠的脾脏里采集,不需要分离出B细胞,把脾细胞制成单细胞悬液就可以了,这个途径简单,可以获得100万个以上的细胞,人的B细胞可以在外周血中采集.

洪泽县19335137021： 小鼠淋巴细胞为什么从脾脏提取 - ？
展弘双参： 脾脏是机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨嗜细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心.所以淋巴细胞要从脾脏提取

洪泽县19335137021： 巨噬细胞吞噬功能测定实验为什么往小鼠腹中注射鸡红细胞 - ？
展弘双参： 鸡红细胞之于小鼠是抗原,巨噬细胞会对其进行识别并吞噬.腹腔注射后过一段时间,取小鼠脾的研磨液在镜下观察可见吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞,计数,就可以测定其功能.

洪泽县19335137021： 大学免疫实验中从小鼠脾中提取淋巴细胞实验失败的原因有哪些 - ？
展弘双参： 这是个简单实验,得到细胞量很大,能见到明显的淡红色,基本不会出现问题.观察不到细胞可能是液体加的多,离心弃上清即可.保证用的液体是缓冲液,Hanks液和PBS都可以.氯化钠会胀破细胞.别的我也想不到了.

洪泽县19335137021： 测量小鼠免疫功能时,需要测量哪些指标呢,分别使用什么方法? - ？
展弘双参： 我说一下特异性免疫的测量方法:注入抗原,提取少量血清来检测抗体的含量 或注入细菌,一段时间后检测体内菌数目.

洪泽县19335137021： 流式细胞仪测小鼠脾脏淋巴细胞亚群需要做原代细胞培养吗 - ？
展弘双参： 不需要,直接把脾脏切碎,消化为单细胞悬液后直接染色

洪泽县19335137021： 免疫细胞功能测定的意义？
展弘双参： 免疫细胞是指所有参与免疫应答过程的细胞,包括骨髓造血干细胞、淋巴细胞、单核巨噬细胞和粒细胞等.人体内的淋巴细胞分为T细胞、B细胞和NK细胞,各有其特异的表面标志和功能,据此建立相应的检测方法.因此计数外周血和组织内淋巴细胞的数目或比例 以及它们所显示的功能强弱,可以判断机体的细胞免疫或体液免疫水平,对疾病的认识、发病机制,病情观察、预后的判断、疗效考察及预防等方面可提供有价值的依据.

洪泽县19335137021： 【求助】请问小鼠脾脏淋巴细胞中CD4CD25Treg所占比例是多少 - ？
展弘双参： 淋巴细胞分离液分离脾脏淋巴细胞 然后用FITC -CD4 和 PE-CD25抗体标记上流式检验可是看不见CD25阳性那一定是技术问题,你先调整一下机器的电压和补偿,Treg的CD25表达峰度不是非常高,如果补偿有问题很可能会假阴性.其次你再摸...

洪泽县19335137021： 体外测定细胞免疫功能的方法是是什么 - ？
展弘双参： 免疫细胞功能试验包括体内和体外试验.免疫细胞功能体外试验主要根据免疫细胞的增殖活性、分泌活杀伤活性等特性而进行实验设计.具体免疫细胞功能检测内容包括:①淋巴细胞功能检测,包括T细胞增殖试验、T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验以及体内试验;B细胞增殖试验、溶血空斑试验、酶联免疫斑点法以及体内试验;NK细胞活性检测方法:酶释放法、放射性核素释放法、化学发光法、流式细胞术法等.②吞噬细胞功能检测,方法有趋化功能检测、吞噬和杀菌功能测定等.

洪泽县19335137021： 实验一:把不带特殊病原体的小鼠分为三组,进行如下特异性免疫实验,过程如图1,结果如表1. 组别 - ？
展弘双参： (1)实验中,B组小鼠的处理是作为C组小鼠的对照处理. (2)从图1可知,在本实验中绵羊细胞R作为抗原,为了排除排除个体差异造成的抗原差异干扰,每次注射的绵羊细胞R应取自同一个体.转入脾脏细胞的C组小鼠中含有记忆细胞,再次注射...