高效液相色谱方法及应用的目录
本书重点对液固色谱、液液色谱、键合相色谱法、体积排阻色谱、微柱液相色谱法、二维高效液相色谱法等多种高效液相色谱方法的色谱分离条件、分析操作、注意事项等进行了详细地阐述。其中有关梯度洗脱、分离条件的优化、试验技术等很多是作者与国内外专家实践经验的总结。适用于各领域中从事液相色谱分析工作的技术人员学习参考,也可作为高等院校相关专业师生选作教材或参考书。
高效液相色谱随着实验方法的大量开发和成熟,目前应用领域非常广泛;
高校:食品、生命、环境等相关专业用的较多(也有个别专业应用);
制药厂、化工厂:检测原料或者成品中的有效成分的含量;
食品检测:检测其中的添加物,如三聚氰胺、苏丹红、孔雀石绿等;
政府相关的职能部门:质检、商检、药监、食品检测等;
科研院所:大多也都和上面提到各个方面相关,也有个别做跨界实验的;
第一章 绪论
第一节 高效液相色谱法的特点
一、与经典液相(柱)色谱法比较
二、与气相色谱法比较
三、高效液相色谱法的优点
四、高效液相色谱方法发展简介
第二节 高效液相色谱法的分类
一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类
二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类
第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性
一、应用范围
二、方法的局限性
参考文献
第二章 高效液相色谱仪简介
第一节 流动相及储液罐
一、储液罐
二、流动相脱气
第二节 高压输液泵及梯度洗脱装置
一、高压输液泵
二、输液系统的辅助设备
三、梯度洗脱装置
第三节 进样装置
一、停流进样装置
二、六通阀进样装置
三、自动进样器
第四节 色谱柱
一、柱材料及规格
二、柱填料
三、保护柱
四、柱连接方式
五、柱温控制
第五节 检测器
一、检测器的分类和响应特性
二、紫外吸收检测器
三、折光指数检测器
四、电导检测器
五、荧光检测器
六、蒸发光散射检测器
第六节 色谱数据处理装置
一、微处理机
二、色谱工作站
参考文献
第三章 液固色谱法和液液色谱法
第一节 分离原理
一、吸附系数
二、分配系数
第二节 固定相
一、液固色谱固定相
二、液液色谱固定相
第三节 流动相
一、表征溶剂特性的重要参数
二、液固和液液色谱的流动相
第四节 二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律
一、溶质保留值的基本方程式
二、液固色谱的保留值方程式
三、液液色谱的保留值方程式
参考文献
第四章 键合相色谱法
第一节 分离原理
一、正相键合相色谱法的分离原理
二、反相键合相色谱法的分离原理
第二节 固定相
一、键合固定相的制备及分类
二、键合固定相的性质
三、使用键合固定相应注意的问题
第三节 流动相
一、溶剂的选择性分组
二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则
三、改善色谱分离选择性的方法
四、多元混合溶剂的多重选择性
五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律
六、用线性溶剂化自由能关系(LSER)来表征反相液相色谱中溶质的
保留值方程式
第四节 新型高效液相色谱的固定相和流动相
一、新型高效化学键合固定相
二、化学键合固定相分类方法简介
三、整体色谱柱
四、超热水流动相
第五节 离子对色谱法
一、分离原理
二、固定相、流动相和对(反)离子
三、影响离子对色谱分离选择性的因素
参考文献
第五章 梯度洗脱
第一节 基本原理
一、等度洗脱
二、梯度洗脱
第二节 影响梯度洗脱的各种因素
一、梯度洗脱时间(?t???G)对分离的影响
二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响
三、梯度陡度对保留值的影响
四、柱温变化对保留值的影响
五、梯度洗脱程序曲线形状的影响
六、影响梯度洗脱的其他变量
第三节 优化梯度洗脱的方法
一、建立梯度洗脱方法的一般步骤
二、梯度洗脱中的实验条件
第四节 梯度洗脱的图示方法
一、二元溶剂梯度洗脱
二、三元溶剂梯度洗脱
三、四元溶剂梯度洗脱
四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱
参考文献
第六章 体积排阻色谱法
第一节 分离原理
一、分布系数
二、体积排阻色谱法的特点
第二节 固定相
一、固定相的分类
二、凝胶固定相的特性参数
三、凝胶色谱柱的制备及谱图特点
第三节 流动相
一、凝胶渗透色谱的流动相
二、凝胶过滤色谱的流动相
第四节 凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布
一、聚合物分子量、分子量分布及测定的意义
二、凝胶渗透色谱图的解析及数据处理
参考文献
第七章 高效液相色谱法的基本理论
第一节 表征液相色谱柱填充性能的重要参数
一、总孔率
二、柱压力降
三、柱渗透率
第二节 高效液相色谱的速率理论
一、影响色谱峰形扩展的各种因素
二、范第姆特方程式的表达及图示
第三节 诺克斯方程式
一、描述色谱柱性能的折合参数
二、诺克斯方程式
第四节 色谱柱操作参数的优化
一、三个柱操作参数的表达式
二、HPLC中实用柱操作参数的优化
三、柱操作参数优化的图示表达方法
第五节 “无限直径”效应和柱外效应
一、“无限直径”效应
二、柱外效应
第六节 超高效液相色谱
一、超高效液相色谱的理论基础
二、实现超高效液相色谱的必要条件
三、超高效液相色谱的应用
参考文献
第八章 高效液相色谱分离条件的优化
第一节 高效液相色谱中色谱参数的相关性
一、色谱参数的分类
二、色谱参数的相关性
第二节 色谱分离条件优化标准的选择
一、难分离物质对的峰对分离优化标准
二、整体色谱图的优化标准
第三节 色谱响应函数和色谱优化函数
一、Morgan和Deming提出的色谱响应函数
二、Watson和Carr提出的色谱响应函数
三、Glajch和Kirkland提出的色谱优化函数
四、Berridge提出的色谱响应函数
第四节 色谱分离条件的优化方法
一、单纯形法
二、窗图法
三、混合液设计实验法
四、重叠分离度图法
五、等强度洗脱和梯度洗脱的优化图示法
第五节 优化HPLC分离的计算机辅助方法
一、实验设计系统
二、人工智能系统
第六节 高效液相色谱专家系统简介
一、专家系统的组成
二、专家系统的使用方法
参考文献
第九章 微柱液相色谱法
第一节 方法简介
一、微型柱的分类
二、微柱液相色谱法的优点和缺点
第二节 基本理论
一、柱外效应
二、管壁效应
三、稀释效应
四、分离阻抗
第三节 仪器装置
一、输液泵系统
二、进样系统
三、柱系统
四、检测器系统
五、连接管和接头
第四节 微柱的制备
一、评价微柱性能的重要参数
二、影响微柱分离效率的相关参数
三、微柱的制备方法
第五节 微柱液相色谱的新技术
一、纳米液相色谱技术
二、超高压液相色谱技术
参考文献
第十章 二维高效液相色谱法
第一节 描述分离体系效能的参数
一、峰容量
二、信息量
第二节 二维高效液相色谱的技术功能
一、切割功能
二、反冲洗脱功能
三、痕量组分的富集功能
第三节 二维高效液相色谱的流路系统
一、多通路切换阀
二、二维高效液相色谱的流路系统
第四节 二维高效液相色谱在蛋白质组学研究中的应用
参考文献
第十一章 建立高效液相色谱分析方法的一般步骤和实验技术
第一节 样品的性质及柱分离模式的选择
一、样品的溶解度
二、样品的分子量范围
三、样品的分子结构和分析特性
第二节 分离操作条件的选择
一、容量因子和死时间的测量
二、色谱柱操作参数的选择
三、样品组分保留值和容量因子的选择
四、相邻组分的选择性系数和分离度的选择
第三节 高效液相色谱法的实验技术
一、溶剂的纯化技术
二、色谱柱的装填技术
三、色谱柱的平衡、保护与清洗、再生技术
四、梯度洗脱技术
五、色谱柱前和柱后的衍生化技术
六、样品的预处理技术
参考文献
符号表
高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项
4.反相高效液相色谱仪冲洗柱子时,应尽量避免使用纯水流动相冲洗柱子,因为水极性强,会损害色谱柱(反相高效液相色谱仪的色谱柱C18是非极性的),导致柱效下降。5.冲洗色谱柱时,还可辅助以不同比例的混合流动相冲洗色谱柱,以冲出不同极性的残留物质,但最后还是要用纯有机流动相冲洗色谱柱一段时间。6...
请问HPLC是做什么的?原理?操作方法?
操作方法:如下图所示,溶剂贮器中的流动相被泵吸入,经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出,经测其压力和流量,导入进样阀(器)经保护柱、分离柱后到检测器检测,由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图,馏分收集器收集馏分,废液瓶收集废液。
液相气相色谱的操作步骤
一、高效液相色谱的流动相应采用色谱纯溶剂,以满足仪器要求、避免损坏色谱柱;二、严禁使用有污染的水等冲洗色谱柱,避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内;三、流动相需经过滤、除气后方可使用;四、待分析的样品必须彻底溶解澄清、过滤,以避免堵塞、损坏色谱柱;五、分析完成后,须注意及时清洗色谱柱和...
请说明下液相色谱的原理以及操作时候的注意点
1.高压:液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa。 2. 高速:流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml\/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于 1h 。 3. 高效:近来...
高效液相色谱的原理及分析方法?
液—液分配色谱法 (Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于高效液相色谱计算公式: 高效...
高效液相色谱仪的原理及结构
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型:1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样...
液相色谱仪使用及工作原理。
工作原理:流动相通过输液泵流经进样阀,与样品溶液混合,流经色谱柱,在色谱柱中进行吸附、分离,最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号,在色谱工作站上出现相应的样品峰。液相色谱的使用:首先对样品进行预处理,然后进样,进样完毕后,清洗进样口,每次分析结束后,清洗通道,最后关闭仪器。
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用,或者换了新...
高效液相色谱法( HPLC)的原理是什么?
高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法是一种使用广泛的分离和分析技术,适用于大规模和高精度度的分析。它的主要步骤包括样品进样、分离、检测和数据处理。(1)样品进样:将反应体系中的各组分通过进样阀加入到高压输液泵中。(2)分离:将样品通过色谱柱进行分离,色谱柱中的固定相和流动相之间存在...
高效液相色谱法测定药物含量的方法有哪些?
高效液相色谱法检查杂质的方法有;内标法加校正因子测定供试品中某个杂质的含量,计算公式:CX=f*AX\/(AS\/CS),其中校正因子f=(AS\/CS)\/(AR\/CR);外标法测定供试品中某个杂质的含量,计算公式:CX=CR*AX\/AR;加校正因子的主成分自身对照法;不加校正因子的主成分自身对照法;面积归一化法。
田府非可: 第一章 绪论 第一节 高效液相色谱法的特点 一、与经典液相(柱)色谱法比较 二、与气相色谱法比较 三、高效液相色谱法的优点 四、高效液相色谱方法发展简介 第二节 高效液相色谱法的分类 一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类 二...
赵县18940411773: 高效液相色谱法在分析实际样品时有哪些应用 - ?
田府非可: 1,为进行分离,可以根据样品的组分将流动相和固定相的组合最佳化.如果熟悉液相色谱,这是非常有利的,但对初学者来说,这是困难的.2,适用样品范围广,80%的分析对象可借此法分析.3,可以使用高效的分离柱,易于分离复杂的多...
赵县18940411773: 色谱法的技术方法 - ?
田府非可: 色谱法常见的方法有:柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等. 高效液相色谱 (HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整.HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱.HPLC应用非常广泛,几乎遍及定量定性分析的各个领域.
赵县18940411773: 高效液相色谱法的主要类型有哪些 - ?
田府非可: 高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法. 1、液-固色谱法(液-固吸附色谱法) 固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的. ①液-固色谱法的作用机制 吸附剂:一些多...
赵县18940411773: 超高效液相色谱的应用 - ?
田府非可: 如今,超高效液相色谱仪主要应用于 (1)药物分析 如天然产物中复杂组分的分析 (2)生化分析 如蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品 (3)食品分析 如食品中农药残留的检测 (4)环境分析 如水中微囊藻毒素的检测 (5)其他 如化妆品中违禁品的检测 超高效液相色谱仪尤其对中药研究领域的发展是一个极大的促进.中药的组分复杂,分离困难等问题都可以通过超高效液相色谱法逐渐解决.在同样条件下,UPLC能分离的色谱峰比HPLC多出一倍还多.在同样条件下,UPLC的分辨率能够认出更多的色谱峰. 相信在分析实验室中超高效液相色谱会越来越普及,让液相色谱法得到飞跃和进步.
赵县18940411773: 什么叫高效液相色谱法 - ?
田府非可: 高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)也叫高压液相色谱(high pressure liquid chromatography)、高速液相色谱(high speed liquid chromatography)、高分离度液相色谱(high resolution liquid chromatography)等....
赵县18940411773: 液相色谱在食品中被应用到哪些方面 - ?
田府非可: 高效液相色谱随着实验方法的大量开发和成熟,目前应用领域非常广泛; 高校:食品、生命、环境等相关专业用的较多(也有个别专业应用); 制药厂、化工厂:检测原料或者成品中的有效成分的含量; 食品检测:检测其中的添加物,如三聚氰胺、苏丹红、孔雀石绿等; 政府相关的职能部门:质检、商检、药监、食品检测等; 科研院所:大多也都和上面提到各个方面相关,也有个别做跨界实验的;
赵县18940411773: 高效液相色谱在环境分析中的应用有哪些? ?
田府非可: 高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整.HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱.HPLC应用非常广泛,几乎遍及定量定性分析的各个领域.
赵县18940411773: 色谱法有哪四种常见的方法?色谱法多应用在哪些范畴? - ?
田府非可: 高效液相色谱法处理,以指示的 ①的高压力:更大的阻力,流动的液体通过高压迅速通过该柱通过柱的流动相,液体载体. ②高效:分离效率高.选择一个固定相和流动相,以便达到最佳的分离效果,并且是工业精馏塔和气相色谱分离性能高...