急!!!色谱柱常用填充料及原理
1,所有材料平衡至所需的温度。
2,用所需溶液冲洗柱子底端以赶除气泡,确定柱网下没有气泡。关掉柱子出口,在柱管中留下1到2厘米的缓冲液。
3,温和重悬填充物。
4,估计需要的悬浊液(重悬的填充物)总量。
5,加入所需体积的混合物至柱子中,使用玻璃棒引流可以避免出现气泡。
6,立即将缓冲液装满柱子。
7,装入柱子顶部部件,并将柱子连接到泵上。
8,打开柱子出口,设定泵的流速。若混合物体积大于柱体积,则应另外连接一个储存用的玻璃柱。这样使得混合物在填充时的直径维持恒定,从而减少紊流并提高柱子的填充状态。
9,达到柱床高度后继续维持至少3倍柱体积的填充流速,在柱子上标记柱床高度。
10,关闭泵和柱子出口,移除上盖加入缓冲液充满柱子使之产生向上的凸面。
11,将接头以一定角度插入柱子中,确保在网下无气泡。
12,将接头沿柱子向下滑行(打开接头的出口)直到标记的位置,锁上接头。装填完毕
首先我们知道色谱柱的柱效看的就是峰与峰之间的分离度,还有峰是否拖尾或者峰有前沿峰。知道这些的话我们就可以去推断影响柱效的因素有哪些了。影响柱效的因素大的范围就是热力学和动力学两个方面。具体就是流动相的速度,固定相的膜厚及固定方法及固定相的质量和性能,再者就是柱温的设置等。
据了解常规的填料其实就是泥沙等物质,但是特殊的柱子的填料,比如葡聚糖凝胶色谱柱的填料基本上大部分都是水,所以填料都不一样,不知道你想问的是那个?一般用C18作填充料
常见色谱柱中的填料分类
1、液相
a、反相(与离子对)方法
C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广
C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小
C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质
C1【三甲基硅烷(TMS)】------保留值最小;最不稳定
苯基,苯乙基 -----------保留值适中;选择性有所不同
CN(氰基) -----------保留值适中;正相和反相均可使用
NH2(氨基) -----------保留性弱;用于烃类;欠稳定
聚苯乙烯基b -----------在1<PH<13的流动相中稳定;对某些分 离峰形好,柱子寿命长
b、正相方法
CN(氰基) -----------普适性好;极性适中;用途广
OH(二醇基) -----------极性大于CN
NH2(氨基) -----------极性大,欠稳定
硅胶b ------------普适性好;价廉;操作欠方便;用于制备LC
c、空间排阻方法
硅胶b -----------普适性极好;作吸附剂用
硅烷化硅胶 -----------吸附性弱,溶剂兼容性好;适用于有机溶剂
OH(二醇基) ------------欠稳定;在水SEC中使用(凝胶过滤)
聚苯乙烯基b ------------广泛用于有机SEC(凝胶渗透);一般与水和极性大的有机溶剂不相容
d、离子交换方法
键合相 ------------稳定性与重现性均不好
聚苯乙烯基b -------------柱效不高;稳定;重现性好
a :除另有说明,均为硅胶基质键合相
b :此类填料为非键合相
2、GPC
3、气相
4、spe中的填料
转自:分析测试百科网
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色谱柱的填料
常见的分配柱填料:碳十八柱 (ODS\/C18)、碳八柱(MOS\/C8)、碳六柱(Hexyl\/C6)、碳四柱(Butyl\/C4)、碳一柱(Methyl\/C1)、阴离子交换柱(SAX)、阳离子交换柱(SCX)、苯基柱(Phenyl)、氨基柱(Amino\/NH2)、氰基柱(Cyano\/CN\/Nitrile)常见的吸附柱填料:硅胶柱 ...
色谱柱有几种填装方法?
3. 高压匀浆法:这是最常用的色谱柱填装方法。首先,将填料悬浮在适宜的均浆液中,制成均浆。在填料尚未沉降之前,迅速使用高压泵将其以高速度压入色谱柱中,这样就可以制作出填充均匀的色谱柱。高压匀浆法包括上行法和下行法两种。
液相色谱柱的填料有哪些?
液相色谱柱的填料基质:1、硅胶基质- pH 2-8:高或低pH下,硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14:化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14:孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。北京路达恒宇科技有限公司PLRP-S液相色谱柱刚性聚合物固定相机械强度高...
液相色谱柱的填料有哪些
常用液相色谱填料的粒径有:1.8um、3um、5um,这些一般是用在分析柱上的。还有:10um、15um、20um、40um这些一般是用在制备色谱柱上的。还有无定形填料。“色谱世界”有个色谱填料的专栏。资料很详细,你可以去看看。
液相色谱柱的填料有哪些
常见色谱柱中的填料分类 1、液相 a、反相(与离子对)方法 C18(十八烷基或ODS)--- 普适性好;保留性强,用途广 C8(辛基) ---与C18相似,但保留值稍小 C3,C4 ---保留值小;大多用于肽类与蛋白质 C1【三甲基硅烷(TMS)】---保留值最小;最不稳定 苯基,苯乙基 ---保留值适中;选...
急!!!色谱柱常用填充料及原理
据了解常规的填料其实就是泥沙等物质,但是特殊的柱子的填料,比如葡聚糖凝胶色谱柱的填料基本上大部分都是水,所以填料都不一样,不知道你想问的是那个?
常用液相色谱填料的粒径有哪些??
常用液相色谱填料的粒径有:1.8um、3um、5um,这些一般是用在分析柱上的。还有:10um、15um、20um、40um这些一般是用在制备色谱柱上的。还有无定形填料。“色谱世界”有个色谱填料的专栏。资料很详细,你可以去看看。
正相液相色谱常用的色谱柱是什么正相液相色谱常用的色谱柱是
1、主要是硅胶柱。2、色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。3、色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。4、色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。5、...
正相色谱柱的常用固定相是什么
FFAP柱就是一类用对苯二甲酸改性的聚乙二醇作为固定相的(DB-FFAP)。这种色谱柱常用于分析分离酸性化合物。另外,我们也用碱性化合物对聚乙二醇固定相改性用来分析分离碱性化合物(CAM)。相应的柱子牌号有:HP-Wax、DB-Wax、Carbowax-10,HP-INNOWax、DB-WAXetr、Carbowax-20M,HP-FFAP、DB FFAP、OV-351...
高效液相色谱的色谱柱
填料和流动相的组分应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外...
滑质延迪: 液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定. 正相柱:多以硅胶为柱填料.根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10 μm的范围内.另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶. 反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料.也有无定型和球型之分. 常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10 μm之间
尚志市17399514300: 液相色谱原理 - ?
滑质延迪: 原理主要有这几种:液—液分配色谱法 (Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体.流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),...
尚志市17399514300: 介绍高效液相色谱法入门知识 - ?
滑质延迪: 楼主,您好. 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法.注入进样阀的供试品,由流动相带入柱内,各成分在柱内被分离,并依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色...
尚志市17399514300: 简要说明气相色谱柱效能 - ?
滑质延迪:[答案] 气相色谱柱知识详解 第一节 气相色谱柱的类型 气相色谱法(gas chromatography, 简称GC)亦称气体色谱法,气相层析法.其核心即为色谱柱. 气相色谱柱有多种类型.从不同的角度出发,可按色谱柱的材料、形状、柱内径的大小和长度、固定液的...
尚志市17399514300: 色谱柱有中性、酸性和碱性柱,在实际使用时如何选择使用好? - ?
滑质延迪: 自制填充的色谱柱常用吸附剂有氧化铝、硅胶、活性炭等.你说的色谱柱是指自制填充的氧化铝色谱柱? 色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种. 酸性氧化铝pH约为4-4.5,用于分离羧酸、氨基酸等酸性物质; 中性氧化铝pH值为7.5,用于分离中性物质,应用最广; 碱性氧化铝pH为9-10,用于分离生物碱、胺和其它碱性化合物等.硅胶是中性的吸附剂,可用于分离各种有机物,是应用最为广泛的固定相材料之一.活性炭也是中性的吸附剂,常用于分离极性较弱或非极性有机物.
尚志市17399514300: 求文档: SP - 2100A气相色谱仪操作规程及注意事项 - ?
滑质延迪: 1.色谱柱一般采用抽真空法填充,即将固定液溶于丙酮中加入担体,挥发干后真空法装柱,注意边装填边用橡皮榔头敲击.两端塞石英棉.2.使用前先在较高柱温下老化.3.如果出现色谱峰增宽、保留时间改变或出现鬼峰,说明色谱柱失效.4.一般主要是柱温过高,固定液流失所致,也有可能样品基质污染造成.填充柱现在不常用了,推荐使用内径0.53mm的粗口径毛细管柱,柱效高、稳定性好.
尚志市17399514300: 四大色谱原理是什么? - ?
滑质延迪: 色谱法分类 按两相的物理状态可分为:气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC).气相色谱法适用于分离挥发性化合物.GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC),其中以GLC应用最广.液相色谱法适用于分离低...
尚志市17399514300: 色谱柱有几种填装方法? - ?
滑质延迪: 第一种方法,“等密度法”法填装高效柱,以高密度溶剂配制密度与硅胶骨架密度相近的混合液.常使用的高密度溶剂为碘代和溴代烷类,再与适当比例的其他溶剂相配,配制出具有密度适宜的液体,使填料能呈“失重”状态悬浮于匀浆液中,...
尚志市17399514300: 色谱柱中SE - 30是什么 - ?
滑质延迪: SE-30是一种固定液:二甲基聚硅氧烷,安捷伦的HP-1就是这种填充柱的替代品,很好用.10%的浓度你可以买膜薄一点的毛细柱:如30m*0.53mm*0.5um,浓度更高,你可能买膜更厚的来用.
尚志市17399514300: 气液色谱柱的填充过程是怎么样的 - ?
滑质延迪: 填充柱制备过程 一、工具: 1、小型抽气机:两根橡胶管(一根50厘米的硅橡胶管,一根10厘米的普通输液管) 2、 橡胶棒(或套上输液管的玻璃棒,用于填柱时敲击用) 3、 滴定架,滴定夹 4、 烧杯、药勺 5、 小三角漏斗 6、 细金属棍(在...